檢測原理：

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術。特異性小鼠 TNF-α抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和生物素化的檢測抗體，經過孵育，樣本中存在的TNF-α與固相抗體和檢測抗體結合，形成免疫復合物。洗滌去除未結合的物質后，加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后，加入顯色底物，避光顯色。加入終止液終止反應，在450 nm波長(參考校正波長540nm或570nm)測定吸光度值。

檢測類型：雙抗夾心法

形式：預包被96孔板

檢測樣本類型：細胞上清液，血清，血漿

上樣量：100ul

試劑盒組分：

預包被96孔板、標準品、抗小鼠TNF-α檢測抗體、稀釋用緩沖液、顯色液（A、B）、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。

靈敏度：5.5 pg/mL

檢測范圍：31.2 - 2,000 pg/mL

回收率范圍：88-107%

保存方法：2-8℃

標準曲線圖

背景：

腫瘤壞死因子alpha（TNF-α），又稱為cachectin和TNFSF1A，是腫瘤壞死因子超家族的原型配體。它是一個多效因子，在炎癥反應、免疫系統(tǒng)發(fā)育、細胞凋亡和類脂代謝中起到一個中心作用。TNF-α也參與到許多病理過程，包括哮喘、克羅恩病、類風濕關節(jié)炎、神經性疼痛、肥胖癥、II型糖尿病、感染性休克、自身免疫和癌癥。人TNF-α是一個26 kDa的II型跨膜蛋白，由一個35個氨基酸（aa）胞內域、一個21 aa跨膜段和一個177 aa的胞外域（ECD）組成。在ECD區(qū)，人TNF-α和獼猴有97%氨基酸序列同源性，與牛、犬、棉鼠、馬、貓、小鼠、豬、大鼠有71-92%的氨基酸序列同源性。它可以由多種不同細胞如免疫細胞、上皮細胞、內皮細胞、腫瘤細胞表達產生。TNF-α能誘導腫瘤細胞和病毒感染細胞的裂解，并與可溶性TNF RI結合，產生下游細胞的跨膜轉到信號。TACE/ADAM17可引起含有TNF-α細胞膜的脫落從而釋放具有活性的TNF-α細胞因子，它是由TNF-α胞外可溶性結構構成的三聚體，分子量為55 kDa。

TNF-α有兩個受體：TNF RI和TNF RII。TNF RI分子量為55-60 kDa，表達廣泛；TNF RII分子量為78-80 kDa，僅限于造血細胞表達。兩者都是以同源三聚體形式表達；TNF-α和TNF RI和TNF RII結合的親和力相似，可促進NFκB的激活 。然而，僅有TNF RI具有細胞死亡結構域，能引發(fā)細胞凋亡。這兩種可溶性受體都被釋放到人的血清和尿液中，并能中和TNF-α的活性。