檢測(cè)原理：

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。特異性小鼠 TNF-α抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和生物素化的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)孵育，樣本中存在的TNF-α與固相抗體和檢測(cè)抗體結(jié)合，形成免疫復(fù)合物。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后，加入顯色底物，避光顯色。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm波長(zhǎng)(參考校正波長(zhǎng)540nm或570nm)測(cè)定吸光度值。

檢測(cè)類型：雙抗夾心法

形式：預(yù)包被96孔板

檢測(cè)樣本類型：細(xì)胞上清液，血清，血漿

上樣量：100ul

試劑盒組分：

預(yù)包被96孔板、標(biāo)準(zhǔn)品、抗小鼠TNF-α檢測(cè)抗體、稀釋用緩沖液、顯色液（A、B）、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說(shuō)明書一份。

靈敏度：5.5 pg/mL

檢測(cè)范圍：31.2 - 2,000 pg/mL

回收率范圍：88-107%

保存方法：2-8℃

標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

背景：

腫瘤壞死因子alpha（TNF-α），又稱為cachectin和TNFSF1A，是腫瘤壞死因子超家族的原型配體。它是一個(gè)多效因子，在炎癥反應(yīng)、免疫系統(tǒng)發(fā)育、細(xì)胞凋亡和類脂代謝中起到一個(gè)中心作用。TNF-α也參與到許多病理過(guò)程，包括哮喘、克羅恩病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、神經(jīng)性疼痛、肥胖癥、II型糖尿病、感染性休克、自身免疫和癌癥。人TNF-α是一個(gè)26 kDa的II型跨膜蛋白，由一個(gè)35個(gè)氨基酸（aa）胞內(nèi)域、一個(gè)21 aa跨膜段和一個(gè)177 aa的胞外域（ECD）組成。在ECD區(qū)，人TNF-α和獼猴有97%氨基酸序列同源性，與牛、犬、棉鼠、馬、貓、小鼠、豬、大鼠有71-92%的氨基酸序列同源性。它可以由多種不同細(xì)胞如免疫細(xì)胞、上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)生。TNF-α能誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞的裂解，并與可溶性TNF RI結(jié)合，產(chǎn)生下游細(xì)胞的跨膜轉(zhuǎn)到信號(hào)。TACE/ADAM17可引起含有TNF-α細(xì)胞膜的脫落從而釋放具有活性的TNF-α細(xì)胞因子，它是由TNF-α胞外可溶性結(jié)構(gòu)構(gòu)成的三聚體，分子量為55 kDa。

TNF-α有兩個(gè)受體：TNF RI和TNF RII。TNF RI分子量為55-60 kDa，表達(dá)廣泛；TNF RII分子量為78-80 kDa，僅限于造血細(xì)胞表達(dá)。兩者都是以同源三聚體形式表達(dá)；TNF-α和TNF RI和TNF RII結(jié)合的親和力相似，可促進(jìn)NFκB的激活 。然而，僅有TNF RI具有細(xì)胞死亡結(jié)構(gòu)域，能引發(fā)細(xì)胞凋亡。這兩種可溶性受體都被釋放到人的血清和尿液中，并能中和TNF-α的活性。