"RM-1 Adherent小鼠前列腺癌細胞系
細胞背景資料：前列腺癌；C５７BL/６
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RM-1 Adherent小鼠前列腺癌細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質，應立即停用，更換另一批號的血清。
BC-024細胞系相關產品：MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞
LS-513細胞系相關產品：NCIH1792細胞、OCIAML4細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞
Caki2細胞系相關產品：BE2C細胞、OKT 3細胞、CAL-78細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
Los Angeles Prostate Cancer-4細胞系相關產品：SF295細胞、HKBML細胞、HRVEC細胞
CHL-1細胞系相關產品：NCI-128細胞、HEK/EBNA細胞、MGH-U1細胞
Spodoptera frugiperda clone 9細胞系相關產品：IPLB-Sf21細胞、VP 267細胞、KBM5細胞
細胞生長特性：貼壁
RM-1 Adherent小鼠前列腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數，傳相應數目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
H-1666細胞系相關產品：OCI-AML-2細胞、BE(2)M-17細胞、HCC1428細胞
Hepatoma-22細胞系相關產品：NCI.H522細胞、Colo320細胞、B-104細胞
UCLA-RO 81細胞系相關產品：M-14細胞、HTori:3細胞、MDA.MB.231細胞
KRC-Y細胞系相關產品：Human Foreskin Fibroblast細胞、EAC細胞、Y3M細胞
4T1.2細胞系相關產品：SHG-44細胞、143 B細胞、Colon26細胞
CA-46細胞系相關產品：B-95-8細胞、Daoy細胞、9L細胞
Detroit 562細胞系相關產品：SUDHL6細胞、PaTu 8988s細胞、Hs746T細胞
HNE3細胞系相關產品：GM04678細胞、KYSE-410細胞、LM-TK-細胞
LC-2/ad細胞系相關產品：TE-85 clone 5細胞、SDBMSC細胞、AG 9細胞
C4-2 B細胞系相關產品：AR41P細胞、EB-3細胞、Panc-813細胞
SNU398細胞系相關產品：G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞
MDA-MB-175-VII細胞系相關產品：SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞
NeHepLxHT細胞系相關產品：SNU-C2A細胞、SLMT1細胞、SNU449細胞
RM-1 Adherent小鼠前列腺癌細胞系
NCI-H2029細胞系相關產品：Ku812細胞、P30 OHK細胞、SK-NEP-1細胞
SK-NEP-1細胞系相關產品：SCL II細胞、Dunn LM8細胞、COLO-829細胞
NCIH2081細胞系相關產品：74Int細胞、HPAFII細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞
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GP2d細胞系相關產品：CCD19Lu細胞、GM2131細胞、GM637細胞
22Rv1細胞系相關產品：MDA.MB.231細胞、GM04680細胞、UT-7細胞
H3255細胞系相關產品：RCC-4細胞、KP4細胞、KU-812F細胞
SW 982細胞系相關產品：Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞
C2BBe 1細胞系相關產品：KYSE-510細胞、Hepa-RG細胞、130T細胞
M4e細胞系相關產品：GBCSD細胞、JeKo 1細胞、H676B細胞
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SNGM細胞系相關產品：H2009細胞、RT4-D6-P2T細胞、293-FT細胞
RSC96細胞系相關產品：PG [Human lung carcinoma]細胞、H-322細胞、Y 1細胞
MS-751細胞系相關產品：H-1184細胞、COLO.205細胞、H847細胞
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FRTL5細胞系相關產品：HPASMC細胞、HARA-B細胞、FDCP-1細胞
RC13細胞系相關產品：JF305細胞、BE2-C細胞、HSC5細胞
BEL 7404細胞系相關產品：Colo205細胞、JiyoyeP-2003細胞、HIMEC細胞
EFM192B細胞系相關產品：COLO-394細胞、NCI-H2227細胞、Helacyton gartleri細胞
HLF細胞系相關產品：HSC-T6細胞、NCI-H774細胞、SW-1222細胞
MES-SA/Dx-5細胞系相關產品：RS1細胞、HEK 293T/17細胞、HSCT6細胞
COLO679細胞系相關產品：EPC細胞、Hs-940細胞、SCH細胞
Leydig細胞系相關產品：CTSC-3細胞、BPH-1細胞、MC3T3-L1細胞
LX-2細胞系相關產品：MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞
Panc-08.13細胞系相關產品：C4-I細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞、MCF 7細胞
SU86.86細胞系相關產品：NT2D1細胞、BIC細胞、H-1435細胞
A 2058細胞系相關產品：SK-N-BE2C細胞、G-292, clone A141B1細胞、LS 174 T細胞
HCT/Taxo1細胞系相關產品：NTERA2-D1細胞、RKN細胞、NW-MEL-38細胞
NCI-H1435細胞系相關產品：Rat-1細胞、MHCC97L細胞、NCI-H1668細胞
COLO320 DM細胞系相關產品：RCC 7860細胞、A431/P細胞、MDA-1386細胞
COC1/CDDP細胞系相關產品：UCLA RO-81A-1細胞、IFRS1細胞、DHL-6細胞
UCLA-SO-M20細胞系相關產品：HCC-2935細胞、Henrietta Lacks cells細胞、BC-3H-1細胞
H1963細胞系相關產品：SK Col 1細胞、GA-10 clone 4細胞、MCF-7/ADR細胞
KPL4細胞系相關產品：GT1-1細胞、WML2細胞、ABC1細胞
HT 1376.T細胞系相關產品：U138細胞、hADSCs細胞、OVCA432細胞
GCT0404細胞系相關產品：HS766T細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、SL1細胞
SLMT1細胞系相關產品：L 428細胞、SK-N-F1細胞、HEC-1-B細胞
STO細胞系相關產品：NCIH1092細胞、WEHI3B細胞、H-146細胞
Douglas Foster-1細胞系相關產品：NCI-H2227細胞、APRE-19細胞、NIH:OVCAR-3細胞
EoL-1細胞系相關產品：MEG-01細胞、U-138-MG細胞、C-Li-7細胞
32D/cl3細胞系相關產品：H4-II-E-C3細胞、Hs746-T細胞、EM-3細胞
RM-1 Adherent小鼠前列腺癌細胞系
A673細胞系相關產品：MKN1細胞、SHI-1細胞、UCW 100細胞
H-748細胞系相關產品：Mel624細胞、MARC 145細胞、SK-RC 39細胞
SNK-6細胞系相關產品：Turbot Embryonic Cell line細胞、HepaRG細胞、HL1細胞
SK-BR-3細胞系相關產品：KMS11細胞、CAMA-1細胞、OVCAR 432細胞
QGP 1細胞系相關產品：H-35細胞、LTEPsm細胞、CATH.a細胞
NT2-D1細胞系相關產品：Lewis Lung細胞、SK-MES細胞、A253細胞
T_T_細胞系相關產品：BN-CL2細胞、NCIH82細胞、LP1細胞
HEC-1-B細胞系相關產品：QBC939細胞、BrCL15細胞、KP-4細胞
FAT細胞系相關產品：Dunn LM8細胞、IPLB-SF 21AE細胞、H1650_CO細胞
149 PT細胞系相關產品：Hs 578T細胞、CEK細胞、EST81細胞
NuTu 19細胞系相關產品：RGE細胞、SK-ChA1細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞
UCLA-RO 81細胞系相關產品：M-14細胞、J111細胞、WTRL1細胞
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