"SNU-668 Adherent人胃癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SNU-668 Adherent人胃癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。
RKO-AS-45-1細胞系相關產(chǎn)品:SGC996細胞、SuDHL 5細胞、Vero 76 clone E6細胞
A9(Hamprecht)細胞系相關產(chǎn)品:SCC-15細胞、HCC-1359細胞、PC-14細胞
KYSE0030細胞系相關產(chǎn)品:hOMF細胞、P31/Fujioka細胞、Human Epithelioma-2細胞
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KNS81細胞系相關產(chǎn)品:3T3-J2細胞、LS-513細胞、LUDLU 1細胞
NCI-H358細胞系相關產(chǎn)品:OCI Ly3細胞、3T3F442A細胞、WPMY1細胞
MIN-6細胞系相關產(chǎn)品:SCC090細胞、DCS細胞、Caov-4細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
SNU-668 Adherent人胃癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
U-343MG細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-601細胞、SW480E細胞、DB細胞
NCI-H820細胞系相關產(chǎn)品:P31/FUJ細胞、Caco 2細胞、HHUA細胞
HPAF-2細胞系相關產(chǎn)品:L Wnt-3A細胞、NCI-H2107細胞、HMC3細胞
NCI-H2110細胞系相關產(chǎn)品:E6-1細胞、G-292 clone A141B1細胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞
SUDHL10細胞系相關產(chǎn)品:CV-1 in Origin Simian-7細胞、B16 BL6細胞、SW1271細胞
SKMEL28細胞系相關產(chǎn)品:Panc 05.04細胞、Pt K1細胞、PC3M-1E8細胞
T/GHA-VSMC細胞系相關產(chǎn)品:SGC-7901細胞、NCIH441細胞、KOSC2細胞
PBL細胞系相關產(chǎn)品:H35細胞、RAW 264.7細胞、MA-782細胞
H-1915細胞系相關產(chǎn)品:S180細胞、NPC-TW039細胞、Pt-K2細胞
CHO K1細胞系相關產(chǎn)品:CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞
MAntle cell VERona-1細胞系相關產(chǎn)品:CORL88細胞、PASMCS細胞、Tu686細胞
Tadarida brasiliensis 1 lung細胞系相關產(chǎn)品:JCA-1細胞、SCC15細胞、P30/OHK細胞
Ej138細胞系相關產(chǎn)品:Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞
SNU-668 Adherent人胃癌細胞系
KG-1細胞系相關產(chǎn)品:SPC-A1細胞、Hs 895.T細胞、AMJ2-C8細胞
CO115細胞系相關產(chǎn)品:SK.MEL.5細胞、PECAPJ34細胞、MADB-106細胞
RPMI-8226S細胞系相關產(chǎn)品:RCSMC細胞、C32 mel細胞、HT115細胞
RPMI-8226S細胞系相關產(chǎn)品:RCSMC細胞、C32 mel細胞、HT115細胞
C32r細胞系相關產(chǎn)品:NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞
Tokyo Medical and Dental university 8細胞系相關產(chǎn)品:CEK細胞、HB 611細胞、FLC-7細胞
HSF2細胞系相關產(chǎn)品:ssMCF-7細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、NCI-H2196細胞
Colon-38細胞系相關產(chǎn)品:CEM/0細胞、786-0WT細胞、LTEP-s細胞
HCA-7細胞系相關產(chǎn)品:VP267細胞、Hep G2-Luc細胞、PBL細胞
Hs27細胞系相關產(chǎn)品:K299細胞、OS-732細胞、HCC-44細胞
3T3-F442A細胞系相關產(chǎn)品:rRTEC細胞、SK-LU-1細胞、Panc 05.04細胞
BHT-101細胞系相關產(chǎn)品:MSTO211H細胞、DV-90細胞、JeKo 1細胞
HEK-293-FT細胞系相關產(chǎn)品:NP-69細胞、32D:cl3細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞
KM12SM細胞系相關產(chǎn)品:OV90細胞、16-HBEo細胞、SW 948細胞
HFL-I細胞系相關產(chǎn)品:Tregs細胞、HT1376細胞、H-295細胞
MOLM-16細胞系相關產(chǎn)品:McA-RH8994細胞、Hs 766T細胞、L-428細胞
KU 812F細胞系相關產(chǎn)品:RPMI-8226S細胞、MRC-9細胞、HCC1171細胞
HOS-143B細胞系相關產(chǎn)品:DSL6A/C1細胞、SK_N_FI細胞、RCCJF細胞
NCI-H929細胞系相關產(chǎn)品:S3-HeLa細胞、Glioma 261細胞、NCI-H865細胞
NCI-H747細胞系相關產(chǎn)品:C 6細胞、BIC-1細胞、MDAMB134VI細胞
Medical Research Council cell strain-5細胞系相關產(chǎn)品:SupT1細胞、G 292 Clone A 141B1細胞、IR983F細胞
Rat Chondrosarcoma Swarm細胞系相關產(chǎn)品:HL1細胞、HEK-293A細胞、MES 23.5細胞
BMDC細胞系相關產(chǎn)品:KGN細胞、AHH-1細胞、MDA MB 231細胞
HHL5細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H322細胞、HTori3細胞、DOK細胞
HEK-A細胞系相關產(chǎn)品:LTPA細胞、VAESBJ細胞、NCIH747細胞
RWPE2細胞系相關產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、DMS 153細胞、SCLC21H細胞
AK細胞系相關產(chǎn)品:Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞、HGMC細胞、TE-13細胞
Onda 11細胞系相關產(chǎn)品:SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞
LL/2 (LLC1)細胞系相關產(chǎn)品:HeLa229細胞、ROS 17/2.8細胞、LAN6細胞
SU-DHL-10細胞系相關產(chǎn)品:BC-020細胞、Rat-2細胞、NCIH2170細胞
K7M2 wt細胞系相關產(chǎn)品:Caov-4細胞、J-774A.1細胞、Jeko1細胞
LN-229細胞系相關產(chǎn)品:RGCs細胞、786-0細胞、hSCC-25細胞
RAG細胞系相關產(chǎn)品:HFTF細胞、OSRC2細胞、CD18細胞
LIM-1215細胞系相關產(chǎn)品:PANC0327細胞、CEMx721.174.T2細胞、GM00637F細胞
NCI-H322T細胞系相關產(chǎn)品:Rh30細胞、H-660細胞、BC-PAP細胞
M-14細胞系相關產(chǎn)品:SW626細胞、NIH 3T6細胞、BNL-CL.2細胞
SCL-I細胞系相關產(chǎn)品:WM-266-4細胞、UCLA-SO-M20細胞、NCI-H647細胞
SCL-I細胞系相關產(chǎn)品:WM-266-4細胞、UCLA-SO-M20細胞、NCI-H647細胞
H2110細胞系相關產(chǎn)品:COV504細胞、HEK-AD 293細胞、CCD18Co細胞
Simpson細胞系相關產(chǎn)品:RERFLCMS細胞、TE-9細胞、UMRC-2細胞
SKMEL3細胞系相關產(chǎn)品:H146細胞、NCI-ADR-RES細胞、COV434細胞
J-111細胞系相關產(chǎn)品:Vero 76 clone E6細胞、LAD2細胞、HT-22細胞
SNU-668 Adherent人胃癌細胞系
Panc 05.04細胞系相關產(chǎn)品:KMST6細胞、CMEC/D3細胞、NUGC-4細胞
MRC9細胞系相關產(chǎn)品:HLEB-3細胞、NCI-H226細胞、NCIH510細胞
GM02219D細胞系相關產(chǎn)品:RMa-bm細胞、WSU-DLCL2細胞、HFT8810細胞
B16 F10細胞系相關產(chǎn)品:A-704細胞、253JBV細胞、LNCaP subline C4-2細胞
FLS細胞系相關產(chǎn)品:Hs68細胞、PC10細胞、SNU484細胞
PC 61 5.3細胞系相關產(chǎn)品:NE1-E6E7細胞、ST2細胞、HT 1197細胞
3T3-L1細胞系相關產(chǎn)品:NS1-Ag 4/1細胞、LTEP-a2細胞、CCD1112Sk細胞
MV4:11細胞系相關產(chǎn)品:P30OHK細胞、K1細胞、BXPC3細胞
NPC-TW 01細胞系相關產(chǎn)品:SK-OV-3細胞、V79-4細胞、BLO11細胞
MV-4-11細胞系相關產(chǎn)品:OCILY-3細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、RCC 786-O細胞
TGW-nu細胞系相關產(chǎn)品:SKNEP細胞、P30 OHK細胞、BC-019細胞
HPAF2細胞系相關產(chǎn)品:EB-2細胞、SKHEP-1細胞、B35細胞
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