"CAL-120 Adherent人乳腺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
CAL-120 Adherent人乳腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)實驗基本操作:①進無菌室前要徹底洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長,以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細胞,同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶,開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位,避免直立,以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話,咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時,應專管專用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去,以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應整理好工作臺面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面;防止細胞交叉污染:所有從別處轉來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細胞遺傳學方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變,可以復蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應由兩人獨立進行;無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比,的優(yōu)點是便宜,而且可以稀釋50倍用,而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一種廣譜滅菌劑菌,其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉,熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。
BCaP-37細胞系相關產(chǎn)品:HCT-FET細胞、High Five細胞、H22-H8D8細胞
NCM356細胞系相關產(chǎn)品:MDCK II細胞、REC1細胞、AK細胞
H661細胞系相關產(chǎn)品:ABC1細胞、BHK21細胞、TSUpr1細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HS-766-T細胞系相關產(chǎn)品:HuCCT-1細胞、COLO 394細胞、ONS-76細胞
3T6-Swiss albino細胞系相關產(chǎn)品:PC-9/S1細胞、STC-1細胞、G361細胞
CMECs細胞系相關產(chǎn)品:H-1573細胞、JHH2細胞、mREC細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
CAL-120 Adherent人乳腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
【凍存細胞操作】1)選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液,計數(shù),使細胞密度達5×10(7)/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑10%二甲基亞砜(DMSO) 或甘油,可使冰點降低,使細胞內(nèi)水分在凍結前透出細胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋好凍存管并仔細檢查,一定要蓋緊,做好標記;6)凍存:在特殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內(nèi),下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度,過快能影響細胞內(nèi)水分透出,太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套,以免液氮凍傷。【復蘇細胞操作】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,30~60s內(nèi)完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分,密度應達到10(7)/ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×10(5)/ml數(shù)量。
MEG01細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR4細胞、Hs706T細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞
KP2細胞系相關產(chǎn)品:Hs832.Tc細胞、PAa細胞、NRCC細胞
NPA細胞系相關產(chǎn)品:Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞
786O細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞
M-20細胞系相關產(chǎn)品:HCCC9810細胞、CAL148細胞、MUVEC細胞
U-2-OS細胞系相關產(chǎn)品:AM-38細胞、NCI-H2087細胞、SUM149-PT細胞
B16F10細胞系相關產(chǎn)品:CFPAC細胞、SupB15WT細胞、NB1RGB細胞
Ly19細胞系相關產(chǎn)品:CRFK細胞、SuperTube細胞、NB9細胞
McA-RH7777細胞系相關產(chǎn)品:H-1373細胞、SUM-149細胞、SMC-1細胞
PL 5細胞系相關產(chǎn)品:U 266細胞、HT144-mel細胞、D10.G4.1細胞
KP-4細胞系相關產(chǎn)品:ES-2細胞、IR983F細胞、P-19細胞
HFF-1細胞系相關產(chǎn)品:MHCC 97-L細胞、McARH7777細胞、HCC827細胞
NCIH1563細胞系相關產(chǎn)品:GM03570E細胞、COLO-738細胞、TOV112D細胞
CAL-120 Adherent人乳腺癌細胞系
HSC細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB435S細胞、AC29細胞、D407 RPE細胞
KM932細胞系相關產(chǎn)品:T-24細胞、Caco-2細胞、HRC-99細胞
PIG3細胞系相關產(chǎn)品:HT 29細胞、786-O RCC細胞、JURKAT E-61細胞
PIG3細胞系相關產(chǎn)品:HT 29細胞、786-O RCC細胞、JURKAT E-61細胞
SGC7901/DDP細胞系相關產(chǎn)品:MHCC 97-H細胞、SUM190PT細胞、Co-115細胞
Nb2細胞系相關產(chǎn)品:C-4I細胞、C32-mel細胞、U-251MG細胞
C8D1A細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1930細胞、HELA-GFP細胞、Dunn LM8細胞
MCF10A細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H647細胞、GP5d細胞、CV-1.K細胞
HCC-94細胞系相關產(chǎn)品:RPE D407細胞、8226/S細胞、H2081細胞
Danio rerio Gill細胞系相關產(chǎn)品:SKG-3a細胞、343MG細胞、FHs74Int細胞
639-V細胞系相關產(chǎn)品:PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞
PGBE1細胞系相關產(chǎn)品:Simpson細胞、Clone 15 HL-60細胞、C6661細胞
NP69SV40T細胞系相關產(chǎn)品:MC3T3E1細胞、HOEC細胞、MGHU1細胞
HEK-293H細胞系相關產(chǎn)品:SGC7901/DDP細胞、H1650_CO細胞、10T1/2細胞
RL95細胞系相關產(chǎn)品:MMVECs細胞、P30/0HK細胞、OCI/AML-2細胞
B10BR細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H838細胞、OVCA5細胞、IPEC-1細胞
SNU-601細胞系相關產(chǎn)品:NT2/D1細胞、PANC-03-27細胞、DSL-6A-C1細胞
MO59J細胞系相關產(chǎn)品:PIG3細胞、LICR-LON-HN6細胞、TE7細胞
H-838細胞系相關產(chǎn)品:CCLP-1細胞、ACC3細胞、IMR 90細胞
HPAF-II細胞系相關產(chǎn)品:Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞
KYSE-30細胞系相關產(chǎn)品:95-D細胞、NCTC929細胞、3T3 L1細胞
COLO-679細胞系相關產(chǎn)品:TE-6細胞、H283細胞、3T3-442A細胞
LI7細胞系相關產(chǎn)品:BxPC-3細胞、3T3 J2細胞、T173細胞
NCIH2110細胞系相關產(chǎn)品:CL1.0細胞、SK-N-BE(1)細胞、LA 4細胞
NCIH2052細胞系相關產(chǎn)品:G361mel細胞、A10細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞
HN 4細胞系相關產(chǎn)品:NTERA2細胞、EFM-192A細胞、NCI-H1915細胞
Hs-611-T細胞系相關產(chǎn)品:HCC-202細胞、H-1618細胞、Sol8細胞
SK-MEL-2細胞系相關產(chǎn)品:SNU638細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞、CCD 841 CoN細胞
NCI.H522細胞系相關產(chǎn)品:PG-4 (S+L-)細胞、GM03573A細胞、NS1-1 Ag4.1細胞
33604細胞系相關產(chǎn)品:KMS-18細胞、H-711細胞、U118細胞
OUMS-23細胞系相關產(chǎn)品:210RCY3-Ag1.2.3細胞、SF 763細胞、COLO206F細胞
A10細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL2細胞、alphaTC clone 6細胞、OV90細胞
TGBC11T細胞系相關產(chǎn)品:Co 205細胞、CLONE M3細胞、CMT167細胞
UMR-106細胞系相關產(chǎn)品:NK 10a細胞、T8細胞、HOS-TE85細胞
KOPN-8細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1954細胞、FRO 81-2細胞、SW 1088細胞
P3-X63Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品:PL-11細胞、RMS1598細胞、MUTZ-1細胞
Hs746T細胞系相關產(chǎn)品:CEMC1細胞、TE-6細胞、U-87細胞
RCC 7860細胞系相關產(chǎn)品:COLO-205細胞、WEHI231細胞、CAKI 2細胞
H-87細胞系相關產(chǎn)品:Panc813細胞、Karpas299細胞、ZR75-30細胞
Human Liver-7702細胞系相關產(chǎn)品:JiyoyeP-2003細胞、ATDC5細胞、LICR-HN-6細胞
CMT.64細胞系相關產(chǎn)品:Mv.1.Lu細胞、NCI-H2135細胞、Mel-RM細胞
CHO Lec1細胞系相關產(chǎn)品:Caco-2/BBe細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、A375S2細胞
CAL-120 Adherent人乳腺癌細胞系
P30/Ohkubo細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞
HFL1細胞系相關產(chǎn)品:MC3T3細胞、COLO-684細胞、SKO-007細胞
B16 melanoma細胞系相關產(chǎn)品:As-PC1細胞、End1/E6E7細胞、H889細胞
HUSMC細胞系相關產(chǎn)品:H-847細胞、Hep G2細胞、COLO 320F細胞
NCI-H1770細胞系相關產(chǎn)品:SKGIIIA細胞、HuH28細胞、TK.10細胞
SK-N-BE-2細胞系相關產(chǎn)品:ID8/MOSEC細胞、BpRc1細胞、SK-CO-1細胞
F9細胞系相關產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、NCI-H2052細胞、A-1847細胞
NCI-SNU-520細胞系相關產(chǎn)品:SUM-159細胞、H-2029細胞、NCIH1770細胞
ATDC-5細胞系相關產(chǎn)品:KMST-6細胞、OVCAR-3細胞、MBMEC細胞
P3.653細胞系相關產(chǎn)品:Ect1/E6E7細胞、HuP-T4細胞、High Five細胞
CT26細胞系相關產(chǎn)品:H-EMC-SS細胞、NCI-H510A細胞、H1650_CO細胞
NPA細胞系相關產(chǎn)品:Rabbit Kidney 13細胞、CCK-81細胞、SW 403細胞
"