貼壁細(xì)胞培養(yǎng)
細(xì)胞名稱：人肺癌細(xì)胞；A549
形態(tài)特性：上皮樣
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
培養(yǎng)條件：高糖DMEM?，10%FBS
傳代方法：1:3-1:8傳代
凍存條件：細(xì)胞凍存液
特征特性：該細(xì)胞系是1972年由Giard DJ通過(guò)肺癌組織移植培養(yǎng)建系的，源自一位58歲的白人男性。A549能通過(guò)胞苷二磷脂酰膽堿途徑合成富含不飽和脂肪酸的卵磷脂；角蛋白陽(yáng)性。?
細(xì)胞處理方法：
1.?細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至狀態(tài)良好后灌滿培養(yǎng)基運(yùn)輸，獲得細(xì)胞后用酒精棉球擦拭瓶口消毒，然后在超凈臺(tái)中操作。
2.?如細(xì)胞生長(zhǎng)至70%-80%，將瓶中的培養(yǎng)基移入無(wú)菌瓶中留作培養(yǎng)使用，保留5-8mL培養(yǎng)基在37℃、5%的CO2的溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)至90%-100%后，按要求消化傳代。
3.?棄去培養(yǎng)基，用無(wú)菌PBS或者其他緩沖液清洗細(xì)胞2次，加入適量胰蛋白酶消化（EDTA胰酶），待細(xì)胞完全脫壁后加培養(yǎng)基吹打混勻，分瓶培養(yǎng)。
特別注意：（如使用公共實(shí)驗(yàn)室或初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng)）
1. 我們使用自產(chǎn)培養(yǎng)基及進(jìn)口血清培養(yǎng)細(xì)胞，在您拿回細(xì)胞后，如想更換其它品牌培養(yǎng)基，請(qǐng)依照逐次替換的原則，先保留培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，多日多次代逐步更換，以減輕對(duì)細(xì)胞的刺激。
2. 如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請(qǐng)及時(shí)拍照并聯(lián)系售后。
3. 細(xì)胞任何售后問(wèn)題，均需拍照存檔并在2周之內(nèi)及時(shí)聯(lián)系客服。
相關(guān)產(chǎn)品及貨號(hào)：
高糖DMEM?（12100） ?????????????????????????????
細(xì)胞凍存液（24800） ???????????????????????????
1×PBS緩沖液(pH7.2- 7.4)（P1020）
0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液（T1300）?
關(guān)鍵字： A549人肺癌細(xì)胞;細(xì)胞生物學(xué)
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