"C-33 A Adherent人子宮頸癌細胞系
細胞背景資料:C-33A細胞株是N. Auersperg從宮頸癌切片中建立的一系列細胞株(參見ATCC CRL-1594和ATCC CRL-1595)中的一株。 細胞一開始就表現(xiàn)出亞二倍體核型及上皮細胞形態(tài)。 連續(xù)傳代可以觀察到核型不穩(wěn)定。 存在成視網(wǎng)膜細胞瘤蛋白(pRB),但大小不正常。 P53表達上調(diào),且有一個273位密碼子的點突變導致Arg -> Cys的替換。 人乳頭瘤病毒DNA及RNA陰性。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰毎麅?nèi),而脂質(zhì)體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
C-33 A Adherent人子宮頸癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
我??吹揭粋€比較復雜的四步消化法,這個挺有意思,我也是次聽說,應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法,很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近300株細胞里面,還沒遇到這么怪異的。比如Caco2其實是很好消化的細胞,不需要胰酶孵育即可,只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好,這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細胞之后會對你越來越不好;比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),就以colon cancer為例,比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
Panc-8_13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUV-EC-C細胞、KMST6細胞、NCIH838細胞
WI 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-346細胞、MOLT-4細胞、Okayama University Medical School-27細胞
B16BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEI193細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞、MSF細胞
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SCC-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mREC細胞、HCC-1500細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞
NCIH889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS180細胞、SK-HEP-1細胞、FHL 124細胞
H810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-6細胞、L-929細胞、SW 756細胞
細胞生長特性:貼壁生長
C-33 A Adherent人子宮頸癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據(jù)感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),再把水盤里也加上飽和量的酸銅。或者在培養(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時,使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細胞。孵箱應定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
RPMI-1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940.T細胞、NCI-HUT-125細胞、HUASMC細胞
HS-766-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuCCT-1細胞、COLO 394細胞、ONS-76細胞
LAN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE細胞、SKG-IIIa細胞、Mac-1細胞
KP-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ES-2細胞、IR983F細胞、P-19細胞
JG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC9細胞、High5細胞、MFE-296細胞
786-O RCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA 560細胞、Murine Carcinoma-38細胞、VK2/E6E7細胞
UMRC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D/cl3細胞、Malme3M細胞、HBZY-1細胞
NCIH2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品:74Int細胞、HPAFII細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞
COC1/CDDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA RO-81A-1細胞、IFRS1細胞、DHL-6細胞
NCI-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL12T細胞、GFP-Olig2細胞、MKN-7細胞
OCI-AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320DM細胞、Panc02.03細胞、HNE1細胞
HCC0095細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ha Fe細胞、L-1210細胞、VMRCLCD細胞
251 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2BS細胞、NCIH1618細胞、Hep G2/C3A細胞
C-33 A Adherent人子宮頸癌細胞系
RD 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACCLM細胞、PANC-10-05細胞、COLO-HSR細胞
Pa18C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-766T細胞、BSC40細胞、NCI-441細胞
BNL 1MEA.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO K1細胞、SF17細胞、NCTC 1469細胞
BNL 1MEA.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO K1細胞、SF17細胞、NCTC 1469細胞
HuT-102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:102PT細胞、SK-UT-1細胞、P3-X63Ag8細胞
MSB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIPF178C細胞、HGC-27細胞、KPL1細胞
MV-1-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87/Adr細胞、NOZC-1細胞、T 98 G細胞
MUTZ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKM1細胞、HEK293-EBNA細胞、HIT-T15細胞
Karpas 299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE-1細胞、AML-12細胞、RINm5F細胞
RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 266-4細胞、H-2195細胞、CCD-112 CoN細胞
KM-H2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC-1細胞、CaSki細胞、KP-2細胞
MDAMB175VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCV-29細胞、CT-26細胞、WM451細胞
CDC/EU.HMEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2227細胞、SKN-SH細胞、NCI-H209細胞
MO59J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIG3細胞、LICR-LON-HN6細胞、TE7細胞
WERI-Rb-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDLM-2細胞、RT112細胞、UM-UC-1細胞
SKM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGMC細胞、GM00637H細胞、L cells細胞
U-118-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP4細胞、Hs611T細胞、NB-9細胞
SW900細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H510細胞、HCA7細胞、BxPC-3細胞
CCD-1095Sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 9細胞、hFOB 1.19細胞、HCO細胞
JIMT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMel-28細胞、CL40細胞、Calu-6細胞
Wien 133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1404細胞、KLM-1細胞、MNNG細胞
Normal Rat Kidney-49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172MG細胞、Tu177細胞、HCC-1419細胞
AR41P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW527細胞、P3/X63/Ag8.653細胞、EC-GI-10細胞
TE11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lung cancer-1/squamous細胞、OUMS-27細胞、U2OS細胞
MRC-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Pancreatic Duct Epithelial細胞、HSC 3細胞、HO8910細胞
FCCH1018細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP 229細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞、EFM-192C細胞
B16 F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL33細胞、H-1703細胞、LC-MS細胞
Panc 04.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono-Mac-1細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞、L428細胞
J 111細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2030細胞、MRMT-1細胞、L929細胞
MN60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-679細胞、VMRCRCZ細胞、WISH細胞
NTERA-2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RM-1細胞、H-520細胞、MAVER-1細胞
ssMCF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C1細胞、NCI.H522細胞、AZ 521細胞
3T3 J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Henrietta Lacks cells細胞、RPMI 8402細胞、G-401細胞
MGH-U1 (EJ)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis lung carcinoma line 1細胞、HBL-100細胞、H1436細胞
H-2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori 3細胞、PANC3.27細胞、C1R細胞
COR-L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞
A375細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LOUNH91細胞、NTC-200細胞、Lewis Lung Cancer細胞
NCIH1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FET細胞、RGM-1細胞、MILE SVEN1細胞
SUM52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AtT-20細胞、451Lu細胞、JM1細胞
CCD966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-150細胞、Hs821T細胞、YD38細胞
RAW264.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL 5細胞、U-266細胞、Panc02-H0細胞
FD-LSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DI-TNC1細胞、DK-MG細胞、C127細胞
C-33 A Adherent人子宮頸癌細胞系
LX-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞
JIMT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HECV細胞、OCILY19細胞、SUPB15細胞
NCI N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGC-803細胞、MV4-11細胞、NCIH208細胞
OVCAR10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U 937細胞、LS-180細胞、SAOS 2細胞
Jurkat 77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBI-293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞、Kupffer細胞
Nakata-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2172細胞、JVM-2細胞、NCIADRRES細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-FGC細胞、HOC-1細胞、CMT-64細胞
HEC-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞
Hs 822.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-MC細胞、CV 1細胞、GCT0404細胞
526-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMAc-Serum Free細胞、NCI-H1522細胞、alpha TC1-6細胞
PLA-801D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP1細胞、MiaPaCa2細胞、NCIH1688細胞
LAN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE細胞、EoL-1-cell細胞、Nb-2細胞
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