"CTSC-3 Cell:人舌癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
C8161細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1238細胞、H196細胞、FO [Mouse myeloma]細胞
COLO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 766T細胞、OACP4 C細胞、Hs-675-T細胞
F9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、NCI-H2052細胞、A-1847細胞
SKMES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THLE2細胞、HcerEpic細胞、hFOB1.19細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
CTSC-3 Cell:人舌癌細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HAVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞
BALB/3T3 (clone A31)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR5細胞、MUTZ3細胞、BNL CL2細胞
MDAMB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293F細胞、SCL-I細胞、MDA436細胞
GM05862細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1404細胞、Hs695T細胞、OVCA-433細胞
C4-2 Bone metastatic細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-82細胞、SW-527細胞、NBL-7細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
CTSC-3 Cell:人舌癌細胞系
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
Baby Hamster Kidney 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2087細胞、DHBE細胞、H520細胞
GM05862細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1404細胞、Hs695T細胞、OVCA-433細胞
AR4-IP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S3 HeLa細胞、Scott and White No. 13細胞、Rat Fetal Lung-6細胞
Metastatic Variant-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2291細胞、GH 3細胞、Granta 519細胞
HBL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2-OS細胞、VSMC細胞、D324細胞
FRO81-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m細胞、SW1088細胞、NCI-H196細胞
HCC 94細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624mel細胞、SK-MEL 28細胞、hTERT RPE-1細胞
CTSC-3 Cell:人舌癌細胞系
H-838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCLP-1細胞、ACC3細胞、IMR 90細胞
DK-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-12T細胞、NRCC細胞、OCI-LY-18細胞
V-79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBZY 1細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞、A204細胞
Hu-P-T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV362細胞、697細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞
L-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12PM6細胞、HANK-1細胞、Hs.27細胞
Gerner 7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 821.T細胞、RT 112細胞、HEK 293A細胞
OCI/AML-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR.OV1細胞、PTK 2細胞、COLO 16細胞
Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH/3T3細胞、BV-173細胞、HEK/293細胞
ROS 17/28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-427細胞、BpRcl細胞、Ly19細胞
ROS 17/28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-427細胞、BpRcl細胞、Ly19細胞
H1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞
OC316細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320HSR細胞、WEHI-279細胞、Human Embryo Kidney-2細胞
SHEE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320/DM細胞、SBC5細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3M細胞、HPAF2細胞、MLM細胞
KATOIII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-841細胞、Z310細胞、NIH:OVCAR-4細胞
MCF7-CTRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK HEP-1細胞、RS411細胞、Caco-2細胞
Panc-327細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC-12細胞、SN12C細胞、SNU-C2B細胞
CV-1 in Origin Simian-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/ADR細胞、U937細胞、Vero C1008細胞
Michigan Cancer Foundation-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST486細胞、VP303細胞、3T3-J2細胞
GC9811-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip973細胞、HNE-3細胞、BE2_C細胞
Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL4細胞、HT細胞、HCEC-B4G12細胞
SKNFI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、NCI-H1155細胞、WBF344細胞
hTERT RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8226細胞、MHCC97-H細胞、H-2108細胞
SNU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K-1735細胞、SNU449細胞、MM-1S細胞
MHCC-97細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343細胞、LL2細胞、PTK-1細胞
SKNBE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、IMCD3細胞、SCL I細胞
OSKM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMEC/D3細胞、Hs 839.T細胞、CCD-841-CoTr細胞
NOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、RPMI 1846細胞、DoHH2細胞
MDA-MB-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-226AR1細胞、SNU-216細胞、HLE B-3細胞
C2BBe1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞
TCCSUP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DiFi細胞、FOX-NY細胞、KYSE-70細胞
BRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞
JCA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTC-200細胞、H-1975細胞、Fox/NY細胞
SK-RC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT 26細胞、L 1210細胞、TE 32.T細胞
GC-2spd(ts)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、TMD8細胞、SKNBE-1細胞
143BTK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9細胞、NCIH1770細胞、HCEC細胞
HL60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-3 [Human leukocytes]細胞、Farage細胞、MDA MB 436細胞
Gerner 7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 821.T細胞、RT 112細胞、HEK 293A細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 375細胞、RLE-6TN細胞、NCM-460細胞
HOP 92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr/S細胞、624mel細胞、DI-TNC1細胞
MDST8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2286細胞、A-704細胞、MBdSMC細胞
K422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N2a細胞、DHL-8細胞、Chang Cells細胞
NCIH2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190細胞、RCF細胞、MN 60細胞
CTSC-3 Cell:人舌癌細胞系
DLD1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AgC11x3A細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、Mahlavu細胞
HCT 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS42細胞、P-388D1細胞、WEHI 231細胞
Hep-G2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Emory University-2細胞、FK81細胞、CCC-HSF-1細胞
SEG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1522細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞、AR4-2J細胞
LP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE520細胞、Colon26細胞、HIBEC細胞
RGC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI7666細胞、RKO-AS45-1細胞、RCC10 RGB細胞
CATHa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMB17細胞、GM 637細胞、GM 637細胞
H-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞
NS20-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F442-A細胞、HeLa229細胞、FM-88細胞
ANA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBE4細胞、Rat 2細胞、NCI-460細胞
Hs737T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN 205細胞、MDAMB468細胞、HA細胞
C4-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BpRc1細胞、LAN-6細胞、Bac 1.2F5細胞
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