"SK-MEL-5 Cell:人惡性黑色素瘤細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
HEP3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hos TE-85細胞、H647細胞、HMSC細胞
UO-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Kidney-2細胞、PC2細胞、MC-3T3細胞
Reh細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA922細胞、BT-474細胞、FHs74 Int細胞
OCI-Ly 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-HEP-1細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、J 82細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SK-MEL-5 Cell:人惡性黑色素瘤細胞系
細胞凍存基本方法:1.細胞:選對數(shù)生長期細胞,收集細胞24小時前換液一次。2.計數(shù):按常規(guī)方法把細胞制成細胞懸液,計數(shù),令細胞密度達5×10(6)/ml,離心去上清,吸入離心管中。3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。4.分裝:分裝入無菌安剖中,每安剖加1.5毫升細胞懸液。5.封口:用塑料安剖時擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細檢查,定要封嚴,必要時可浸入藍色液中觀察,為安全起見,把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細胞名稱,凍存日期,以便日后查找。細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:3-1:6傳代,2-3天換液1次。
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-23.5細胞、NCI-H676細胞、Mel-MeWo細胞
DMS 53細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM C7細胞、VB細胞、Eca 109細胞
L cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C38細胞、CHO-K1細胞、Hep-G2細胞
MSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2227細胞、U87-MG細胞、Panc 10.05細胞
3T3-F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:rRTEC細胞、SK-LU-1細胞、Panc 05.04細胞
細胞生長特性:貼壁生長
SK-MEL-5 Cell:人惡性黑色素瘤細胞系
細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導,使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞形態(tài)特性:星形的
NCI-SNU-620細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-441細胞、MKN 28細胞、MHCC97-L細胞
Clone 166細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞
RK 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2405細胞、HNE3細胞、SNU601細胞
UMNSAH/DF#1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 149細胞、HELF細胞、IEC-18細胞
ST486細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GalK1細胞、BNCL-2細胞、CHP100細胞
COLO-394細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H810細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞、NBL-12細胞
McCoy細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1373細胞、HAVSMC細胞、CA-46細胞
SK-MEL-5 Cell:人惡性黑色素瘤細胞系
MILE SVEN 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3 CA細胞、Ha Fe細胞、GM04154細胞
KMS26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kuramochi細胞、NCI-441細胞、3T3 Swiss Albino細胞
MDAMB134VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R2C細胞、HCC0015細胞、RPMI 1846細胞
NCIH647細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞
NCIH661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YTMLC-90細胞、H1618細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞
NCI.H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE450細胞、751細胞、AG06814-J細胞
T. T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Experimental Mammary Tumour-6細胞、FDC-P1細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞
32D:cl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage OL細胞、LS174細胞、HepG2/C3A細胞
Human ErythroLeukemia細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC-1細胞、LAN6細胞、GM3570細胞
SNU1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE14o-細胞、PLA-801D細胞、RSC 96細胞
PANC0403細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-540細胞、RGE細胞、A704細胞
Immortal Pig Intestinal-2I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO Lec1細胞、LM TK negative細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞
SR786細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR-10細胞、NCIH1944細胞、639-V細胞
KMB-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354T細胞、IOSE-80細胞、Med 283細胞
NCI H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU.86.86細胞、CAL51細胞、SNU-387細胞
RBL-2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192B細胞、KB細胞、C4-2 Bone metastatic細胞
J82COT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MES 1細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞、SJCRH30細胞
WM 239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 164 TC細胞、NCI-H1672細胞、JHH-2細胞
YES-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H889細胞、OCI-LY-18細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞
P3J HR1-K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-101D細胞、HCC1008細胞、NCIH1563細胞
NFHIOSE-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、RBL2H3細胞、COLO394細胞
SW620細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta 519細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、Vero-76細胞
NPA 87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6TG細胞、32Dcl3細胞、Swiss 3T3細胞
OCIAML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG10815細胞、A2780/Taxol細胞、3T3 clone A31細胞
CMK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-411細胞、CV-1細胞、NCI-H128細胞
Rat-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00215A細胞、MDA231細胞、KU-812-F細胞
SUM 149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3-LL細胞、SHEE細胞、PE CA PJ34細胞
SF295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2081細胞、Lu-165細胞、PK136細胞
HuT102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA-801D細胞、RPMI-8226細胞、NCl-H157細胞
Tsup-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCFSTTG1細胞、58F細胞、HCC-1954BL細胞
RERF-LCMS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1882細胞、MAntle cell VERona-1細胞、BLO-11細胞
GM00637H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A101D細胞、SUDHL16細胞、IM-95細胞
IOSE 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA1細胞、F442A細胞、Hx147細胞
H838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:E.G7-OVA細胞、Hs 600.T細胞、AML-2細胞
D-283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KALS1細胞、HCC1954 BL細胞、RA-FLSs細胞
NEC8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Rca-B細胞、KYSE410細胞
Opossum Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK RC 52細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、NHA細胞
PC-3M-IE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231-GFP細胞、M059J細胞、CCK-81細胞
BNCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI 2細胞、QGY-7701細胞、A72細胞
MDA-MB-231 #4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC 1細胞、EBNA293細胞、ROS17/28細胞
QGY-7703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLC7細胞、PFSK1細胞、MDCK2細胞
CA46細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-69細胞、C22 (Clara)細胞、Kasumi-6細胞
TE354.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S.B.細胞、HCC44細胞、RS1細胞
SK-MEL-5 Cell:人惡性黑色素瘤細胞系
H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB1細胞、RERF-LC-MS細胞、NU-GC-2細胞
TEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL.CL2細胞、SK Mel 2細胞、LM3細胞
MeSoTheliOma-211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、SU-DHL-1細胞
SKNO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-151細胞、IEC-18細胞、C32 [Human melanoma]細胞
KE 37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-4細胞、NCI-H747細胞、KP-N-RT細胞
Lewis lung carcinoma line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA157細胞、IPEC-1細胞、SNU119細胞
EOC20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞
PaTu8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs863T細胞、HCEC-B4G12細胞、HPBALL細胞
B104 [Rat neuroblastoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C57/B6-L細胞、HHL5細胞、C166細胞
SN12PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO679細胞、HeLa細胞、KYSE180細胞
A2780/Taxol細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT112細胞、OVMANA細胞、HSC/mHSC細胞
SNU484細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs819T細胞、MAD109細胞、CCD-841-CoN細胞
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