"KP-N-NS Adherent人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：源自腦轉(zhuǎn)移灶的腎上腺神經(jīng)母細胞瘤。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細胞生物學(xué)實驗，細胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細胞懸液，沿孔壁（稍離開一點孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強或次數(shù)太多會導(dǎo)致細胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板好掌握，效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細胞以后(比如傳代好/分好細胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動3次。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
KP-N-NS Adherent人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié)，這里說一些我個人的經(jīng)驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對細胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經(jīng)驗，而忽視試劑，溶液尤其是細胞的質(zhì)量，后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
JHH-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03671細胞、Hs_578t細胞、HBE 135-E6E7細胞
SK N SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC MSB1細胞、Hopkins-92細胞、H-1341細胞
SNU638細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR3細胞、SP2-0-Ag14細胞、AD293細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
WC00079細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549ATCC細胞、MKN74細胞、D 407細胞
BNCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 2細胞、QGY-7701細胞、A72細胞
KM H-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1838細胞、Kit 225細胞、AZ521細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
KP-N-NS Adherent人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理；霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質(zhì)，３７度孵箱培養(yǎng)２-３天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細胞仍可生長，但時間長之后，細胞的活力狀態(tài)變差，用酸銅溶液擦拭CO２孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的酸銅?；蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時，使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后，再移入細胞。孵箱應(yīng)定期清潔(２月左右)，尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外燈照。預(yù)防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加３u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗；但細胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或D或雙抗都于事無補，建議舍棄該污染細胞，將環(huán)境徹底消毒，如果所有細胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個別污染，可能是操作問題，就要注意操作。
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 294T細胞、U-118MG細胞、HNE-1細胞
Hk-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B5537SKIN細胞、BT20細胞、PC-10細胞
SHEE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320/DM細胞、SBC5細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞
MOLM-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH8994細胞、Hs 766T細胞、L-428細胞
H2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALL-1細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞、P3 NS1 Ag4細胞
HCC-1171細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-10A細胞、LNCaP.FGC細胞、FDC-P1細胞
CL34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T4細胞、RCCJF細胞、OCI AML3細胞
OC316細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320HSR細胞、WEHI-279細胞、Human Embryo Kidney-2細胞
Hs294細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT細胞、COLO 201細胞、MDA-MB435細胞
COR L279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-1細胞、BLO 11細胞、MDA-157細胞
4T1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-812細胞、IMR 90細胞、OVCA5細胞
H510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-1細胞、BEL7404細胞、IMR-90細胞
CMK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-411細胞、CV-1細胞、NCI-H128細胞
KP-N-NS Adherent人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞系
L6565細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637F細胞、MB157細胞、DU145細胞
WBF344細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞
MOLT16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774A1細胞、NCIH292細胞、NeHepLxHT細胞
Mo 59J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 clone 4細胞、HuTu 80細胞、Ca759細胞
CATH.a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC 12細胞、NCIADRRES細胞、SUP-M2細胞
OSK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC-1細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞、A-549細胞
EB-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rainbow Trout Embryo細胞、U251n細胞、CHO-S細胞
C-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC9細胞、JIMT細胞、GM-637細胞
GM00637I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH292細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、HS-940-T細胞
HT29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 962細胞、OVCA-432細胞、HCT_116細胞
P3HRI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞
NIH3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U1細胞、266 Bl細胞、TE-4細胞
RBL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS79細胞、NIH-OVCAR-3細胞、HeLa S-3細胞
OS-732細胞系相關(guān)產(chǎn)品：6T-CEM細胞、H-EMC-SS細胞、M-1細胞
TE-85 clone 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE6細胞、MRC-5細胞、FT-293細胞
RSC96細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG [Human lung carcinoma]細胞、H-322細胞、Y 1細胞
BC3 H1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-27細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、LAC細胞
Sf21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251_MG細胞、NHRF細胞、HT-3細胞
NCI-H510A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292 clone A141B1細胞、H209細胞、CL1.0細胞
HEC-1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPB/ALL細胞、SW-982細胞、H226細胞
SJSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 12T細胞、MHCC-LM3細胞、Th17細胞
LCMS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC-Y細胞、Tj-905細胞、CT-26細胞
VSC4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCH-1細胞、KE-37細胞、118 MG細胞
H4IIEC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、MM1-S細胞、HCC2108細胞
ARO81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C細胞、Y3-Ag1,2,3細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞
CC-LP-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA Dx5細胞、NCIH2052細胞、OVHM細胞
CHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBMEC細胞、NCI-H220細胞、MDA157細胞
Ramos(RA1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC-J2細胞、SK-Mel 2細胞、COLO320/DM細胞
HCC-9204細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNGHOS細胞、Sp2/0-Ag-14細胞、FTC-133細胞
RPMI-1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1693細胞、LK2細胞、SCC-1395細胞
SPC-A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H548細胞、NCIH1793細胞、HMEC-1細胞
MDA-175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn-5細胞、KY180細胞、M4e細胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN-3細胞、CT26細胞、HEK293-EBNA1細胞
Namalva細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nakata-1細胞、FF-WT-BJ細胞、Tca-83細胞
Molm 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-O7e細胞、HCO細胞、38C-13細胞
SUM 102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss-3T3細胞、ID8/MOSEC細胞、NFS60細胞
CEM.C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：10RGB細胞、NCIH23細胞、MN-9D細胞
EMT6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT-2細胞、OVCAR 4細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞
MNNG/HOS Clone F-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJSA1細胞、DHL-16細胞、GM02131A細胞
FBHE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1781細胞、A2780/CP細胞、MHCC97L細胞
DI-TNC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12CPM6細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、hEM15A細胞
Mino細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1-cell細胞、LM6細胞、RPMI.8226細胞
KP-N-NS Adherent人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞系
Mv1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-361細胞、H1975細胞、P3X63細胞
SNT-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E-6細胞、HPAEC細胞、HET-1A細胞
JROECL33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-411N細胞、HEK AD293細胞、OCI-AML5細胞
EoL-1 cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746-T細胞、NGP細胞、143BTK-細胞
CCRFCEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM-1S細胞、SR786細胞、HTori:3細胞
G 401細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9細胞、HO8910細胞、HEB細胞
P3 NS1 Ag4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN93細胞、Panc 2.03細胞、H-740細胞
TKB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip[973]細胞、GM05862細胞、NCI-H1694細胞
CCD-841CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fao細胞、NuTu 19細胞、UPCI-SCC-090細胞
H.Ep. No. 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL 2H3細胞、EOC20細胞、RL952細胞
CHO K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 78細胞、T/GHA-VSMC細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞
SHEE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320/DM細胞、SK-Mel 2細胞、NCIH847細胞
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