"MZ-CRC-1 Cell:人髓樣甲狀腺癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:甲狀腺髓樣癌;女性 beta TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1788細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞、STTG1細胞 Centre Antoine Lacassagne-12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 134VI細胞、HOS細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞 MHHCALL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-24細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞、WM35細胞 SVOG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-1-P細胞、HCC94細胞、B10BR細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 MZ-CRC-1 Cell:人髓樣甲狀腺癌細胞系 細胞培養(yǎng)實驗相關(guān)問題總結(jié):支原體(mycoplasma)污染的細胞,是否能以肉眼觀察出異狀?不能。除極有經(jīng)驗之專家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細胞株,無法以其外觀分辨之;支原體污染會對細胞培養(yǎng)有何影響?支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數(shù),代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進行實驗前,必須確認細胞為mycoplasma-free,實驗結(jié)果之?dāng)?shù)據(jù)方有意義;偵測出細胞株有支原體污染時,該如何處理?直接滅菌后丟棄,以避免污染其它細胞株;CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之;為何培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,顏色會偏暗紅色,且pH值會越來越偏堿性?培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,培養(yǎng)基內(nèi)之CO2會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果,將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時,可以通入無菌過濾之CO2,以調(diào)整pH值;購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 U-2 OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL 1-0細胞、HSAS3細胞、MMQ細胞 Hu-P-T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM1細胞、NCI-H28細胞、526mel細胞 H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUASMC細胞、JHH-2細胞、Daudi細胞 MLMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-266細胞、GDM-1細胞、HuT-78細胞 AGS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Glioma 261細胞、B 95.8細胞、H-596細胞 細胞生長特性:貼壁 MZ-CRC-1 Cell:人髓樣甲狀腺癌細胞系 細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 SCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-175-VII細胞、SO-RB50細胞、NCI-H1581細胞 RPMI7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞 SUDHL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H345細胞、NW-MEL-38細胞、H-676B細胞 D-324 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-182細胞、HCT-116細胞、H2066細胞 UPCI-SCC-090細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U20-S細胞、R3/1細胞、OVMANA細胞 P-2003細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 15細胞、TYK-nu細胞、HSAS4細胞 HEL 299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2085細胞、MM.1S細胞、L-5178-Y細胞 MZ-CRC-1 Cell:人髓樣甲狀腺癌細胞系 LC1-Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCI1細胞、NBL-2細胞、Pa17C細胞 NCIH660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-14細胞、UM-RC-2細胞、KAT5細胞 H-2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Japanese Tissue Culture-39細胞、SBC-5細胞、C4 I細胞 SU4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW38細胞、MCA-38細胞、CAL-39細胞 Panc 04.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono-Mac-1細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞、L428細胞 NCI-H78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK LU 1細胞、PK-136細胞、HEL-1細胞 SUDHL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M (TK-)細胞、SV-HUC細胞、NCTC929細胞 DBTRG-05MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBTr細胞、HB611細胞、NCI-SNU-216細胞 KYSE-140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-453細胞、PCI-SG231細胞、BV-2細胞 KYSE-140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-453細胞、PCI-SG231細胞、BV-2細胞 GM04678細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388細胞、L cells (TK-)細胞、GCT細胞 MDA-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JCA1細胞、CHP-100細胞、Caco-2/BBe 1細胞 SW-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B35細胞、RH35細胞、MCF-7B細胞 BJ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、T241細胞、NCI-H510A細胞 Henrietta Lacks cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM 9細胞、OVHM細胞、MOLT16細胞 BHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TEC細胞、I90細胞、H2085細胞 SUD4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNTEC細胞、T HEECs細胞、Hs688(A)T細胞 PK136細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS60細胞、Vero-76細胞、Institute for Medical Research-90細胞 SJSA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PECAPJ34細胞、HAC-84細胞、MDA.MB.435細胞 Tu 212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-187細胞、769P細胞、ssMCF7細胞 SKml2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63-Ag8細胞、C-32細胞、MOLM16細胞 SKml2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63-Ag8細胞、C-32細胞、MOLM16細胞 HBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP clone FGC細胞、U-266 AR1細胞、LS-174T細胞 H-2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF126細胞、MDA231-LM2-4175細胞、TF1細胞 HCC1588細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-211細胞、MDA-kb2細胞、H-3255細胞 BT 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-460細胞、NE-4C細胞、NCI-H2122細胞 C1R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293細胞、UMNSAH-DF1細胞、NOR 10細胞 OC316細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320HSR細胞、WEHI-279細胞、Human Embryo Kidney-2細胞 A-375細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647ell細胞、A.704細胞、Hs683T細胞 RT-BM 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B95.8細胞、SK MEL-28細胞、CemT4細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY10細胞、RCC23細胞、CRFK細胞 P3X63細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3570細胞、L6565細胞、TE 354.T細胞 786-0WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PATU-S細胞、BXPC3細胞、TW 01細胞 Hepa 1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2122細胞、UCH-1細胞、OCM1細胞 MDCK.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-10A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、Hep G2-Luc細胞 GM03573A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 5.04細胞、NOMO1細胞、LLC-PK1細胞 NCI-H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-295細胞、H1341細胞、NCI-H226細胞 C-33 A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST2細胞、KRC-Y細胞、VP 229細胞 RS(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞 U251-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞 U251-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞 HT 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC5細胞、H2171細胞、KYSE520細胞 MCFs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK (AD293)細胞、PG-4 S+L-細胞、Ramos.G6.C10細胞 MZ-CRC-1 Cell:人髓樣甲狀腺癌細胞系 WiDr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF細胞、TOV-112細胞、L cell細胞 NTera2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK13細胞、LOUNH91細胞、HEK293A細胞 OSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHIN3細胞、SUDHL-4細胞、OCI-Ly07細胞 HS 1.Tes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCFs細胞、NCI-747細胞、NCI-H-69細胞 COLO 357細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB-49細胞、PC 61-5-3細胞、AR42J細胞 Hce8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-154細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、CMT-167細胞 PNEC30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly7細胞、FHC細胞、BCPAP細胞 RS4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3/M細胞、Ramos (RA 1)細胞、COLO-394細胞 OCI AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF細胞、H-1770細胞、T-HEECs細胞 SKN-SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs606細胞、GOS-3細胞、B16-F0細胞 H-196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC941122細胞、NCIH510細胞、X63Ag8-653細胞 373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OEC19細胞、A-875細胞、HRC-99細胞 "
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