"B16-F1 Adherent小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說,針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因:細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多,細(xì)胞老化;2)細(xì)胞的接種量:接種量過低,細(xì)胞生長緩慢;3)細(xì)胞傳代時間過晚:細(xì)胞中毒,影響傳代后的細(xì)胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細(xì)胞死亡;時間過短,細(xì)胞未完全分離而成團,細(xì)胞死亡;5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應(yīng)是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大;3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細(xì)胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
B16-F1 Adherent小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞凍存知識普及:細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細(xì)胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外,還可以利用細(xì)胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細(xì)胞。細(xì)胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點降低,加之在緩慢凍結(jié)條件下,細(xì)胞內(nèi)水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細(xì)胞損傷。 采用""慢凍快融""的方法能較好地保證細(xì)胞存活。標(biāo)準(zhǔn)冷凍速度開始為-1到-2℃/min,當(dāng)溫度低于-25℃時可加速,到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-196℃)。
SW-48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 16細(xì)胞、H-2030細(xì)胞、B16 F1細(xì)胞
4T1.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG-44細(xì)胞、143 B細(xì)胞、Colon26細(xì)胞
Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-20細(xì)胞、MKN-74細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
3T3-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞、C-127細(xì)胞、VK2細(xì)胞
HuO9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1990細(xì)胞、MDA-436細(xì)胞、BT.549細(xì)胞
NT2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2170細(xì)胞、KYSE0410細(xì)胞、Y79細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
B16-F1 Adherent小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后,需要進(jìn)行分離培養(yǎng),否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴增(形成細(xì)胞株),可以進(jìn)行細(xì)胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗?!静僮鞑襟E】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進(jìn)行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細(xì)胞;6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng);7)細(xì)胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2~3d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】1)掌握好細(xì)胞消化的時間,消化時間過短時,細(xì)胞不宜從瓶壁脫落,過長的消化會導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷;2)掌握好消化濃度,當(dāng)消化液濃度過高時,消化時間應(yīng)縮短,過低時細(xì)胞消化時間相對延長。
UPCISCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞、2PK-3細(xì)胞、3T3F442A細(xì)胞
HPDLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2935細(xì)胞、MLO-Y4細(xì)胞、J774 A.1細(xì)胞
MM1-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR8383細(xì)胞、L-M (TK-)細(xì)胞、UMRC2細(xì)胞
Sp2/O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-AG 8.653細(xì)胞、OUMS-23細(xì)胞、SCC4細(xì)胞
SNU-423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-2細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞
SN4741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb1.Lu細(xì)胞、Tn-5細(xì)胞、Fetal Human Lens-124細(xì)胞
95D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCUM-1細(xì)胞、C4-2細(xì)胞、NTHY-ORI3.1細(xì)胞
B4G12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUM2B細(xì)胞、PCI:SG231細(xì)胞、Hs-578Bst細(xì)胞
Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CRFK細(xì)胞、SuperTube細(xì)胞、NB9細(xì)胞
B16/F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_05_04細(xì)胞、CAL 39細(xì)胞、HCC366細(xì)胞
SKN-AS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1238細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞、Earle's L cells細(xì)胞
Karpas-299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCM細(xì)胞、SHIN-3細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞
MIN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1568細(xì)胞、10RGB細(xì)胞、LS 123細(xì)胞
B16-F1 Adherent小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
MBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、alphaTC1 Clone 6細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞
BI-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG-1細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞、SW.620細(xì)胞
MeT 5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1783細(xì)胞、IPI-2I細(xì)胞、Panc 02.03細(xì)胞
HTR-8/SVneo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV-90細(xì)胞、hCMEC/D3細(xì)胞、PC-12細(xì)胞
NG108-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRAEC細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞、AA-Mel細(xì)胞
CL40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293H細(xì)胞、Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞、B16BL-6細(xì)胞
HASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS TE 85細(xì)胞、LIPF178C細(xì)胞、OCI Ly1細(xì)胞
HOP-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-WRN細(xì)胞、SCC25細(xì)胞、LA-N-6細(xì)胞
M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL-28細(xì)胞、T1-73細(xì)胞、Douglas Foster-1細(xì)胞
HCC95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RN-c細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞、SV-HUC細(xì)胞
AG06814-J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAC1.2F5細(xì)胞、Pt K2細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞
PAMC82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mousepodocyte細(xì)胞、RIN14B細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞
NPA 87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6TG細(xì)胞、32Dcl3細(xì)胞、Swiss 3T3細(xì)胞
Tu-212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-475細(xì)胞、NCI-H526細(xì)胞、V79-4細(xì)胞
TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A20細(xì)胞、ECC-1細(xì)胞、SC細(xì)胞
LC1-Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCI1細(xì)胞、NBL-2細(xì)胞、Pa17C細(xì)胞
Case 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2106細(xì)胞、BGC823細(xì)胞、H1666細(xì)胞
MDA-MB-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H28細(xì)胞、3T3 L1細(xì)胞、HEK 293FT細(xì)胞
NCI-H1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-520細(xì)胞、MESSA細(xì)胞、H-748細(xì)胞
GM07404D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1838細(xì)胞、NS20Y細(xì)胞、KP2細(xì)胞
PA I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637H細(xì)胞、P3J.HR1K細(xì)胞、EU-2細(xì)胞
BHK-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGP 1細(xì)胞、U266-B1細(xì)胞、SUM-190細(xì)胞
C42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LUDLU-1細(xì)胞、1E8-H細(xì)胞、PLA 802細(xì)胞
NCIH716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03573A細(xì)胞、3D4/21細(xì)胞、AMJ2C8細(xì)胞
STTG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY 7701細(xì)胞、LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞、SKRC20細(xì)胞
NEC8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞、KYSE410細(xì)胞
OCI Ly1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1437細(xì)胞、P3X63 Ag8.653細(xì)胞、SUDHL-2細(xì)胞
HEI193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD1細(xì)胞、138MG細(xì)胞、UMNSAH/DF-1細(xì)胞
C666-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AM細(xì)胞、WI-38細(xì)胞、AU-Mel細(xì)胞
U138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT3細(xì)胞、Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、MSTO-211 H細(xì)胞
SK-Mel 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 683細(xì)胞、KYSE 140細(xì)胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞
NBL-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CZ-1細(xì)胞、H-1395細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞
JURKAT E-61細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-4細(xì)胞、WM-2664細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞
SKNBE(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0WT細(xì)胞、HEL細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞
HEK-293H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901/DDP細(xì)胞、H1650_CO細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞
32D clone3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞
HGC27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK BR 03細(xì)胞、MDA-134細(xì)胞、Hep G2細(xì)胞
EAHY-926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCCPAN2細(xì)胞、RMS13細(xì)胞、RKOAS451細(xì)胞
C-Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-167細(xì)胞、AU565細(xì)胞、RH7777細(xì)胞
Mink細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS 17/28細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞、Human Microglia Clone 3細(xì)胞
HRMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Institute for Medical Research-90細(xì)胞、3T3-Swiss細(xì)胞、Hs852T細(xì)胞
hTERT-HPNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8/ADR細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞
B16-F1 Adherent小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
HCE-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-8_13細(xì)胞、CBRH-7919細(xì)胞、HTh-74細(xì)胞
Nb2-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2444細(xì)胞、L-363細(xì)胞、MFE 280細(xì)胞
LS-123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 739.T細(xì)胞、HEK293-F細(xì)胞、H2330細(xì)胞
SaOS-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2058細(xì)胞、HO8910PM細(xì)胞、LNCaP-FGC細(xì)胞
SUM 102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss-3T3細(xì)胞、ID8/MOSEC細(xì)胞、NFS60細(xì)胞
COV-362細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAEC細(xì)胞、MKN45細(xì)胞、PLB 985細(xì)胞
U-138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-20Y細(xì)胞、PC-9S1細(xì)胞、HFTF細(xì)胞
HIBEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293A細(xì)胞、Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞、H2107細(xì)胞
NCIH2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H295R細(xì)胞、CD-18細(xì)胞、Hs 822.T細(xì)胞
CCC-HEH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-4細(xì)胞、PC-12細(xì)胞、MLFC細(xì)胞
Panc2.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMJ2-C8細(xì)胞、Hs 895.T細(xì)胞、SW 1417細(xì)胞
MM1-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR8383細(xì)胞、CTLL-2細(xì)胞、PNT-1A細(xì)胞
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