"VCaP Adherent人前列腺癌細胞系
細胞背景資料:1997從一位不受激素影響的前列腺癌患者脊椎轉(zhuǎn)移灶中建立了這株細胞。先在小鼠中進行異種移植傳代,隨后進行體外培養(yǎng)。體內(nèi)及體外都對雄性激素敏感。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應(yīng)是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大;3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
VCaP Adherent人前列腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出舊培養(yǎng)液,用PBS清洗(沖洗),加入適量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以蓋住細胞,消化溫度是37℃;2)顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若胞質(zhì)回縮,細胞之間不再連接成片,表明此時細胞消化適度;(3)吸棄消化液加入培養(yǎng)液:棄去胰蛋白酶液,注意更換吸管,加入新鮮的培養(yǎng)液?!敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸:用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液;2)吸細胞懸液入離心管:將細胞懸液吸入10ml離心管中;3)平衡離心:平衡后將離心管放入臺式離心機中,以1000轉(zhuǎn)/分鐘離心6-8分鐘;4)棄上清液,加入新培養(yǎng)液:棄去上清液,加入2ml培養(yǎng)液,用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?!痉盅b稀釋細胞操作】1)顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察細胞量,必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長,傳代細胞的密度應(yīng)該不低于5×105/ml。最后要做好標(biāo)記;2)分裝:將細胞懸液吸出分裝至2~3個培養(yǎng)瓶中,加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋;3)繼續(xù)培養(yǎng):用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶,適當(dāng)旋松瓶蓋,放入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞2小時后開始貼附在瓶壁上。
SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A673細胞、MOLM13細胞、Lewis Lung細胞
T-84細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 39細胞、HCC1500細胞、BHP10-3細胞
NCIH548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCS-2/8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 c18細胞、PVEC細胞、GM03570細胞
Caco-2/BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TB-1 Lu細胞、NB4細胞、TE 671細胞
SUP-M2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1271細胞、D283MED細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞
細胞生長特性:貼壁生長
VCaP Adherent人前列腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞
細胞接收操作說明:請仔細閱讀本操作說明及相應(yīng)的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式:T25培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用,懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多,當(dāng)然,有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞,但是,長期經(jīng)驗來說,貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化,估計是細胞培養(yǎng)空間狹小,血清不足導(dǎo)致(最主要是怕運輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生),個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用,主要是冬天天氣冷,溫度低于4℃的地方,都要考慮凍存細胞)。T25培養(yǎng)瓶:是用T25細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后,拆開包裝T25培養(yǎng)瓶的自封袋,不拆封口膜,表面噴75%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上,再處理細胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用,如細胞密度高于80%,可以直接消化傳代,相反則加入5-6ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管:是用15ml離心管發(fā)貨的形式,只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上,再處理細胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T25培養(yǎng)瓶,可以暫時T75培養(yǎng)瓶,加入10-15ml培養(yǎng)基,建議10ml培養(yǎng)基,也可以使用T175培養(yǎng)瓶,加入50-60ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)瓶越大,需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細胞密度不夠的話,不用大瓶子,先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的,不然會長得很慢,嚴(yán)重的,會導(dǎo)致細胞死亡等危險),平衡完成后,離心(1000rpm,3min)收集細胞,棄上清,用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰:是用本公司凍存液凍存細胞后,直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復(fù)蘇的步驟操作即可。
H-358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞
VB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H526細胞、H-2452細胞、CCC-HEH-2細胞
rRTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H596細胞、NCI-H1105細胞、MCF7ADR細胞
HCC1428細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-388細胞、CTLL-2細胞、NR8383.1細胞
SKLU01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239細胞、MM-1S細胞、ATDC-5細胞
EM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WISH細胞、BRL3A細胞、Mino細胞
COLO-738細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、M3 Clone M-3細胞、GM05862細胞
FL 62891細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL60細胞、NCI-SNU-216細胞、KPL-1細胞
H-1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC 96細胞、Fetal Human Lens-124細胞、PLC/PRF/5細胞
MOLM13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 85-1細胞、HCC-1954BL細胞、Hep-3B細胞
NCI-H2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2286細胞、HC11細胞、FAT細胞
Hs.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-526細胞、Hs 578Bst細胞、Nb 2細胞
NIH:OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca9-22細胞、HCT-GEO細胞、Hs870T細胞
VCaP Adherent人前列腺癌細胞系
A.704細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-EBNA細胞、16HBE140細胞、HSC-2細胞
RKO-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RetroPack PT67細胞、HMEL細胞、SF126細胞
IBRS2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2-4510細胞、NCI-H1092細胞、SW780細胞
IBRS2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2-4510細胞、NCI-H1092細胞、SW780細胞
HuH 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC812細胞、OE19細胞、NCI-SNU-601細胞
NCIH520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-16細胞、A 172細胞、DC2.4細胞
H-1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-64細胞、L02細胞、PA-TU S細胞
HEP3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hos TE-85細胞、H647細胞、HMSC細胞
NCI-H660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL5細胞、GM03573細胞、LS 1034細胞
CA-46細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-95-8細胞、Daoy細胞、9L細胞
HCMEC(BL12-H)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR10細胞、NCI-H1404細胞、AMO-1細胞
MM-1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞
S3-HeLa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi-five細胞、RPTEC/TERT 1細胞、HNTEC細胞
B958細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A.1細胞、C4-2 Bone metastatic細胞、NCI-H2195細胞
786-O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞
U266BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HP615細胞、RMG1細胞、NOZ細胞
K7M2 wt細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caov-4細胞、J-774A.1細胞、Jeko1細胞
H-1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-2細胞、CHG-5細胞、HSC4細胞
GM03573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、GM03320細胞、H-2141細胞
KU-812-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEM細胞、Mevo細胞、OCIAML2細胞
C33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2B4細胞、B16-F10--RED細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞
VP229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1222細胞、HUT 226細胞、OCM-1A細胞
P815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL2細胞、NPA'87細胞、hFOB 1.19細胞
95-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 870 Emory University-4細胞、SHP77細胞、SCI1細胞
Alpha Mouse Liver 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTC-1細胞、COV-362細胞、EAhy 926細胞
HHFK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEMCSS細胞、MDA-MB-134細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞
RSC 96細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ej138細胞、SKMEL-31細胞、IEC 18細胞
HIMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-157細胞、2V6.11細胞、SCL-2細胞
GB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD-1細胞、RPVSMC細胞、MOLT3細胞
J774 A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 895.T細胞、C-26細胞、OCIAML3細胞
TMD8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH/DF-1細胞、H-1915細胞、SNU387細胞
PC3-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 611.T細胞、H-647細胞、HO-8910細胞
MNNG-HOS (Cl#5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31-FUJ細胞、HCGC細胞、Hi-5細胞
GM03573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、GM03320細胞、H-2141細胞
UCD-MLA-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-900細胞、L132細胞、SK MEL 5細胞
HIBEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL1339細胞、DOK細胞、NG-108-15細胞
HMrSV5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL11細胞、NCIH1437細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞
Psi-2 DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFT 8810細胞、SJRH 30細胞、HCC1954 BL細胞
NCI-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT細胞、NCIH378細胞、HCC0038細胞
SP2/0 Ag-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman S91 melanoma細胞、KTA7細胞、Psi-2-DAP細胞
207細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHOS細胞、Panc-03.27細胞、HEC1-A細胞
aNK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA8細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞、NALM-6-M1細胞
VCaP Adherent人前列腺癌細胞系
SN12-PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc08.13細胞、CNE-1細胞、108CC15細胞
GM00637H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A101D細胞、SUDHL16細胞、IM-95細胞
SNU601細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0030細胞、WiDr-TC細胞、KPNRTBM1細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm-5F細胞、3T3-Swiss albino細胞、EBC1細胞
OV90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McG-1細胞、Hs 821.T細胞、PANC-03-27細胞
P-815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞、Panc-327細胞
JROECL21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OsA-CL細胞、HCMEC(BL12-H)細胞、EBC-1/original細胞
E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞
no.11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE-2 [50.B1]細胞、THC-8307細胞、HCA-7細胞
J774細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LuCL4細胞、OCIAML2細胞、CL 1-5細胞
MDAMB435S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2/BBe 1細胞、CHP-100細胞、SUDHL8細胞
rRTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H596細胞、Karpas 299細胞、HCC 94細胞
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