"MC-26 Cell:小鼠結腸癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
SNU387細胞系相關產(chǎn)品:3T3L1細胞、SNU739細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞
MH-22a細胞系相關產(chǎn)品:High-5細胞、NCI-H2286細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞
HCC-95細胞系相關產(chǎn)品:Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞
NCI-H345細胞系相關產(chǎn)品:MOVAS-1細胞、MAC1細胞、K-1735細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MC-26 Cell:小鼠結腸癌細胞系
細胞凍存基本方法:1.細胞:選對數(shù)生長期細胞,收集細胞24小時前換液一次。2.計數(shù):按常規(guī)方法把細胞制成細胞懸液,計數(shù),令細胞密度達5×10(6)/ml,離心去上清,吸入離心管中。3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。4.分裝:分裝入無菌安剖中,每安剖加1.5毫升細胞懸液。5.封口:用塑料安剖時擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細檢查,定要封嚴,必要時可浸入藍色液中觀察,為安全起見,把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細胞名稱,凍存日期,以便日后查找。細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
培養(yǎng)細胞真的不難,最關鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SCC15細胞系相關產(chǎn)品:H1092細胞、NCI-H1694細胞、Colo699細胞
Tca-8113細胞系相關產(chǎn)品:KM12細胞、Hca-F細胞、NP-69細胞
SW1271細胞系相關產(chǎn)品:BT325細胞、P3X63 AG8-653細胞、3T3L1細胞
SK_N_FI細胞系相關產(chǎn)品:UMUC1細胞、SUDHL4細胞、HMC-1細胞
U 937細胞系相關產(chǎn)品:EAHY-926細胞、N1S1細胞、HBdSMC細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
MC-26 Cell:小鼠結腸癌細胞系
細胞復蘇相關注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉速和時間,轉的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候對一般細胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
COLO824細胞系相關產(chǎn)品:U87MG細胞、G422細胞、H146細胞
CCRF細胞系相關產(chǎn)品:EC9706細胞、SP2/0 Ag-14細胞、EA hy 926細胞
SNK-1細胞系相關產(chǎn)品:CCD 966SK細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-2085細胞
HuO9細胞系相關產(chǎn)品:SW1990細胞、MDA-436細胞、BT.549細胞
MEC1細胞系相關產(chǎn)品:J 111細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞、SK Col 1細胞
RBVEC細胞系相關產(chǎn)品:OCI AML2細胞、HDLM2細胞、HBZY 1細胞
HCC1500細胞系相關產(chǎn)品:OEC33細胞、HTR-8/SV neo細胞、H1417細胞
MC-26 Cell:小鼠結腸癌細胞系
N-2a細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL16細胞、B16-BL6細胞、NCI.H226細胞
H-929細胞系相關產(chǎn)品:C3H/10T1/2 CL8細胞、ZR751細胞、NCI-H661細胞
NIH:OVCAR3細胞系相關產(chǎn)品:NRK 52E細胞、Epstein-Barr-2細胞、SR細胞
SW962細胞系相關產(chǎn)品:A375.S2細胞、HTR-8/SVneo細胞、3T6-Swiss albino細胞
SNU449細胞系相關產(chǎn)品:BNL 1MEA.7R.1細胞、NCI-H1975細胞、HUC-1細胞
LS411細胞系相關產(chǎn)品:H-2195細胞、NCI-H1668細胞、HCC1954細胞
MDA 1386細胞系相關產(chǎn)品:LC2/Ad細胞、Huh-7.5.1細胞、HCC2185細胞
OVCA433細胞系相關產(chǎn)品:EC-9706細胞、JCA-1細胞、NCI-H2029細胞
NTERA2-D1細胞系相關產(chǎn)品:TGBC11TKB細胞、H378細胞、BT-549細胞
NTERA2-D1細胞系相關產(chǎn)品:TGBC11TKB細胞、H378細胞、BT-549細胞
hEEC細胞系相關產(chǎn)品:Pa017C細胞、A-2780細胞、MM.1S細胞
WM 239細胞系相關產(chǎn)品:PAEC細胞、DLD-1細胞、HCT8細胞
RN細胞系相關產(chǎn)品:SCC-4細胞、4T1細胞、NCI-H1963細胞
HeLa.S3細胞系相關產(chǎn)品:ND7/23細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、BT474細胞
P-36細胞系相關產(chǎn)品:HCT_116細胞、Chinese Hamster Ovary細胞、VM-CUB-1細胞
H740細胞系相關產(chǎn)品:Neuro2a細胞、SUM-190細胞、IOSE80細胞
H295細胞系相關產(chǎn)品:T173細胞、CMK細胞、KRCY細胞
Kelly細胞系相關產(chǎn)品:OSC19細胞、CHL-IU細胞、CCD-1095Sk細胞
Roswell Park Memorial Institute 1846細胞系相關產(chǎn)品:PLC PRF 5細胞、HuT-102細胞、GM02219細胞
T/G HA-VSMC細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR-433細胞、PLC/PRF5細胞、NCI-H1563細胞
SK-N-BE-2細胞系相關產(chǎn)品:ID8/MOSEC細胞、BpRc1細胞、SK-CO-1細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關產(chǎn)品:Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞
RCC-10細胞系相關產(chǎn)品:SKCO-1細胞、OCI-Ly 18細胞、NCIH1355細胞
OP9細胞系相關產(chǎn)品:SNU354細胞、P3X63 Ag8細胞、HCC-1187細胞
NCIH1105細胞系相關產(chǎn)品:ST 486細胞、CT26.WT細胞、H-1299細胞
T98-G細胞系相關產(chǎn)品:H-28細胞、D341 Med細胞、OV1/P細胞
PLB-985細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H676細胞、CAL 12細胞、KMH2細胞
KYSE50細胞系相關產(chǎn)品:HMVEC細胞、OCI-Ly10細胞、EJ-1細胞
NH-6細胞系相關產(chǎn)品:SKNBE-2細胞、HS0578T細胞、SK-MES1細胞
A-375細胞系相關產(chǎn)品:H647ell細胞、A.704細胞、Hs683T細胞
HSC5細胞系相關產(chǎn)品:SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞
G-292 clone A141B1細胞系相關產(chǎn)品:EB2細胞、NCIH244細胞、LLC1細胞
BGC-823細胞系相關產(chǎn)品:Pa17C細胞、7404細胞、H-2106細胞
OACP4 C細胞系相關產(chǎn)品:H1581細胞、LLCPK1細胞、MOLT4細胞
3T6-Swiss albino細胞系相關產(chǎn)品:PC-9/S1細胞、STC-1細胞、G361細胞
OCI Ly1細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1437細胞、P3X63 Ag8.653細胞、SUDHL-2細胞
LWnt3A細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2195細胞、NCI-H2330細胞、SGC-7901細胞
WB F344細胞系相關產(chǎn)品:T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞
Buffalo Rat Liver-3A細胞系相關產(chǎn)品:VMRCLCD細胞、Hs940.T細胞、Verda reno細胞
SBC-5細胞系相關產(chǎn)品:SACC-LM細胞、Soleus clone 8細胞、253J-Bladder-V細胞
COV 504細胞系相關產(chǎn)品:HGBEC細胞、NCI-H520細胞、L-132細胞
NCI-H1672細胞系相關產(chǎn)品:BL2141細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞、OVCA432_Bast細胞
EFO 27細胞系相關產(chǎn)品:TU 686細胞、Kit-225細胞、JB6 [Mouse]細胞
MC-26 Cell:小鼠結腸癌細胞系
HCC-2218細胞系相關產(chǎn)品:WRL 68細胞、SCC4細胞、RT-BM 1細胞
RASMCs細胞系相關產(chǎn)品:U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞
Saos2細胞系相關產(chǎn)品:BHK21細胞、CL MC/9細胞、RH-30細胞
BCaP-37細胞系相關產(chǎn)品:HCT-FET細胞、High Five細胞、H22-H8D8細胞
H-209細胞系相關產(chǎn)品:253J-BV細胞、UCLA RO-81A-1細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞
STO細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1092細胞、WEHI3B細胞、H-146細胞
OKa-C-1細胞系相關產(chǎn)品:RPMI-1788細胞、C33細胞、N-87細胞
HTR8/SVneo細胞系相關產(chǎn)品:COS7細胞、P19細胞、Hela-Ap-1細胞
Madin Darby Canine Kidney細胞系相關產(chǎn)品:M20 [Human melanoma]細胞、SK-MEL5細胞、TM-4細胞
LIXC002細胞系相關產(chǎn)品:OCI/AML4細胞、Becker細胞、PC2細胞
A2780細胞系相關產(chǎn)品:RMG1細胞、Sf21細胞、CCD 841 CoTr細胞
Hca-F細胞系相關產(chǎn)品:ARO81細胞、OCM-1A細胞、HCCLM6細胞
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