"SCL-I Cell:人皮膚磷癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
GT1-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LY-R細胞、BCaP 37細胞、2B4細胞
HPDLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2935細胞、MLO-Y4細胞、J774 A.1細胞
Hs27F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LWnt3A細胞、IPLB-Sf21-AE細胞、HLEpiC細胞
OCI-LY-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-251細胞、SK-ES-1細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SCL-I Cell:人皮膚磷癌細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NIH3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE 37細胞、Hs294細胞、HCC38細胞
Colon 26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye (P-2003)細胞、Ramos細胞、MHCC97細胞
SW954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS81細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞、HCC15細胞
HS5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:huH 1細胞、PLB985細胞、COLO829細胞
HeLa229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-BM-1細胞、CA-46細胞、OCI-Ly 7細胞
細胞生長特性:貼壁
SCL-I Cell:人皮膚磷癌細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
Hx147細胞系相關(guān)產(chǎn)品:343 MG細胞、BJAB細胞、COLO 394細胞
Lewis Lung Cancer細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Embryonic Bovine Tracheal cells細胞、HEL-1細胞、Caki-1細胞
SVG(P12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BPH1細胞、NCI-SNU-886細胞、COLO320-DM細胞
Mel-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞
CA-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T15細胞、VK2 (E6/E7)細胞、L6565細胞
KYSE450細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞
P3/NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EU-3細胞、GM 2132細胞、SHP-77細胞
SCL-I Cell:人皮膚磷癌細胞系
Hs 706.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC4細胞、HCC1438細胞、HCC-1599細胞
MCF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MONO-MAC 6細胞、NCIH1436細胞、LS 513細胞
MLFC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Carcinoma-38細胞、Karpas422細胞、MM1細胞
786O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞
Panc 05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST6細胞、CMEC/D3細胞、NUGC-4細胞
SKNBE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞
no-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaca.2細胞、KMB-17細胞、HRIF細胞
SKRC 39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM1細胞、HOCF細胞、NCI H69細胞
HS 445T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA.MB.435細胞、PK15細胞、L-cells細胞
HS 445T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA.MB.435細胞、PK15細胞、L-cells細胞
JROECL21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OsA-CL細胞、HCMEC(BL12-H)細胞、EBC-1/original細胞
NALM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos (RA)細胞、IPEC-J2細胞、CTV1細胞
UCLA SO M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER-1細胞、Mono Mac 6細胞、SF-295細胞
H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HM細胞、C32 [Human melanoma]細胞、NCIH526細胞
LC-1 sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM/C1細胞、NCI-H1618細胞、Bac1 2F5細胞
UCH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC10RGB細胞、LA-N-5細胞、H1944細胞
MNNG/HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2195細胞、Hs-852-T細胞、OCI-LY-3細胞
Pt K1 (NBL-3)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞
OVCAR 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM/S細胞、Ball 1細胞、JIMT細胞
RMG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE-280細胞、NCI-H2110細胞、H82sclc細胞
MCF 10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly01細胞、HBdSMC細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞
CHP126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC-11細胞、HCC2935細胞、LS174細胞
SKNEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuLEC-5a細胞、KM-12細胞、786-O細胞
High 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 327細胞、MA104細胞、MKN7細胞
TE32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH-3T3細胞、LC1-Sq細胞、MDA-MB-415細胞
Hs 895 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CP-70細胞、THP-1細胞、MLTC-1細胞
J774細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LuCL4細胞、SKM1細胞、H-2066細胞
HeLa229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-BM-1細胞、CA-46細胞、OCI-Ly 7細胞
CHO-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79細胞、MCF 7細胞、NCI-HUT-69細胞
MIHA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCS-2/8細胞、NPC-039細胞、PaTu8988s細胞
HL-60 Clone 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHUA細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、TE-6細胞
RFL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1197細胞、CAKI.1細胞、COLO 738細胞
NSC34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera 2/cl.D1細胞、H.Ep. #2細胞、LC1-Sq細胞
HIT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52細胞、PLA801C細胞、MEL-526細胞
RGM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC_7860細胞、MDA436細胞、HCC-1143細胞
KG-1a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HVSMC細胞、ROS17/28細胞、QG-56細胞
RPTEC/TERT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK-2細胞、H1819細胞、NT2細胞
FRH-0201細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-Clone-FGC細胞、H-125細胞、SCLC-21H細胞
McCoy B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU16細胞、NCIH1373細胞、BEL-7405細胞
C28/I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO/dhFr-細胞、Hos TE-85細胞、526 mel細胞
Hep G2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLU1細胞、NCI-H187細胞、C8166-CD4細胞
CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LUDLU 1細胞、MARC-145細胞、HCC0827細胞
DBTRG-05MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBTr細胞、HB611細胞、NCI-SNU-216細胞
SCL-I Cell:人皮膚磷癌細胞系
RC-4B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-14B細胞、MDA468細胞、MonoMac1細胞
H 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、BE(2)C細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞
M 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D.cl3細胞、NCIH187細胞、639 V細胞
HT115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-5細胞、SNU5細胞、SKMEL3細胞
PLC-PRF-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH345細胞、DU 4475細胞、207細胞
BTI-Tn5B14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 281.T細胞、CNE2細胞、LNCaP-ATCC細胞
CT-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Immortal Pig Intestinal-2I細胞、Hs-606-T細胞、A2780/Taxol細胞
HUT-125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92_1_7細胞、hTERT-RPE-1細胞、VeroE6細胞
SW962細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375.S2細胞、HTR-8/SVneo細胞、3T6-Swiss albino細胞
HLE-B3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2PK-3細胞、HTSMC細胞、RPE-hTERT細胞
MDA2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00079細胞、LC1/Sq細胞、NCTC clone 1469細胞
NCI H548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 38細胞、OK-WT細胞、NK92MI細胞
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