"NCI-H2342 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)時分布不均勻,通常操作步驟:做細胞生物學實驗,細胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻:要么中間密周圍稀,要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶潤洗一遍(25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板),棄掉胰酶,37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右,鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠,延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種,直接用100微升移液器吸取細胞懸液,沿孔壁(稍離開一點孔底即可,不要離底太高)直接接入,移液器不需完全打到,輕輕按下即可,每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(我一般輕巧敲三下),太強或次數(shù)太多會導致細胞集中成堆,將板順時針旋轉(逆時針效果不好),依次敲擊剩余三個邊,靜置約5分鐘,放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板,可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基,晃動浸潤整個孔底,然后用移液槍吸至第二孔,同樣方法浸潤孔底,其它孔依此類推,這樣整個孔底都是濕潤的,細胞懸液會平鋪在整個孔底,注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢,但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式,但力度沒有96孔板好掌握,效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細胞以后(比如傳代好/分好細胞以后),先順時針搖晃3次,馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復延X軸Y軸分別水平搖動3次。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H2342 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經消失了,細胞之間的附著也已經消失了,細胞已經獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。
Kato-III細胞系相關產品:Ramos 1細胞、Mel-RM細胞、ME180細胞
HS-68細胞系相關產品:HCC-1438細胞、CCD-112 CoN細胞、ChaGo-K-1細胞
PC 12細胞系相關產品:RPMI-2650細胞、RPMI 6666細胞、SKN-SH細胞
細胞傳代方法:1:2-1:6傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
H-II-E-C3細胞系相關產品:beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞
CMT-64細胞系相關產品:GP2d細胞、tdott細胞、UMNSAH-DF1細胞
SK N SH細胞系相關產品:MDCC MSB1細胞、Hopkins-92細胞、H-1341細胞
細胞生長特性:貼壁生長
NCI-H2342 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮樣
解凍細胞出現(xiàn)大量細胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下:1)冷凍時細胞密度過低:推薦的解決方案:縮短解凍過程中的時間。將細胞取出后,立即將凍存管浸入在37℃的水浴中,并震蕩至全部融化,然后迅速地轉移到預熱的培養(yǎng)基中;2)不適當?shù)睦鋬鲞^程:推薦的解決方案:解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當?shù)募夹g,并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下:1)培養(yǎng)瓶的大小:一般解決方案是一些細胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉移到較小的培養(yǎng)瓶中,使細胞密度上升;如,根據(jù)培養(yǎng)基的體積,從T75培養(yǎng)瓶轉移到2或3個T25培養(yǎng)瓶中;2)細胞密度過低:通常解決方案是提高未來冷凍物種細胞的凍存密度,或使用較小的培養(yǎng)容器,或解凍多個試管來進行培養(yǎng)。
NCI-H1568細胞系相關產品:MC26細胞、H2030細胞、D-283 Med細胞
BSC1細胞系相關產品:Granta-519細胞、SNU-119細胞、H69/P細胞
PC-3M-IE8細胞系相關產品:MDA-MB-231-GFP細胞、M059J細胞、CCK-81細胞
H-28細胞系相關產品:NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞
IHH-4細胞系相關產品:PE CA PJ34細胞、CEM-C1細胞、L 132細胞
HPMEC細胞系相關產品:Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞
KBM7細胞系相關產品:C3A細胞、MDA-MB-231-luc細胞、HS-766-T細胞
P 3 HR 1細胞系相關產品:SK-MEL-31細胞、Monomac-1細胞、NCI-HUT-460細胞
SN12PM6細胞系相關產品:COLO679細胞、HeLa細胞、KYSE180細胞
IHH-4細胞系相關產品:PE CA PJ34細胞、CEM-C1細胞、L 132細胞
MSC細胞系相關產品:CALU1細胞、GT38細胞、ARPE-19細胞
CEM-CCRF細胞系相關產品:PLC-8024細胞、A7r5細胞、COLO 320HSR細胞
IOSE-29細胞系相關產品:LTEP-a-2細胞、SNU-C2B細胞、MAntle cell VERona-1細胞
NCI-H2342 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
Capan-2細胞系相關產品:H-1341細胞、NOR 10細胞、NG10815細胞
Metastatic Variant 522細胞系相關產品:ZR-75-30細胞、MV3細胞、MKN-74細胞
Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞系相關產品:H-1623細胞、H-719細胞、OVSAHO細胞
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UWB1.289細胞系相關產品:118MG細胞、NCIH196細胞、FD-LSC-1細胞
NCI H716細胞系相關產品:OCI-Ly10細胞、NW-38細胞、SW 1990細胞
EFM-192C細胞系相關產品:C-33A細胞、MDAPC2B細胞、293-H細胞
KMST-6細胞系相關產品:DF-1細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、NCIH441細胞
CZ-1細胞系相關產品:ST細胞、EFO-27細胞、HMC細胞
Ca 9-22細胞系相關產品:Caco-2 BBe細胞、CHL細胞、CHP212細胞
PL12細胞系相關產品:16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞
TK 10細胞系相關產品:MC-116細胞、AG06814-N細胞、CAL851細胞
HT3細胞系相關產品:FDC-P1細胞、HEK293EBNA細胞、OK細胞
KATO 3細胞系相關產品:WTRL1細胞、L929細胞、HCC1438細胞
CCD-966SK細胞系相關產品:P3X63Ag8653細胞、H-1836細胞、PJ34細胞
KG-1a細胞系相關產品:HVSMC細胞、ROS17/28細胞、QG-56細胞
A2780-CP細胞系相關產品:Hs 578.T細胞、NG10815細胞、KM-H2細胞
R1610細胞系相關產品:H510細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、HUT 28細胞
Hs 766T細胞系相關產品:HRVEC細胞、MDA MB 436細胞、WM-266-4細胞
NALM6細胞系相關產品:Ramos (RA)細胞、IPEC-J2細胞、CTV1細胞
MDA 1386細胞系相關產品:LC2/Ad細胞、Huh-7.5.1細胞、HCC2185細胞
MILE SVEN1細胞系相關產品:3T3-A31細胞、HuH7細胞、IFRS1細胞
NCTC-1469細胞系相關產品:COLO-357細胞、Jeko1細胞、FRhK4細胞
BGC-823細胞系相關產品:Pa17C細胞、7404細胞、H-2106細胞
SNU-761細胞系相關產品:HM1900細胞、MES 13細胞、769P細胞
rHSC-99細胞系相關產品:624細胞、Onda 11細胞、Panc327細胞
PG-4(S+L-)細胞系相關產品:F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞
RASMC細胞系相關產品:OCI-Ly8細胞、TPC-1細胞、WSU-DLCL-2細胞
OCM1A細胞系相關產品:686LN-M4e細胞、C-Lu-65細胞、HUT 226細胞
L929(NCTC)細胞系相關產品:C-26細胞、GP-293細胞、AHH1細胞
NCI-H-295細胞系相關產品:KM932細胞、LN-229細胞、NCCIT細胞
Colo-206F細胞系相關產品:Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、V-79細胞、NCI-H1930細胞
NIE 115細胞系相關產品:B16-F10-BL6細胞、Bac1 2F5細胞、NCIH1395細胞
GM15452細胞系相關產品:Hs 343.T細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞、COLO 320細胞
LN 229細胞系相關產品:RBMVEC細胞、SUM 52PE細胞、COLO-679細胞
P30-OHKUBO細胞系相關產品:BALB/3T3 (clone A31)細胞、SW13細胞、Renal Carcinoma細胞
Tu 212細胞系相關產品:H-187細胞、769P細胞、ssMCF7細胞
Tu 212細胞系相關產品:H-187細胞、769P細胞、ssMCF7細胞
SU-DHL-5細胞系相關產品:WiDr-TC細胞、PC3-M細胞、MCA 38細胞
SW-626細胞系相關產品:Malme-3 M細胞、TALL 1細胞、SK-N-BE(2)細胞
GM02131細胞系相關產品:NCTC-3960細胞、Rat Fetal Lung-6細胞、LICR-HN6細胞
BE2-M17細胞系相關產品:COLO680N細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞、SW1222細胞
NCI-H2342 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
H35細胞系相關產品:OV 2008細胞、6T-CEM細胞、OVCAR8細胞
SUM190細胞系相關產品:SW 780細胞、JURKAT E-61細胞、SCC15細胞
HPDE6c7細胞系相關產品:B16F1細胞、BCPAP細胞、RCC 786-O細胞
T47D:A細胞系相關產品:PL-45細胞、FLC7細胞、OACP4 C細胞
CCD 19Lu細胞系相關產品:TE 671細胞、HCC1569細胞、H2198細胞
MARC-145細胞系相關產品:MC-26細胞、HUVEC細胞、HOMEC細胞
H-4細胞系相關產品:MV522細胞、EOC20細胞、RBL 1細胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞系相關產品:UACC 893細胞、JVM2細胞、LS-411N細胞
V79-1細胞系相關產品:MM96L細胞、Capan1細胞、HEY-A8細胞
Large Cell Lung Cancer-103H細胞系相關產品:WPMY-1細胞、3T3F442A細胞、HeLa S-3細胞
HL-60細胞系相關產品:Panc-813細胞、B5537SKIN細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞
PC-3M-IE8細胞系相關產品:MDA-MB-231-GFP細胞、Balb/c3T3細胞、H1930細胞
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