"MUTZ-1 Adherent人骨髓增生異常綜合征細胞系
細胞背景資料:骨髓增生異常綜合征;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MUTZ-1 Adherent人骨髓增生異常綜合征細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
SK BR 03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3NIH細胞、KTC1細胞、Hs 739.T細胞
H-187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs27F細胞、MDA-MB468細胞、JTC-39細胞
NT2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GAK細胞、NL20SV細胞、D10細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
PFSK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT38細胞、Tu-212細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞
EFM19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC78細胞、MC3T3細胞、SKRC-52細胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、201T細胞、Hs695T細胞
細胞生長特性:懸浮
MUTZ-1 Adherent人骨髓增生異常綜合征細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
EJ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL2細胞、OVCA 433細胞、SW-1463細胞
H-2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-12細胞、NIH/3T3細胞、MDA-MB-453細胞
PL-45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPNRTBM1細胞、SAOS 2細胞、DHL-4細胞
MBT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEY-A8細胞、HT-1376細胞、EC109細胞
Ca 9-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2 BBe細胞、CHL細胞、CHP212細胞
ID8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPI-2I細胞、RA 1細胞、FHs 74 Int細胞
LIM1215細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC44細胞、HL60細胞、MDAMB468細胞
GOS-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞
HEK293-FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC 4-10細胞、LM2-4175細胞、PL12細胞
H3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1693細胞、KYSE 410細胞、WSU-DLCL(2)細胞
MT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294-T細胞、BIU87細胞、DMS273細胞
SUM149細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM7細胞、PA317細胞、SP-2/0-AG14細胞
Cor L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-3細胞、8305C細胞、MeSoTheliOma-211H細胞
MUTZ-1 Adherent人骨髓增生異常綜合征細胞系
Hs 604.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2073細胞、L(TK-)細胞、U266-B1細胞
HCT_116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4-D6P2T細胞、Hs-675-T細胞、WB F344細胞
H-1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS-42細胞、CAL-78細胞、Hs 766.T細胞
H-1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS-42細胞、CAL-78細胞、Hs 766.T細胞
CBRH-7919細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MH-S細胞、J774A.1細胞、BT20細胞
OCI-AML-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-DZ細胞、MC9細胞、SW 837細胞
HCC-1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、Panc 5.04細胞、HOCF細胞
COLO-394細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H810細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞、NBL-12細胞
THP-1(ATCC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J.E6-1細胞、BLO-11細胞、Vero 76細胞
NCI-H1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sol8細胞、Colo-678細胞、H-2135細胞
HO8910細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1B細胞、HBZY 1細胞、H-2330細胞
ARH77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-9細胞、SNU407細胞、P19細胞
X63細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPASMC細胞、C8-D1A細胞、SU4細胞
KY-50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL MC/9細胞、NCI-SNU-407細胞、Hs 606細胞
IPLB-Sf21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-2008細胞、HNTEC細胞、KYSE-510細胞
HPDE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC2細胞、CTSC-3細胞、P3X63 AG 8.653細胞
Mia PACA 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118細胞、Ramos 1細胞、GM06141B細胞
IEC18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB231細胞、SU-DHL1細胞、QBC-939細胞
Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS852.T細胞、NCI-H146細胞、Giant Cell Tumor細胞
NRK clone 52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PBL細胞、ARO81細胞、NIH:OVCAR-5細胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-29細胞、A 2058細胞、H-2347細胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B10BR細胞、C-33A細胞、HuH 6細胞
HPAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞
H-1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-92細胞、Caki-2細胞、MFM-223細胞
Detroit-562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98細胞、H-35 Reuber細胞、QGP-1細胞
MDCK.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-10A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、Hep G2-Luc細胞
B16-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C6661細胞、COLO 357細胞、HLEC-B3細胞
CCLP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW-039細胞、CORL51細胞、A20細胞
CTV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/Ag4-1細胞、T-98G細胞、FLS細胞
OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R 1610細胞、Lieming Xu-2細胞、VSC4.1細胞
LTEP a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 AG 8.653細胞、870細胞、Malme-3 M細胞
JM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞
SNU-886細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 2細胞、RBL 1細胞、MIN-6細胞
32D-Cl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FT-293細胞、Co 115細胞、H1581細胞
ARPE19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Balb/3T3-4-Cl31細胞、U 937細胞、IM 9細胞
SIRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD-15細胞、RPE-hTERT細胞、NIH 3T3細胞
HEC251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1-0細胞、IHH4細胞、MDA453細胞
NCI H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly10細胞、NW-38細胞、SW 1990細胞
HR8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL10細胞、LS174T細胞、DMS153細胞
MDA-MB-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-226AR1細胞、SNU-216細胞、HLE B-3細胞
GM04679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-2細胞、CO115細胞、SK-RC-42細胞
FOX-NY細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-875細胞、C8161細胞、MLO-Y4細胞
MUTZ-1 Adherent人骨髓增生異常綜合征細胞系
H-358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞
KTCTL-140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C518細胞、COLO 684細胞、H-1954細胞
LCLC-103H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Forestomach Carcinoma細胞、RPMI 7666細胞、PA-TU-8988S細胞
BSC40細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J 82細胞、HCC-1599細胞、751-NA細胞
IPI-2I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM-1細胞、Hs870T細胞、TE-14細胞
He La細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C81-61細胞、EST50細胞、M210B4細胞
TW01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI3B細胞、CCD966SK細胞、SKRC-39細胞
RIN-14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Uhth-74細胞、TE11細胞、TE10細胞
RPMI1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1436細胞、UM-UC14細胞、NCI-H1436細胞
Human Kidney-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1975細胞、NCI-H1651細胞、EAHY-926細胞
Walker256-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239細胞、MCA 38細胞、Hs 746.T細胞
PL-45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPNRTBM1細胞、MN60細胞、HCa/16A3-F細胞
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