去基因組DNA污染逆轉(zhuǎn)錄（RT）試劑盒
產(chǎn)品及特點(diǎn) 基因組 DNA（gDNA）污染是 RNA 樣品中普遍存在的污染，由于污染的 gDNA也會(huì)作為后續(xù) PCR 的模板，因此會(huì)嚴(yán)重干擾后續(xù) PCR 的效率和準(zhǔn)確性，尤其是定量PCR。目前的去污染方法主要是 UTP-UNG 法和 RNase-free DNase 法。前者簡(jiǎn)單，但成本高，主要用于臨床產(chǎn)品。后者必須把 gDNA 污染去除和 RT 反應(yīng)兩步分開進(jìn)行，并且需要加入 EDTA 來抑制 DNase 后才能進(jìn)入 RT 步驟，否則殘留的 DNase 會(huì)降解 PCR 引物。為了克服上述方法的缺點(diǎn)，本公司開發(fā)出了本產(chǎn)品，它具有下列特點(diǎn)：
1. 使用高效的基因組 DNA 去除劑，可以在 2-5 分鐘內(nèi)去除 gDNA 污染到 PCR 檢測(cè)不到的水平。并且去除 gDNA 污染后不需要終止試劑，而常用的 DNase 清除法需要酶切 30 分鐘以上，還需要 EDTA 終止反應(yīng)。
2. 去污染效率高，對(duì) ng 級(jí) gDNA 污染（在 20uL 體系中），去除率達(dá) 99.9%。
3. 跟 PCR 和熒光定量 PCR 兼容，且后續(xù) PCR 可用 Pfu 等古細(xì)菌 DNA 聚合酶（多為高保真酶），而 UTP-UNG 去污染法則跟其不兼容。
4. 本試劑盒所用的 MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶為 RNase H 缺失突變，故合成 cDNA 片段長度可達(dá) 12 kb。還能用于 GC 含量高，二級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜的 RNA 模板。
5. 本產(chǎn)品規(guī)格足夠 50 次 20uL 體系的 RT 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只用于科研。
去基因組DNA污染逆轉(zhuǎn)錄（RT）試劑盒
規(guī)格及成分 成份 編號(hào) 十孔盒包裝
基因組 DNA 清除劑 190501a 50 uL（紅色蓋）
10×基因組 DNA 清除劑緩沖液 190501b 100 uL（綠色蓋）
2×RT MagicMix 170403 500uL（白色蓋）
RNase-free 水 80403 1 mL（亮黃蓋）
使用手冊(cè) 190501sc 1 份
去基因組DNA污染逆轉(zhuǎn)錄（RT）試劑盒運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存, 有效期一年。
自備試劑 RNA 模板。
注意事項(xiàng)1. 實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)注意避免RNase污染，防止RNA降解或?qū)嶒?yàn)中的交叉污染。
2. 使用之前請(qǐng)充分輕柔混勻各成分，以防因鹽離子濃度局部不均影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
3. 本產(chǎn)品使用后應(yīng)盡快放回-20℃。
4. RNA模板的完整性對(duì)cDNA合成效率起著決定性作用，因此請(qǐng)選擇可靠的RNA提取/純化方法。
5. 操作人員請(qǐng)帶口罩和一次性手套，并經(jīng)常更換手套。
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