"NCI-H446 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：該細胞是１９８２年由CarneyD和GazdarAF等從一位小細胞肺癌患者的胸腔積液中建立的。細胞的原始形態(tài)并不具有小細胞肺癌特征。這個細胞株是小細胞肺癌的生化和形態(tài)學(xué)上的變種，表達神經(jīng)元特有的烯醇酶和腦型肌酸激酶同工酶；左旋多巴脫羧酶、蠶素、抗利尿激素、催產(chǎn)素或胃泌激素釋放肽未達到可檢測水平。與正常細胞相比，該細胞c-mycDNA序列擴增約２０倍，RNA增加１５倍。最初傳代培養(yǎng)基用含有５%FBS的RPMI１６４０，另外添加１０nM化可的松、０.００５mg/ml胰島素、０.０１mg/ml轉(zhuǎn)鐵
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
HuH6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel526細胞、LC1細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞
KTC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226細胞、UMC11細胞、A 375細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM19細胞、DHL-2細胞、U937細胞
細胞生長：貼壁
NCI-H446 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
細胞傳代方法：１：２傳代
HS-294細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL-4細胞、RIN-m5F細胞、Huh 7.5細胞
JROECL19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1/Sq細胞、U118細胞、BT483細胞
Molm 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-O7e細胞、HCO細胞、38C-13細胞
RH-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2452細胞、Psi2-DAP細胞、H498細胞
MHCC 97-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIT-1細胞、SW-626細胞、16HBEo-細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H446 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁/懸浮生長，混合
細胞形態(tài)特性：上皮樣
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
SKNBE(2c)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Melan-a細胞、HCA 7細胞、NCI-H522細胞
GM03320D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK.10細胞、HLEB3細胞、RH35細胞
L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PMVEC細胞、DU-4475細胞、NCI-SNU-668細胞
H3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1693細胞、KYSE 410細胞、WSU-DLCL(2)細胞
SCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 201細胞、SMA 560細胞、Pt K2細胞
C2C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC 316細胞、COLO-HSR細胞、RPE D407細胞
HREC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1672細胞、J.E6-1細胞、PLC-PRF-5細胞
EB-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞
AR4-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、HNEpC細胞、HS0578T細胞
P36細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGSMC細胞、NCIH2227細胞、NHDF細胞
NCI-H446 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系
NCI-H1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLMVEC細胞、Colon 38細胞、RIN Cl-5F細胞
Vero C1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206F細胞、SU 86.86細胞、TW01細胞
253J-BV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2/E6E7細胞、RPE-1細胞、Michigan Cancer Foundation-7細胞
P3X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8226/S細胞、PC14細胞、OV3121細胞
174xCEM.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H446細胞、GA10細胞、H-460細胞
PNT1-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL4細胞、GC-1細胞、MSTO-211細胞
7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4-1st細胞、Hs 706.T細胞、Hs 821.T細胞
SK-NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-362細胞、HCC 38細胞、C4-1細胞
IMR 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RenCa細胞、MDA-MB-134 VI細胞、H1048細胞
NCI-BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞
FAK+/+細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1869細胞、Melanoma 14細胞、RD-ES細胞
BEL 7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8/SVneo細胞、SW403細胞、NT-2細胞
MCA-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293 c18細胞、NCI-SNU-1040細胞、Nb2a細胞
NCI-H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8.653細胞、HS-940-T細胞、MCMEC細胞
COV504細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H341細胞、Rh30細胞、Hs 27細胞
H2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGE細胞、3AA細胞、MC 3T3-E1細胞
HR8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL10細胞、LS174T細胞、DMS153細胞
H1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu-1細胞、SVEC 4-10細胞、SK Mel 1細胞
A2780/CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGC-27細胞、Hs-746T細胞、SNU-601細胞
293T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-64細胞、HL-60 clone15細胞、SMA560細胞
EJ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL2細胞、OVCA 433細胞、SW-1463細胞
SW 1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp 2817細胞、CBRH7919細胞、MDA231細胞
ETCC007細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP303細胞、Panc 08.13細胞、RCS細胞
OKAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3JHR1細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、MC57細胞
HeLa S-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa 229細胞、RFL 6細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞
MDCK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-BR-3細胞、PNEC30細胞、293/EBNA-1細胞
NCI-H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S3-HeLa細胞、Glioma 261細胞、NCI-H865細胞
3LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-22細胞、PA-TU S細胞、SH-SY5Y Parental細胞
HUVEC-C[HUVEC]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1S1細胞、M-07e細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞
Ej138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞
IGR-OV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1734細胞、EMT6細胞、MFD-1細胞
MEF (CF-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDE6c7細胞、RMG-I細胞、1301細胞
RL95-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone 166細胞、GM03570細胞、Molm 13細胞
RBL-2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192B細胞、KB細胞、C4-2 Bone metastatic細胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞
Walker/LLC-WRC256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1-E細胞、CL1-0細胞、Vero 76 clone E-6細胞
HT 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC5細胞、H2171細胞、KYSE520細胞
WM 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FU-OV-1細胞、N-2a細胞、BT325細胞
Pro-5WgaRI3C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞
B4G12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUM2B細胞、PCI:SG231細胞、Hs-578Bst細胞
KB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL1細胞、H-2171細胞、SUM-159PT細胞
MM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV 4;11細胞、Tregs細胞、NIH-3T3細胞
HBZY 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-MNNG細胞、HEK-293F細胞、REC1細胞
AN3 CA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV-2細胞、Ishikawa細胞、COLO 679細胞
H-1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCO細胞、CHP 212細胞、MCFs細胞
DMS 273細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN-3細胞、OCI-Ly7細胞、Hs940-T細胞
NTERA-2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RM-1細胞、H-520細胞、MAVER-1細胞
Molm14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL78細胞、HCE-2 [50.B1]細胞、HS 445T細胞
ATDC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMST-6細胞、OVCAR-3細胞、MBMEC細胞
McCoy細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1373細胞、HAVSMC細胞、CA-46細胞
Hmy.2 CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/c3T3細胞、NE1細胞、KYSE 450細胞
NCI-H446 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系
MM1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-1210細胞、FAT細胞、B5537SKIN細胞
A2780S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-33細胞、FCCH1018細胞、MAC1細胞
SW-837細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR-1細胞、HuT-78細胞、NCI-H460細胞
L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PMVEC細胞、MESSADX5細胞、Hs895.T細胞
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