"AAV-293 epithelioid cells腺病毒轉化的人胚腎細胞系
細胞背景資料：我們推薦使用AAV-２９３細胞株繁殖腺病毒相關重組病毒。 AAV-２９３源自普遍使用的 HEK２９３細胞株，但產(chǎn)生的病毒滴度更高。 HEK２９３細胞是剪切過的腺病毒５型DNA轉染的人胚腎細胞。 跟HEK２９３細胞一樣，AAV-２９３細胞反式表達腺病毒E１基因，當共轉染三個AAV助質粒(一個含ITR的質粒，pAAV-RC, 和E１缺失助質粒)時，可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關病毒顆粒。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內形成單層，需要再次進行傳代。
U-251-MG細胞系相關產(chǎn)品：SW-962細胞、RPTEC TERT1細胞、Hs840T細胞
Hs934T細胞系相關產(chǎn)品：Kit-225-K6細胞、hRPTC細胞、HEK293F細胞
PZ-HPV-7細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-216細胞、174xCEM.T2細胞、HEK-293FT細胞
細胞生長：貼壁
AAV-293 epithelioid cells腺病毒轉化的人胚腎細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質，應立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內可長滿。
RGM-1細胞系相關產(chǎn)品：RCC_7860細胞、MDA436細胞、HCC-1143細胞
COR-L51細胞系相關產(chǎn)品：C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞
KYSE-410細胞系相關產(chǎn)品：TE1細胞、SKMEL-1細胞、BTT739細胞
IHH-4細胞系相關產(chǎn)品：PE CA PJ34細胞、CEM-C1細胞、L 132細胞
CBRH7919細胞系相關產(chǎn)品：CHP100細胞、MDA-PCa-2b細胞、BT 325細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
AAV-293 epithelioid cells腺病毒轉化的人胚腎細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
870細胞系相關產(chǎn)品：H1650細胞、BTI-Tn5B14細胞、EFO 27細胞
LN382細胞系相關產(chǎn)品：526mel細胞、PL5細胞、GC1-SPG細胞
CCRF-CEM/S細胞系相關產(chǎn)品：Panc05.04細胞、PANC0403細胞、MLOY4細胞
CCRF-SB細胞系相關產(chǎn)品：RT-BM 1細胞、NS1-1 Ag4.1細胞、C12細胞
Ocular Choroidal Melanoma-1細胞系相關產(chǎn)品：XuanWei Lung Cancer-05細胞、A375-SM細胞、CHP 212細胞
Mo 59J細胞系相關產(chǎn)品：GA-10 clone 4細胞、HuTu 80細胞、Ca759細胞
HOS (TE85)細胞系相關產(chǎn)品：H4-IIE-C3細胞、HT-1080細胞、PANC-08-13細胞
UACC893細胞系相關產(chǎn)品：H-841細胞、HEK-293FT細胞、CCRF-CEM/S細胞
Institute for Medical Research-32細胞系相關產(chǎn)品：MDA-415細胞、HCC1187細胞、COLO357細胞
HCC1954BL細胞系相關產(chǎn)品：HA1800細胞、S-16細胞、LOU-NH-91細胞
AAV-293 epithelioid cells腺病毒轉化的人胚腎細胞系
HLF細胞系相關產(chǎn)品：HSC-T6細胞、NCI-H774細胞、SW-1222細胞
MDA.MB.435細胞系相關產(chǎn)品：B-cell with DC Morphology細胞、PCI-4.2細胞、Liver-02細胞
FHs74Int細胞系相關產(chǎn)品：D341細胞、KP-N-RT-BM細胞、CAL85-1細胞
NCI-H187細胞系相關產(chǎn)品：RCK8細胞、Y 1細胞、HEK-293H細胞
LuCL4細胞系相關產(chǎn)品：CD 18細胞、BC-025細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞
Microbiological Associates-104細胞系相關產(chǎn)品：HR1K細胞、KG-1a細胞、LN 382細胞
Microbiological Associates-104細胞系相關產(chǎn)品：HR1K細胞、KG-1a細胞、LN 382細胞
CWR22R細胞系相關產(chǎn)品：EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞
OVCAR 433細胞系相關產(chǎn)品：COLO394細胞、SMMC7721細胞、RPMI 8226細胞
Hs 695.T細胞系相關產(chǎn)品：HSC6細胞、IBRS-2細胞、CHL-11細胞
HC11細胞系相關產(chǎn)品：MM6細胞、HEC-251細胞、NUGC4細胞
CAL-78細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1435細胞、COLO 680N細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞
SU86-86細胞系相關產(chǎn)品：H-4細胞、S3 HeLa細胞、UPCI:SCC090細胞
alpha TC1-6細胞系相關產(chǎn)品：Namalva細胞、H-1688細胞、NCIH2228細胞
D407細胞系相關產(chǎn)品：NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞
H7721細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly 18細胞、NCIH2073細胞、PY8119細胞
RSC-364細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞
University of Arizona Cell Culture-812細胞系相關產(chǎn)品：WEHI 231細胞、HCC-1143細胞、NCIH460細胞
HCC-2279細胞系相關產(chǎn)品：HPAEC細胞、UMRC2細胞、UO31細胞
NCIH460細胞系相關產(chǎn)品：Panc02-H0細胞、COLO-357細胞、NCIH292細胞
LU-65M細胞系相關產(chǎn)品：OE19細胞、LL/2細胞、NCIH1436細胞
SKNBE細胞系相關產(chǎn)品：PZ-HPV-7細胞、L-132細胞、H-446細胞
Jurkat, Clone E6-1細胞系相關產(chǎn)品：H2452細胞、HEYA8細胞、MC3T3E1細胞
HaCaT細胞系相關產(chǎn)品：HO-1-N-1細胞、Be Wo細胞、MGSMC細胞
WM266細胞系相關產(chǎn)品：KE-39細胞、NTERA2-cloneD1細胞、293EBNA細胞
NCI-H2291細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1299細胞、OCI-LY-19細胞、H1435細胞
SPCA1細胞系相關產(chǎn)品：Hep-G2細胞、DHL-5細胞、CCD 966 SK細胞
Chang liver細胞系相關產(chǎn)品：COS-7細胞、IB-RS2細胞、L-6TG細胞
AE 1201細胞系相關產(chǎn)品：Ly10細胞、L-5178-Y細胞、SNU-1040細胞
COV362細胞系相關產(chǎn)品：SKMEL-1細胞、L5178YR細胞、P30 OHK細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞系相關產(chǎn)品：SNU-869細胞、SK-Col-1細胞、D341細胞
H1792細胞系相關產(chǎn)品：IM9細胞、Caco-2BBe細胞、MRC-V細胞
UACC812細胞系相關產(chǎn)品：SNU-719細胞、HAEC細胞、SW1990細胞
HCC0044細胞系相關產(chǎn)品：C-4 I細胞、Hs 852.T細胞、VERO76細胞
NCI-H748細胞系相關產(chǎn)品：ARH 77細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞、COR-L26細胞
NPA 87細胞系相關產(chǎn)品：L-6TG細胞、32Dcl3細胞、Swiss 3T3細胞
hCMEC/D3細胞系相關產(chǎn)品：SACC-83細胞、EBTr細胞、MN9D細胞
Hs888Lu細胞系相關產(chǎn)品：COLO 829細胞、Y79細胞、SUM52PE細胞
HEL細胞系相關產(chǎn)品：OSA細胞、MPP 89細胞、MDAMB175VII細胞
MDAMB435S細胞系相關產(chǎn)品：Caco-2/BBe 1細胞、TOV21細胞、NCI-SNU-520細胞
UMR 106細胞系相關產(chǎn)品：SW 1990細胞、BSC1細胞、PC-3M-IE8細胞
A-427細胞系相關產(chǎn)品：D407細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞、SL-1細胞
RL-95-2細胞系相關產(chǎn)品：SK-ES-1細胞、Y3-Ag123細胞、SUDHL2細胞
SL1細胞系相關產(chǎn)品：Cates-1B細胞、NCI-H2347細胞、TFK1細胞
SNK6細胞系相關產(chǎn)品：BJA-B1細胞、H69C細胞、CCC-HPF-1細胞
HEK293-FT細胞系相關產(chǎn)品：SVEC 4-10細胞、LM2-4175細胞、PL12細胞
Embryonic Bovine Tracheal cells細胞系相關產(chǎn)品：NCM460細胞、HNE2細胞、DMS 153細胞
Emory University-3細胞系相關產(chǎn)品：NCI747細胞、CHP100細胞、Capan-2細胞
SB細胞系相關產(chǎn)品：SU8686細胞、KG-1細胞、Tu 177細胞
OACP4 C細胞系相關產(chǎn)品：H1581細胞、LLCPK1細胞、MOLT4細胞
RSC-96細胞系相關產(chǎn)品：SKRC-52細胞、769-P細胞、SUM 52PE細胞
AAV-293 epithelioid cells腺病毒轉化的人胚腎細胞系
Mv1Lu細胞系相關產(chǎn)品：P3X63-Ag8.653細胞、KU-812細胞、BIU-87細胞
NCIH2052細胞系相關產(chǎn)品：G361mel細胞、EBTr (NBL-4)細胞、SNU-719細胞
C-33-A細胞系相關產(chǎn)品：PVEC細胞、NCIH1184細胞、Panc-08.13細胞
CCRF-CEM/S細胞系相關產(chǎn)品：Panc05.04細胞、MDAMB361細胞、HCC0015細胞
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