"DMS 114 Adherent人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說,針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因:細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多,細(xì)胞老化;2)細(xì)胞的接種量:接種量過低,細(xì)胞生長緩慢;3)細(xì)胞傳代時間過晚:細(xì)胞中毒,影響傳代后的細(xì)胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細(xì)胞死亡;時間過短,細(xì)胞未完全分離而成團,細(xì)胞死亡;5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應(yīng)是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大;3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細(xì)胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
DMS 114 Adherent人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
常規(guī)的細(xì)胞實驗(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實驗,比如病毒包裝,對細(xì)胞代數(shù),對細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個時候,胰酶消化,就是潤洗,都會對細(xì)胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細(xì)胞包裝能力就會逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性,來使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細(xì)胞,添加多一些EDTA,就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果10min還消化不徹底的話),而應(yīng)該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講,對于一些難消化細(xì)胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細(xì)胞,不需要配制如此溶液。
NCI-SNU-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH細(xì)胞、NTERA-2細(xì)胞、T98細(xì)胞
RPMI 6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV-112細(xì)胞、Fetal Human Colon細(xì)胞、NCI-H1437細(xì)胞
RCC 786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM95細(xì)胞、NCI-H1869細(xì)胞、T-84細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:4傳代;每周換液2次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Hs 819.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPVECs細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞
C-Lu65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP-2細(xì)胞、RCC10細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞
ONS-76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3D4/21細(xì)胞、SC細(xì)胞、KRC Y細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
DMS 114 Adherent人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟:【瘤細(xì)胞懸液接種】1)無菌選取生長良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細(xì)胞;2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨,經(jīng)80~100目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液;3)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍;4)計數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至107~108/ml;5)常規(guī)消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(0.1ml/部位,>106細(xì)胞)。初次接種成功率低,細(xì)胞數(shù)盡可能多一些;6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?!靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤細(xì)胞,將這種腹水反復(fù)傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時,腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞),反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌,進行細(xì)胞計數(shù);2)消毒動物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細(xì)胞;3)接種腹水瘤細(xì)胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
675T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-428細(xì)胞、VM-CUB-I細(xì)胞、FRTL 5細(xì)胞
BXPC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE-19細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、H-7721細(xì)胞
RDES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-4B/C細(xì)胞、CD 18細(xì)胞、BT 549細(xì)胞
Ha Fe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1008細(xì)胞、AN3CA細(xì)胞、OVCAR.8細(xì)胞
PATU-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHZ-88細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞、SW620細(xì)胞
BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H.Ep.-2細(xì)胞、DLD1細(xì)胞、LA4細(xì)胞
MC-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1428細(xì)胞、C3A細(xì)胞、Hs 683細(xì)胞
SCL I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCW 100細(xì)胞、SF-295細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞
HCC-1569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSUDLCL2細(xì)胞、AN3 CA細(xì)胞、Hs606T細(xì)胞
HRCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu3細(xì)胞、McArdle RH-7777細(xì)胞、OCI-Ly 10細(xì)胞
SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞
SKMES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THLE2細(xì)胞、HcerEpic細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞
MHCC97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK N SH細(xì)胞、BPH1細(xì)胞、LN299細(xì)胞
DMS 114 Adherent人肺癌細(xì)胞系
NCI H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-747細(xì)胞、C4-2B細(xì)胞、SCCVII細(xì)胞
NCI H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-747細(xì)胞、C4-2B細(xì)胞、SCCVII細(xì)胞
67NR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839T細(xì)胞、H2195細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞
67NR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839T細(xì)胞、H2195細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞
RT4-D6P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye(P-2003)細(xì)胞、IAR 20細(xì)胞、QSG-7701細(xì)胞
Tb 1-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL-HCC細(xì)胞、NCIH1688細(xì)胞、GM07404D細(xì)胞
Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHEE細(xì)胞、NCI-H660細(xì)胞、NS-1-Ag4-1細(xì)胞
RCC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM933細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞
P30-OHKUBO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、SW13細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞
DV-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca-109細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞
Tu 177細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-4細(xì)胞、NCI-SNU-1細(xì)胞、H-82細(xì)胞
CHP126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC-11細(xì)胞、HCC2935細(xì)胞、LS174細(xì)胞
KNS-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞
NCI-H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sol8細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞、H-2135細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YH-13細(xì)胞、SLK細(xì)胞、NCIH1869細(xì)胞
RFL 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 325細(xì)胞、HEC1-A細(xì)胞、SUM52細(xì)胞
3T3F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Microbiological Associates-104細(xì)胞、JB-6 Cl 30細(xì)胞、NWA細(xì)胞
HT29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 962細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞、HCT_116細(xì)胞
MADB 106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT FET細(xì)胞、KMS18細(xì)胞、KMS18細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YH-13細(xì)胞、SLK細(xì)胞、NCIH1869細(xì)胞
OVCA 420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE 80細(xì)胞、RT-112細(xì)胞、NK92MI細(xì)胞
KYSE 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S3細(xì)胞、HM1900細(xì)胞、Huh7.5.1細(xì)胞
U-87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341Med細(xì)胞、B16/BL6細(xì)胞、TT細(xì)胞
HEK.EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2196細(xì)胞、WM115F細(xì)胞、NCIH226細(xì)胞
ACC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1-LUC細(xì)胞、HRA 19細(xì)胞、SUM-149細(xì)胞
4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR433細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞
WM 451-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2185細(xì)胞、H-716細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞
Hs819T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-766-T細(xì)胞、U2OS細(xì)胞、INS1-E細(xì)胞
MMAc.SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIEC細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞、CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞
SNU368細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB-4細(xì)胞、GM02219細(xì)胞、Detroit562細(xì)胞
H-2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 4細(xì)胞、BCaP-37細(xì)胞、HeLa/DDP細(xì)胞
SNU398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G 401細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞
ME180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1-a細(xì)胞、L78細(xì)胞、Fetal Human Colon細(xì)胞
HSF2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ssMCF-7細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞
HCC-9204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNGHOS細(xì)胞、Sp2/0-Ag-14細(xì)胞、FTC-133細(xì)胞
NCIH2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KCL-22細(xì)胞、FHL-124細(xì)胞、ZYM-SVEC01細(xì)胞
SKMEL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca-83細(xì)胞、SW1353細(xì)胞、GM04679細(xì)胞
D407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-3細(xì)胞、IB-RS-2細(xì)胞、Panc5.04細(xì)胞
H-2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149-PT細(xì)胞、SCL II細(xì)胞、Hs 863.T細(xì)胞
PC12(高分化)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Oregon J-111細(xì)胞、HO-1-N-1細(xì)胞、PC3細(xì)胞
AU565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV2細(xì)胞、COLO-741細(xì)胞、RL-952細(xì)胞
MUTZ3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero-76細(xì)胞、HCC202細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞
DMS 114 Adherent人肺癌細(xì)胞系
COV362細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-1細(xì)胞、L5178YR細(xì)胞、P30 OHK細(xì)胞
GalK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaEs17細(xì)胞、T/G HA VSMC細(xì)胞、MB-49細(xì)胞
Walker256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1993細(xì)胞、kms 11細(xì)胞、624mel細(xì)胞
F56 [Human neoplasm]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-11細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞
U937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi-6細(xì)胞、Rat Lung-65細(xì)胞、SF 126細(xì)胞
EB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo320細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞、J774A1細(xì)胞
GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1373細(xì)胞、BSC-40細(xì)胞、OCI-LY-7細(xì)胞
NCI-H2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H102細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞
HEK-293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F10細(xì)胞、Jiyoye(P-2003)細(xì)胞、High 5細(xì)胞
Chang Cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z138細(xì)胞、H-1373細(xì)胞、JURKAT E-61細(xì)胞
Hep-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs445細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞、CPAE細(xì)胞
RDES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-4B/C細(xì)胞、HEK293F細(xì)胞、87 MG細(xì)胞
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