"BGC-823 Cell:人胃腺癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:建自一位62歲的胃癌患者 HCM細胞系相關產(chǎn)品:HEK-AD293細胞、AG 9細胞、WIL2-S細胞 CHL-IU細胞系相關產(chǎn)品:KU-812-F細胞、SK-BR3細胞、QGY-7703細胞 NOZ細胞系相關產(chǎn)品:H196細胞、NCI-H-69細胞、THP-1細胞 SW-1116細胞系相關產(chǎn)品:CL1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、MODE-K細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 BGC-823 Cell:人胃腺癌細胞系 細胞培養(yǎng)實驗相關問題總結:支原體(mycoplasma)污染的細胞,是否能以肉眼觀察出異狀?不能。除極有經(jīng)驗之專家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細胞株,無法以其外觀分辨之;支原體污染會對細胞培養(yǎng)有何影響?支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數(shù),代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進行實驗前,必須確認細胞為mycoplasma-free,實驗結果之數(shù)據(jù)方有意義;偵測出細胞株有支原體污染時,該如何處理?直接滅菌后丟棄,以避免污染其它細胞株;CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之;為何培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,顏色會偏暗紅色,且pH值會越來越偏堿性?培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,培養(yǎng)基內(nèi)之CO2會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結果,將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時,可以通入無菌過濾之CO2,以調(diào)整pH值;購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:3傳代,2-3天換液一次 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 MLO-Y4細胞系相關產(chǎn)品:HELF細胞、Hs 832(C).T細胞、Jiyoye (P-2003)細胞 FTC133細胞系相關產(chǎn)品:HCC1395細胞、HSAS1細胞、HCA 7細胞 AA-Mel細胞系相關產(chǎn)品:SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞 BT 20細胞系相關產(chǎn)品:NCI-HUT-460細胞、NE-4C細胞、NCI-H2122細胞 HFL-I細胞系相關產(chǎn)品:Tregs細胞、HT1376細胞、H-295細胞 細胞生長特性:貼壁生長 BGC-823 Cell:人胃腺癌細胞系 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! 細胞形態(tài)特性:上皮樣 BEAS-2B細胞系相關產(chǎn)品:PA-1細胞、143TK-細胞、HCC0078細胞 E304細胞系相關產(chǎn)品:SR-786細胞、3LL細胞、U138細胞 HL7702細胞系相關產(chǎn)品:HPAFII細胞、MCAEC細胞、H-1373細胞 WEHI 3細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H292細胞、Hs27F細胞、Clone 15 HL-60細胞 Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞 UMUC1細胞系相關產(chǎn)品:HLE細胞、HFL-1細胞、H-2029細胞 Caco 2細胞系相關產(chǎn)品:HEM-L細胞、hSCC-25細胞、FRO細胞 BGC-823 Cell:人胃腺癌細胞系 SKMEL1細胞系相關產(chǎn)品:HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞 Hs-729-T細胞系相關產(chǎn)品:RPMI8226細胞、OCILY-10細胞、MM96L細胞 SCC 9細胞系相關產(chǎn)品:MLE-12細胞、SK-MEL-24細胞、GM03671C細胞 P3/NS1/1-Ag4-1細胞系相關產(chǎn)品:EU-3細胞、GM 2132細胞、SHP-77細胞 JIMT1細胞系相關產(chǎn)品:SKMel-28細胞、CL40細胞、Calu-6細胞 HCA 7細胞系相關產(chǎn)品:H-292細胞、GC1-SPG細胞、AR4-IP細胞 RGC6細胞系相關產(chǎn)品:SF-295細胞、MFE 296細胞、KYSE 180細胞 H220細胞系相關產(chǎn)品:H-676細胞、L cells細胞、EL 4細胞 Y-79細胞系相關產(chǎn)品:MBT2細胞、DITNC1細胞、CX-1細胞 LIXC-002細胞系相關產(chǎn)品:B4G12細胞、MRC9細胞、M059J細胞 UWB1-289細胞系相關產(chǎn)品:A2780/CP細胞、HHFK細胞、DBTRG-05MG細胞 HCC-1954BL細胞系相關產(chǎn)品:Walker256-TC細胞、WSUDLCL2細胞、MEF細胞 SupB15W細胞系相關產(chǎn)品:SNU387細胞、EOMA細胞、COLO-16細胞 FDCP-1細胞系相關產(chǎn)品:M21細胞、HCC1599細胞、GT1-1細胞 TE 354.T細胞系相關產(chǎn)品:NFHIOSE-80細胞、EB-1細胞、RPMI 7951細胞 TE-4細胞系相關產(chǎn)品:GOS-3細胞、Hs 675.T細胞、SNT-8細胞 Calu3細胞系相關產(chǎn)品:PY8119細胞、CV1細胞、TM3細胞 Namalwa細胞系相關產(chǎn)品:A 253細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞、Mc Ardle 7777細胞 C32r細胞系相關產(chǎn)品:NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞系相關產(chǎn)品:EFM19細胞、DHL-2細胞、U937細胞 NCIH2452細胞系相關產(chǎn)品:B-3細胞、NMCG1細胞、HPMEC細胞 SUDHL8細胞系相關產(chǎn)品:OCI Ly19細胞、N1E115細胞、GM05887細胞 SUM190PT細胞系相關產(chǎn)品:PLA-801C細胞、MLE 12細胞、NOMO1細胞 NHA細胞系相關產(chǎn)品:MPP-89細胞、CNE細胞、NIE 115細胞 IPLB-SF-21-AE細胞系相關產(chǎn)品:SKMEL24細胞、SCC154細胞、JC細胞 KMS-18細胞系相關產(chǎn)品:MALME.3M細胞、TCam 2細胞、HH [Human lymphoma]細胞 SKM-1細胞系相關產(chǎn)品:HGMC細胞、GM00637H細胞、L cells細胞 MiaPaCa-2細胞系相關產(chǎn)品:TW-039細胞、FET細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞 HCC 2185細胞系相關產(chǎn)品:H-1930細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞、N2a細胞 JF305細胞系相關產(chǎn)品:HT115細胞、HT22細胞、HTh74細胞 HS-766-T細胞系相關產(chǎn)品:HuCCT-1細胞、COLO 394細胞、ONS-76細胞 KYSE 410細胞系相關產(chǎn)品:ZR7530細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、786.O細胞 PG-4細胞系相關產(chǎn)品:SuDHL 5細胞、786-O細胞、Karpas299細胞 4175細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR433細胞、MDCK II細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞 OKAC1細胞系相關產(chǎn)品:P3JHR1細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、MC57細胞 OCI/AML-3細胞系相關產(chǎn)品:MDST8細胞、293FT細胞、He La細胞 C-33 A細胞系相關產(chǎn)品:ST2細胞、KRC-Y細胞、VP 229細胞 LOU-NH-91細胞系相關產(chǎn)品:MCF-7/AdrR細胞、SUP-M2細胞、C-33-A細胞 Ca Ski細胞系相關產(chǎn)品:Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、D-407細胞 PLC細胞系相關產(chǎn)品:Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞 NIH 3T6細胞系相關產(chǎn)品:CP70細胞、H1373細胞、SKNBE(2c)細胞 BRL 3A細胞系相關產(chǎn)品:PFSK細胞、UO.31細胞、HCC1954BL細胞 CHL1細胞系相關產(chǎn)品:MBMEC細胞、NCI-H220細胞、MDA157細胞 BGC-823 Cell:人胃腺癌細胞系 HFF-1細胞系相關產(chǎn)品:MHCC 97-L細胞、McARH7777細胞、HCC827細胞 TOV-21G細胞系相關產(chǎn)品:H22-H8D8細胞、H865細胞、SNU-251細胞 RPE-1細胞系相關產(chǎn)品:Human Hepatocyte Line 5細胞、H-1793細胞、HFLS細胞 MuM-2C細胞系相關產(chǎn)品:Hs688(A)T細胞、Calu6細胞、OV2008細胞 Daoy細胞系相關產(chǎn)品:KMB-17細胞、UMRC-2細胞、Rat-2細胞 VAESBJ細胞系相關產(chǎn)品:ELD-1細胞、NCI-H322T細胞、MyLa2059細胞 A-375細胞系相關產(chǎn)品:H647ell細胞、A.704細胞、Hs683T細胞 NK10a細胞系相關產(chǎn)品:HuTu 80細胞、UMUC14細胞、SN12PM6細胞 HLMVEC細胞系相關產(chǎn)品:MKN 7細胞、ML-2細胞、HPaSteC(HPSC)細胞 HEK293-F細胞系相關產(chǎn)品:P3-X63Ag8.653細胞、SKG3A細胞、B4G12細胞 FHL124細胞系相關產(chǎn)品:GCT0404細胞、MADISON LUNG TA-109細胞、HeLa-229細胞 CAL 78細胞系相關產(chǎn)品:SNU-387細胞、H-1915細胞、HCC 70細胞 "
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