"DAN-G Adherent人胰腺癌細胞系
細胞背景資料：胰腺癌；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
DAN-G Adherent人胰腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
H650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1細胞、SK HEP 01細胞、RLE-6TN細胞
38C13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH細胞、P31-FUJ細胞、Tn5 B1-4細胞
HT 1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG1A細胞、SKNBE(2)細胞、RMG-1細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-12細胞、HCC2108細胞、CHP 100細胞
CT26WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW-264.7細胞、hRMECs細胞、P3JHR-1細胞
SW 1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM239A細胞、PF382細胞、MCF-12A細胞
細胞生長特性：貼壁
DAN-G Adherent人胰腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
T2(174 x CEM.T2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC.1細胞、H295R細胞、CNE2Z細胞
NCI-BL2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO31細胞、H3255_DA細胞、HO8910/PM細胞
H-1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-28細胞、U-343-MG細胞、PT67細胞
MES 23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2A細胞、Mono Mac6細胞、P3/ag細胞
RFL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC2B細胞、PG13細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞
MHCC-LM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-28I2細胞、JROECL19細胞、Hs934T細胞
P388細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG1細胞、H-378細胞、NH-6細胞
NS-1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H661細胞、Tb1Lu細胞、OUMS27細胞
U118細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-2細胞、GM17346細胞、MRAEC細胞
C2BBe 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-510細胞、Hepa-RG細胞、130T細胞
RH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS-1細胞、HCC-827細胞、NCI-128細胞
NPC-TW 039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、LLC PK1細胞、CAL51細胞
RA.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TT細胞、H-1092細胞、COLO 680N細胞
DAN-G Adherent人胰腺癌細胞系
H-1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB.19細胞、H-35細胞、Rat 2細胞
NCIH196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YES 2細胞、AZ521細胞、ZR75-1細胞
NCI-H2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-5細胞、NCI-H2009細胞、KPL4細胞
NCI-H2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-5細胞、NCI-H2009細胞、KPL4細胞
KU812-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：639V細胞、B35細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞
SK-Hep1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepatoma 22細胞、YH細胞、Mink Lung細胞
OCI-Ly18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC9724細胞、C-643細胞、LoVo細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AGS細胞、P388.D1細胞、P3X63 AG8-653細胞
MOLM-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH8994細胞、Hs 766T細胞、L-428細胞
Hs895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMU-S1細胞、D10細胞、H1395細胞
ACC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH226細胞、U373 MG細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞
3T3-L1 ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞
HUSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-847細胞、Hep G2細胞、COLO 320F細胞
OCILY19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB 1.19細胞、NCIH2029細胞、Walker-256細胞
PC-3M-IE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231-GFP細胞、M059J細胞、CCK-81細胞
APRE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuTu-80細胞、RAW2647細胞、OCI-LY-1細胞
CHG-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1573細胞、A375.S2細胞、CL 1-5細胞
SCC90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO.205細胞、U-373MG ATCC細胞、W256細胞
H2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K-562細胞、P560細胞、L cells (TK-)細胞
RS411細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2-D1細胞、LAN-5細胞、HEK293-FT細胞
Ramos細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL51細胞、PC-9細胞、C32 mel細胞
SN12C-PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-5細胞、SK-N-FI細胞、Strain KB細胞
GM02219細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMY1022細胞、KP-2細胞、MDA 231-LM2-4175細胞
SNU620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H196細胞、NCI-H1838細胞、DU-145細胞
SCI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HC11 Mammary Epithelium細胞、SK-NSH細胞、PIGI細胞
ST2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R D細胞、RS4:11細胞、Hs675細胞
HLE-SRA-01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc2.03細胞、CEMC7細胞、NTera 2細胞
GS-9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-028細胞、Neukoplast細胞、OAW42細胞
HPAF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729細胞、SKMEL-24細胞、SNK1細胞
MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS411細胞、QGP1細胞、TE 85 ClF-5細胞
HIMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-157細胞、2V6.11細胞、SCL-2細胞
LNCaP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y79細胞、CCK81細胞、PE/CA-PJ34細胞
HLF-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW01細胞、MDAMB330細胞、COLO.205細胞
HCET細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H295R細胞、FM88細胞、EA.hy 926細胞
HSC-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H69細胞、Co 205細胞、HKC細胞
MiaPaca.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGHU1細胞、L-428細胞、MDA-MB-330細胞
AML-EOL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS1細胞、FAK+/+細胞、NCI-H2009細胞
HBZY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-3細胞、HSC1細胞、P-388細胞
H-1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI.8226細胞、CCC-HSF-1細胞、HTR-8細胞
H220細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-676細胞、L cells細胞、EL 4細胞
SCL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-266-4細胞、UCLA-SO-M20細胞、NCI-H647細胞
HOS-143B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL6A/C1細胞、SK_N_FI細胞、RCCJF細胞
DAN-G Adherent人胰腺癌細胞系
H-2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anglne細胞、WM-239細胞、TCC Sup細胞
TOV21G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PANC-1細胞、SNU398細胞
CV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 1112SK細胞、HCPEpiC細胞、WiDrTC細胞
WM 2664細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-9細胞、SK-MEL24細胞、MV411細胞
HCE-2 [50.B1]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-401細胞、HRA-19細胞、NCIH378細胞
GM03571細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Rhesus Kidney-4細胞、HCC-1395細胞、SU86.86細胞
H1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-14細胞、QGY7703細胞、NE1-E6E7細胞
SuDHL 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Evsa T細胞、H-1876細胞、WTRL1細胞
H-1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1-Lu細胞、ES2細胞、EoL-1細胞
L-M[TK-]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL 5細胞、VM-CUB-I細胞、184A1細胞
NCI-H2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1299細胞、HT-55細胞、Hs 819.T細胞
H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM0637細胞、MPC-11細胞、MGC803細胞
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