"NGP Adherent人神經(jīng)母細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻,或者放入時搖勻,但在細胞貼壁前,又移動了培養(yǎng)瓶,頻繁開關(guān)培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會導(dǎo)致細胞生長不均勻。研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C 太久。一些懸浮細胞抱團生長是正?,F(xiàn)象,大部分懸浮細胞在細胞密度很高的情況下,很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象,聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細胞,因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制好細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團,可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團,也可以嘗試一下方法:將細胞懸液收集到15ml離心管中,靜置20min左右,小心取上層細胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細胞團)。部分細胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個是正?,F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡,則很可能是細胞狀態(tài)不佳,可以通過調(diào)整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時間等方法來調(diào)整細胞狀態(tài);如果大部分細胞出現(xiàn)空泡,且單個細胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多,則可能細胞代次較高,細胞老化所致,需更換代次較早的細胞。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NGP Adherent人神經(jīng)母細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法:傳代培養(yǎng):是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以1:2或1:2以上的比例轉(zhuǎn)移,接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞,可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代,部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代,或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟:①入無菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài),確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預(yù)熱;③超凈臺臺面應(yīng)整潔,用75%酒精棉球擦拭清潔;④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面20min左右,關(guān)閉紫外燈,打開風(fēng)機清潔空氣除去臭氧;⑤點燃酒精燈;取出無菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi);⑥將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上;⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每個大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶,小培養(yǎng)瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當(dāng)細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復(fù)吹打消化好的細胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋,適度擰緊后稍回轉(zhuǎn),以利于CO2的進入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱;⑩對懸浮培養(yǎng)細胞,步驟7-9不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
DHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KASUMI6細胞、C22細胞、LM(TK-)細胞
MPC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2OS細胞、SJSA細胞、HIT.T15細胞
CAL27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 231細胞、R.K.13細胞、TO175T細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HFT-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1155細胞、TJ905細胞、Capan2細胞
CAL-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mRMEC細胞、KYSE180細胞、HS766T細胞
OAC-P4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hut292細胞、Karpas 422細胞、AG06814-M細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
NGP Adherent人神經(jīng)母細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
傳代細胞培養(yǎng)注意事項:1)掌握好細胞消化的時間,消化時間過短時,細胞不宜從瓶壁脫落,過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷;2)掌握好消化濃度,當(dāng)消化液濃度過高時,消化時間應(yīng)縮短,過低時細胞消化時間相對延長。體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟:瘤細胞懸液接種1)無菌選取生長良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞;2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨,經(jīng)80~100目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液;3)培養(yǎng)細胞應(yīng)用PBS洗兩遍;4)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至10(7)~10(8)/ml;5)常規(guī)消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(0.1ml/部位,>10(6)細胞)。初次接種成功率低,細胞數(shù)盡可能多一些;6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間。腹水瘤的建立與腹水瘤的接種:將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤細胞,將這種腹水反復(fù)傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時,腹水常呈血性(含大量紅細胞),反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下:1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌,進行細胞計數(shù);2)消毒動物,左下腹穿刺接種1×10(6)腹水瘤細胞;3)接種腹水瘤細胞后約7-12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3-5ml;4)抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
Rat Lung-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-07e細胞、OCI Ly3細胞、Mv.1.Lu細胞
SUM-149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU 565細胞、LIM 1215細胞、HEYA8細胞
OCI/AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC94細胞、SKNFI細胞、HC11細胞
ME180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1-a細胞、L78細胞、Fetal Human Colon細胞
H-498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHRF細胞、SNU368細胞、COLO 320 DM細胞
SW-620細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L51細胞、CHO/dhFr-細胞、SW1088細胞
SW 780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞
H-889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞
NCI-H1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320HSR細胞、HHUA細胞、ST486細胞
Det. 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H19-7細胞、SNU620細胞、MES 13細胞
Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H128細胞、HASMC細胞、NCI-H1299細胞
SKMEL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞
AN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi 1細胞、alpha TC1 clone 6細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞
NGP Adherent人神經(jīng)母細胞系
TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:tdott細胞、NCIH208細胞、Hs 840.T細胞
ES-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-2細胞、GMK,BSC-1細胞、TOV-112細胞
HIBEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL1339細胞、DOK細胞、NG-108-15細胞
RMS 1598細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61.5.3細胞、JJN-3細胞、NCIH1693細胞
OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R 1610細胞、Lieming Xu-2細胞、VSC4.1細胞
H2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1437細胞、NCI-H1568細胞、SW 48細胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LPC-H12細胞、NCI-H1417細胞、Duke University 145細胞
NCI-H520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888T細胞、DC2.4細胞、HIEC-6細胞
A-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD 2細胞、IOSE 29細胞、ETCC-007細胞
NCI-H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HOS (TE85)細胞
NCI-UMC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-115細胞、H1623細胞、NK-92 MI細胞
NCI-H441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-366細胞、MN 60細胞、DITNC1細胞
Caco-2 BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞
NCI.H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1-B細胞、5-8F細胞、NCI H508細胞
CEMx721.174.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn5B1-4細胞、TE-13細胞、2BS細胞
Hs683細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-F細胞、LK 2細胞、Line 697細胞
MLM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1581細胞、NPA-87細胞、GM03320D細胞
NCI-H2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC-5細胞、OVCAR.4細胞、NTera2/D1細胞
ELD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP-1細胞、22Rv-1細胞、BT-483細胞
Vero 76 clone E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO 27細胞、HMCB細胞、PaTu-8988s細胞
RD-ES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC1細胞、H-810細胞、OCI-AML-4細胞
ROS17/28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Immortalized Human Hepatocytes細胞、MC57G細胞、IGROV-1細胞
NCI-SNU-475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-02-03細胞、Madison細胞、BHP-10細胞
MC3T3-E1 Subclone 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63/Ag8.653細胞、FLS細胞、DMS 53細胞
T173細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-G2/C3A細胞、GOS3細胞、SUNE-1細胞
NG-108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC-1 [Mouse lung]細胞、CL11細胞、BNL CL.2細胞
U-138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-20Y細胞、PC-9S1細胞、HFTF細胞
NOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、RPMI 1846細胞、DoHH2細胞
NCIH1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-2G細胞、LAN1細胞、KP-N-YN細胞
PC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LMTK-細胞、Sup T-1細胞、HOPC細胞
NIH-3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sup T-1細胞、B4G12細胞、RM1細胞
UACC893細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-841細胞、HEK-293FT細胞、CCRF-CEM/S細胞
Panc203細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCH細胞、HCASMC細胞、Human podocyte細胞
FAT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dunn LM8細胞、IPLB-SF 21AE細胞、H1650_CO細胞
H660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE5細胞、MC3T3-E1(C4)細胞、UPCI-SCC-90細胞
BE2M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞
HuH 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC812細胞、OE19細胞、NCI-SNU-601細胞
3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 361細胞、Panc 05.04細胞、PC-3M-2B4細胞
SKNBE(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0WT細胞、HEL細胞、MDCK-2細胞
Hs840T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-Tn5B14細胞、NCI H548細胞、HT-55細胞
PECAPJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT細胞、C518細胞、Hs611T細胞
DHL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IALM細胞、CALU 1細胞、GDM1細胞
NGP Adherent人神經(jīng)母細胞系
AM-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK52E細胞、EBNA-293細胞、HN-6細胞
HCT GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ISHI細胞、Rainbow Trout Embryo細胞、T_T_細胞
NCIH2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-62細胞、hTERT-HME-1細胞、SUDHL10細胞
MDA-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 (Clone 4)細胞、SK-RC-20細胞、F-36P細胞
BALB/c 3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVHUC細胞、SUM-159細胞、H-1573細胞
BGC-823細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa17C細胞、7404細胞、H-2106細胞
RD 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACCLM細胞、PANC-10-05細胞、COLO-HSR細胞
MM-1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞
HT clone H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AsPC-1細胞、KU-19-19細胞、NCI-H2081細胞
Hs888T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4 I細胞、SBC-5細胞、OCI-AML4細胞
HCT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 NS1 Ag4細胞、HRA19細胞、JM-1細胞
OCI/AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC94細胞、MN-60細胞、MES-SA細胞
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