"NCI-H187 Adherent人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：經(jīng)典小細胞肺癌；胸腔積液轉移；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞凍存復蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結構，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H187 Adherent人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結構特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
J-774細胞系相關產(chǎn)品：IMR 90細胞、A9細胞、Rat-1細胞
H-157細胞系相關產(chǎn)品：U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞
SuDHL 10細胞系相關產(chǎn)品：Madin-Darby Canine Kidney細胞、CATHa細胞、SK-MEL 28細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Hs-274-T細胞系相關產(chǎn)品：GI-1細胞、HeLa S-3細胞、Pfeiffer細胞
IPAM-WT細胞系相關產(chǎn)品：Mink細胞、Hs 822.T細胞、BEND細胞
Hs940T細胞系相關產(chǎn)品：A549/ATCC細胞、OCI AML5細胞、SGC-996細胞
細胞生長特性：懸浮
NCI-H187 Adherent人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管爆裂。
CMT64細胞系相關產(chǎn)品：LN382細胞、Ramos(RA1)細胞、LMH細胞
SUM52細胞系相關產(chǎn)品：PC-12細胞、NCIH2081細胞、NCI-H524細胞
ML-2細胞系相關產(chǎn)品：CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞
Jiyoye (P-2003)細胞系相關產(chǎn)品：H-1299細胞、COS1細胞、HMCB細胞
NTERA-2 cl.D1細胞系相關產(chǎn)品：GM02219細胞、HMC3細胞、B16/F1細胞
HFF1細胞系相關產(chǎn)品：BNL 1ME A.7R.1細胞、MB39細胞、H295R-S1細胞
Walker/LLC-WRC256細胞系相關產(chǎn)品：INS1-E細胞、CL1-0細胞、Vero 76 clone E-6細胞
H2347細胞系相關產(chǎn)品：ChaGo-K1細胞、P388細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞
GM02131細胞系相關產(chǎn)品：NCTC-3960細胞、Rat Fetal Lung-6細胞、LICR-HN6細胞
207細胞系相關產(chǎn)品：CHOS細胞、Panc-03.27細胞、HEC1-A細胞
mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞系相關產(chǎn)品：MC/CAR細胞、HEM-L細胞、HuH6細胞
HCC-95細胞系相關產(chǎn)品：Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞
HPAF-II/CD18細胞系相關產(chǎn)品：MSC細胞、GM-346細胞、SUP-B15細胞
NCI-H187 Adherent人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞系
BT474細胞系相關產(chǎn)品：H-727細胞、McA-RH8994細胞、MS-751細胞
Tca-8113細胞系相關產(chǎn)品：KM12細胞、Hca-F細胞、NP-69細胞
COLO-205細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1105細胞、COV 434細胞、NMCG-1細胞
COLO-205細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1105細胞、COV 434細胞、NMCG-1細胞
OCI-AML-4細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-DZ細胞、MC9細胞、SW 837細胞
NG 108-15細胞系相關產(chǎn)品：GM03569B細胞、MDA-MB-436細胞、A431細胞
Normal Rat Kidney-49F細胞系相關產(chǎn)品：A-172MG細胞、Tu177細胞、HCC-1419細胞
PL45細胞系相關產(chǎn)品：4T1細胞、NHDF細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞
H1666_DA細胞系相關產(chǎn)品：RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞
DLD 1細胞系相關產(chǎn)品：PC-3細胞、MCF-12A細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞
RC-2細胞系相關產(chǎn)品：HR-1細胞、HPDE細胞、OKT3細胞
Panc08.13細胞系相關產(chǎn)品：PC-3M-1E8細胞、MEL-526細胞、NIH3T3-L1細胞
H-2085細胞系相關產(chǎn)品：BC-PAP細胞、GTL16細胞、NCTC 3960細胞
SK-N-DZ細胞系相關產(chǎn)品：A-1847細胞、EC109細胞、BEL 7405細胞
NEC8細胞系相關產(chǎn)品：EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Rca-B細胞、KYSE410細胞
Clone 15 HL-60細胞系相關產(chǎn)品：Hs-578Bst細胞、CW-2細胞、KU-19-19細胞
SRA 01/04細胞系相關產(chǎn)品：HN4細胞、CEM-0細胞、MC38細胞
MS-751細胞系相關產(chǎn)品：H-1184細胞、COLO.205細胞、H847細胞
HPMEC細胞系相關產(chǎn)品：Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞
BEL-7405細胞系相關產(chǎn)品：H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞
CCRF CEM細胞系相關產(chǎn)品：ARO81-1細胞、MKN 7細胞、2PK-3細胞
NBL_S細胞系相關產(chǎn)品：KCL22細胞、HEK.EBNA細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞
CEM細胞系相關產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、HEK-293H細胞、H740細胞
DOK細胞系相關產(chǎn)品：GM12878細胞、Nthy ori 3.1細胞、NB-19細胞
B16-BL6細胞系相關產(chǎn)品：C6661細胞、COLO 357細胞、HLEC-B3細胞
MCF-12F細胞系相關產(chǎn)品：COLO-741細胞、FHL 124細胞、GRSL細胞
H1238細胞系相關產(chǎn)品：Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、PC-3M-IE8細胞、A549-Taxol細胞
UWB1.289細胞系相關產(chǎn)品：118MG細胞、NCIH196細胞、FD-LSC-1細胞
C3H/10T1/2 CL8細胞系相關產(chǎn)品：MT4細胞、NUGC3細胞、MCF.10A細胞
C8161細胞系相關產(chǎn)品：H1238細胞、H196細胞、FO [Mouse myeloma]細胞
LS513細胞系相關產(chǎn)品：OCI Ly1細胞、A-10細胞、NCI-H102細胞
PC 61-5-3細胞系相關產(chǎn)品：GM637細胞、NIH-3T3細胞、BNL.CL2細胞
HKC細胞系相關產(chǎn)品：SW-982細胞、PL9細胞、BL1339細胞
GT39細胞系相關產(chǎn)品：NCI.H460細胞、RPMI8226細胞、HCC1588細胞
KYSE140細胞系相關產(chǎn)品：H1573細胞、BJ1細胞、H1299細胞
VMRCLCD細胞系相關產(chǎn)品：L-5178-Y-R細胞、PaTu-8988s細胞、Astrocyte type I clone細胞
KGN細胞系相關產(chǎn)品：SO-RB50細胞、HS688AT細胞、SKCO1細胞
FF-WT-BJ細胞系相關產(chǎn)品：hTERT-HPNE細胞、R 2 C細胞、H-4細胞
AMO-1細胞系相關產(chǎn)品：Th17細胞、SSP-25細胞、VP303細胞
NALM-6細胞系相關產(chǎn)品：RCCJF細胞、NIH:OVCAR3細胞、MCF.7細胞
NCIH548細胞系相關產(chǎn)品：COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
M-G63細胞系相關產(chǎn)品：SKMel-5細胞、SUIT-2細胞、HLE-B3細胞
NCI-H187 Adherent人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞系
Rat Basophilic Leukemia-1細胞系相關產(chǎn)品：Sp2/O-Ag14細胞、PG-LH7細胞、CAL-27細胞
MB39細胞系相關產(chǎn)品：Mc Ardle 7777細胞、JROECL 19細胞、NIH-3T3-L1細胞
VMM5A細胞系相關產(chǎn)品：CX-1細胞、Fox/NY細胞、7860細胞
SK-MEL5細胞系相關產(chǎn)品：HemECs細胞、HUT-28細胞、SW 403細胞
HPDLF細胞系相關產(chǎn)品：HCC2935細胞、MLO-Y4細胞、J774 A.1細胞
Y-1細胞系相關產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、Panc4.03細胞、HEC251細胞
T241細胞系相關產(chǎn)品：JeKo 1細胞、VMCUB1細胞、MRC5細胞
Ramos (RA 1)細胞系相關產(chǎn)品：hESC細胞、K7M2 wt細胞、SW-1990細胞
MESSA-DX5細胞系相關產(chǎn)品：GLC-15細胞、PLA801D細胞、OCI-AML2細胞
PLB-985細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H676細胞、HCV29細胞、LA-795細胞
CemT4細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1937細胞、Panc 04.03細胞、HT(H9)細胞
ML-2細胞系相關產(chǎn)品：CAMA細胞、SK_N_BE2C細胞、U-343 MG細胞
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