"H4-II-E Adherent大鼠肝細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
H4-II-E Adherent大鼠肝細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法:傳代培養(yǎng):是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以1:2或1:2以上的比例轉(zhuǎn)移,接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞,可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代,部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代,或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟:①入無菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài),確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預熱;③超凈臺臺面應整潔,用75%酒精棉球擦拭清潔;④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面20min左右,關(guān)閉紫外燈,打開風機清潔空氣除去臭氧;⑤點燃酒精燈;取出無菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi);⑥將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上;⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每個大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶,小培養(yǎng)瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復吹打消化好的細胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋,適度擰緊后稍回轉(zhuǎn),以利于CO2的進入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱;⑩對懸浮培養(yǎng)細胞,步驟7-9不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
NTERA2-cloneD1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GL-261細胞、MB49細胞、SUNE 1細胞
THPI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2C)細胞、NBL-12細胞、HS940細胞
KYSE510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eph4 1424細胞、AE1201細胞、Ramos 2G6.4C10細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Rat-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞
MLM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1581細胞、NPA-87細胞、GM03320D細胞
Ca759細胞系相關(guān)產(chǎn)品:130T細胞、C3H10T1/2CL8細胞、OAC-P4C細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
H4-II-E Adherent大鼠肝細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)常見問題及解決方案:1)培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細胞極大可能會污染,所以我們會及時安排幫老師解決;2)細胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細胞生長至匯合度80%,進行消化傳代;如細胞還是不貼壁,將細胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導,直到問題解決;3)對于生長緩慢的貼壁細胞:可采用適當?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來保證細胞的狀態(tài)和生長速度;4)對于生長不均的貼壁細胞:在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細胞分布明顯不均時(即某一區(qū)域細胞已重疊生長,而旁邊則為一塊空白),此時可將細胞進行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
H358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/1-Ag4.1細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、ACC-2細胞
NCIH596細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu-212細胞、NCIH2066細胞、CL1細胞
MPC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2OS細胞、SJSA細胞、HIT.T15細胞
Lewis lung carcinoma line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA157細胞、IPEC-1細胞、SNU119細胞
A2780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMG1細胞、Sf21細胞、CCD 841 CoTr細胞
A2780/CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGC-27細胞、Hs-746T細胞、SNU-601細胞
HBSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 832(C).T細胞、SW1222細胞、CWR22R細胞
SUM-102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1651細胞、NRK 49F細胞、SKN-AS細胞
NCI-H211細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H22細胞、JG細胞、P3 (Jiyoye)細胞
HO8910/PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac12F5細胞、U-118-MG細胞、MUS-M1細胞
SNUC2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu 8988 S細胞、H-727細胞、C-28/I2細胞
LA 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/G HA-VSMC細胞、Fao細胞、BC3H-1細胞
TE-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、MGH-UI細胞、H2291細胞
H4-II-E Adherent大鼠肝細胞系
BCP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8-6-5-3細胞、High-5細胞、H-810細胞
NCI-H3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATH-a細胞、C8166-CD4細胞、H-196細胞
Hep-3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs445細胞、T24細胞、HOS/MNNG細胞
Hep-3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs445細胞、T24細胞、HOS/MNNG細胞
RPMI 8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-611-T細胞、AML-2細胞、HT-1197細胞
B16/F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_05_04細胞、CAL 39細胞、HCC366細胞
JurkatE6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-256-TC細胞、NR8383.1細胞、28SC細胞
751-NA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO27細胞、HeLa.S3細胞、138MG細胞
1.1B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-18細胞、GM637A細胞、Human Kidney-2細胞
ELD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP-1細胞、22Rv-1細胞、BT-483細胞
NRK-52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wistar Institute, Susan Hayflick細胞、Mia PACA 2細胞、PC9細胞
OCI Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-3255細胞、M-20細胞、HCC70細胞
RGC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa.S3細胞、L- cell細胞、SW839細胞
Panc-813細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IA-LM細胞、PCI:SG-231細胞、OE-19細胞
RBL.2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT20細胞、HCC 70細胞、GM346細胞
MiaPaca.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGHU1細胞、L-428細胞、MDA-MB-330細胞
NFS60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT-125細胞、PLC PRF 5細胞、P1-Raji細胞
CTSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF細胞、Nb2-11細胞、SU-DHL-5細胞
SU4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW38細胞、MCA-38細胞、CAL-39細胞
MDAMB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT1080細胞、BC-023細胞、IM9細胞
VCaP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs274T細胞、LNCaP-C4-2細胞、SKOV-3細胞
SKLMS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCLC-21H細胞、PLA 802細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞
SK-MEL-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO cell clone K1細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞、PC 61.5.3細胞
C 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-L1細胞、NT2D1細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞
PG-4 S+L-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLMVEC細胞、SW-780細胞、HSC-3細胞
ChaGo-K-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-7細胞、LS123細胞、CAKI1細胞
rHSC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624細胞、Onda 11細胞、Panc327細胞
NCI-H128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO.31細胞、YTMLC-90細胞、GM03573A細胞
TK 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-116細胞、AG06814-N細胞、CAL851細胞
LAPC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EVSAT細胞、SNU886細胞、Bovine ENDometrial cells細胞
BT 549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU4475細胞、HS-729細胞、Mouse podocyte細胞
SK-N-AS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDCP-1細胞、NCI N87細胞、CCRF細胞
NCIH209細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-5細胞、Capan 1細胞、VE細胞
HOC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2073細胞、293S細胞、H1648細胞
Neuro 2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A10細胞、HCC-95細胞、OLN 93細胞
H-1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI.8226細胞、CCC-HSF-1細胞、HTR-8細胞
H-1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-64細胞、L02細胞、PA-TU S細胞
HEH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker/LLC-WRC256細胞、SNU119細胞、Huh-7.5細胞
PT-67細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp 2/0-Ag 14細胞、C666-1細胞、NCI-SNU-620細胞
MDA-MB-231-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ細胞、LuCL4細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞
NS1-1 Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1238細胞、PANC1005細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞
MDA-MB-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE70細胞、MLA-144細胞、CTX TNA2細胞
H4-II-E Adherent大鼠肝細胞系
KYSE-70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK/293細胞、NCI-H82細胞、Nthy-ori 3.1細胞
Hs 578.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS-23細胞、CT26WT細胞、UMUC-14細胞
GM05384細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE1細胞、MCF10-A細胞、SW403細胞
Mink Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1915細胞、HCC-44細胞、LNCaP clone FGC細胞
Lewis Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI231細胞、UMNSAH/DF#1細胞、LIXC-002細胞
Detroit 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL6細胞、PaTu 8988s細胞、Hs746T細胞
U251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3AO細胞、Cattle chondrocytes細胞、MCF10A細胞
H9c2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU_145細胞、HOS(TE85)細胞、FOX-NY細胞
0V-1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780S細胞、QGY 7701細胞、JB 6細胞
GM02131細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-3960細胞、Ketr-3細胞、NTERA-2 clone D1細胞
hTERT-HME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-673細胞、OVCA-433細胞、Vero 76細胞
MPC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2OS細胞、PC-3M-2B4細胞、COR-L105細胞
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