"RSC96 Adherent大鼠雪旺細胞系
細胞背景資料：雪旺細胞；自發(fā)永生
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應調節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RSC96 Adherent大鼠雪旺細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質，應立即停用，更換另一批號的血清。
LY-R細胞系相關產品：EJ1細胞、A498細胞、Colon-26細胞
P3J細胞系相關產品：SW48細胞、P3-x63-Ag8 653細胞、CHOK1細胞
MV-3細胞系相關產品：H1672細胞、Caco-2/BBe細胞、TGBC-11-TKB細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Okayama University Medical School-27細胞系相關產品：EHEB細胞、HT 1080.T細胞、2008細胞
hCMEC/D3細胞系相關產品：SACC-83細胞、EBTr細胞、MN9D細胞
GB-1細胞系相關產品：DLD-1細胞、RPVSMC細胞、MOLT3細胞
細胞生長特性：貼壁
RSC96 Adherent大鼠雪旺細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
IAR-20細胞系相關產品：LM1細胞、VA-ES-BJ細胞、BE(2)-M17細胞
L1210細胞系相關產品：HCA-7細胞、SVG p12細胞、TE9細胞
RTMC細胞系相關產品：PL 45細胞、J-111細胞、KMH-2細胞
UMC-11細胞系相關產品：Human Embryo Kidney-2細胞、TSCCa細胞、SNU-620細胞
OVCAR-432細胞系相關產品：SK-N-BE細胞、SKMEL24細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞
OCI Ly19細胞系相關產品：H-3255細胞、M-20細胞、HCC70細胞
Medical Research Council cell strain-5細胞系相關產品：SupT1細胞、G 292 Clone A 141B1細胞、IR983F細胞
Hs852細胞系相關產品：FDCP1細胞、OCI-AML4細胞、PC-3M細胞
H-2347細胞系相關產品：Anglne細胞、WM-239細胞、TCC Sup細胞
Fetal Human Colon細胞系相關產品：GM04154細胞、PBMC細胞、SR786細胞
HLE-B3細胞系相關產品：2PK-3細胞、HTSMC細胞、RPE-hTERT細胞
NCI-H820細胞系相關產品：P31/FUJ細胞、Caco 2細胞、HHUA細胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞系相關產品：H211細胞、CLL-CII細胞、bEnd.3[BEND3]細胞
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HCC94細胞系相關產品：HCC-2218細胞、AN-3細胞、H2227細胞
FL 62891細胞系相關產品：HL60細胞、NCI-SNU-216細胞、KPL-1細胞
TE1細胞系相關產品：H-2228細胞、COLO-320HSR細胞、Med 341細胞
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SVEC4-10細胞系相關產品：Hx147細胞、CORL88細胞、Hs 729.T細胞
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COLO201細胞系相關產品：Duke University 4475細胞、BC-PAP細胞、Karpas422細胞
OCI-Ly 7細胞系相關產品：H220細胞、253J-BV細胞、Tsup-1細胞
LICR-LON-HN6細胞系相關產品：NW-38細胞、HOP-62細胞、H2023細胞
HS578細胞系相關產品：CAMA-1細胞、SCCVII/St細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞
TGBC11TKB細胞系相關產品：NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞
NBL-1細胞系相關產品：LC-1 sq細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、KU19-19細胞
H-3255細胞系相關產品：HT 1080細胞、RL95細胞、B16-F10--RED細胞
H-1770細胞系相關產品：RSC 96細胞、Fetal Human Lens-124細胞、PLC/PRF/5細胞
TGBC-11-TKB細胞系相關產品：RPMI7951細胞、J82 COT細胞、LC-1 sq細胞
ESC細胞系相關產品：Y-79細胞、HS-294T細胞、HCe-8693細胞
OsA-CL細胞系相關產品：TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞
HMC-1細胞系相關產品：ML-2細胞、NCI-H711細胞、H35 Reuber細胞
University of Arizona Cell Culture-812細胞系相關產品：WEHI 231細胞、HCC-1143細胞、NCIH460細胞
KYSE0030細胞系相關產品：hOMF細胞、P31/Fujioka細胞、Human Epithelioma-2細胞
C8-D1A細胞系相關產品：MN9D細胞、CCRF CEM細胞、CSQT-2細胞
NIHOVCAR3細胞系相關產品：FL62891細胞、H2052細胞、MC-116細胞
MS-751細胞系相關產品：H-1184細胞、COLO.205細胞、H847細胞
H184A1細胞系相關產品：28SC細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞、Hs888 Lu細胞
NTC-200細胞系相關產品：Panc-05.04細胞、MDAMB-231細胞、K7M2 wt細胞
MES-SA Dx5細胞系相關產品：Hs294細胞、HSC6細胞、C-33 A細胞
H-1963細胞系相關產品：CTX TNA2細胞、OCI-AML-4細胞、SK-MEL24細胞
Hi5細胞系相關產品：JC細胞、SKCO1細胞、CEMx721.174.T2細胞
H9c2(2-1)細胞系相關產品：MFE296細胞、PLCPRF5細胞、HCC0044細胞
Renal Carcinoma細胞系相關產品：LNCaP subline C4-2細胞、H9c2細胞、Hs 888.T細胞
MNNG細胞系相關產品：I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞
R D細胞系相關產品：CAL 120細胞、MDA-MB-175VII細胞、SUM 149細胞
MDA-MB 231細胞系相關產品：HCT 116細胞、UM-UC-1細胞、HCC1806細胞
THP-1細胞系相關產品：OVCAR420細胞、P388-D1細胞、High Five細胞
EFO27細胞系相關產品：NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞
PLC細胞系相關產品：Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞
H-220細胞系相關產品：Cor L51細胞、SV-HUC-1細胞、PK 15細胞
SJRH-30細胞系相關產品：MC3T3-E1 Subclone 14細胞、746T細胞、SuDHL 4細胞
RSC96 Adherent大鼠雪旺細胞系
T-24細胞系相關產品：SK-ML2細胞、Walker 256細胞、BL-6細胞
NCI-H460細胞系相關產品：SK Mel28細胞、NCI-H1793細胞、SW 480細胞
B-104細胞系相關產品：COLO-320DM細胞、SaOS細胞、RMS 13細胞
TCMK-1細胞系相關產品：L-02細胞、LM1細胞、NCIH28細胞
Jiyoye (P-2003)細胞系相關產品：H-1299細胞、COS1細胞、HMCB細胞
FTC133細胞系相關產品：HCC1395細胞、HSAS1細胞、HCA 7細胞
HOSEpiC細胞系相關產品：Toledo細胞、Hs-27細胞、P-36細胞
OCI/AML4細胞系相關產品：SK-N-BE-2c細胞、MPC11細胞、OCI/AML4細胞
C8D1A細胞系相關產品：NCIH1930細胞、HELA-GFP細胞、Dunn LM8細胞
HPASMC細胞系相關產品：SW780細胞、KE39細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞
JHH7細胞系相關產品：TE354.T細胞、H-2106細胞、D-341 Med細胞
RTMC細胞系相關產品：PL 45細胞、L-cell細胞、CEMO-1細胞
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