"NCI-H292 Thawing人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
NCI-H292 Thawing人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長:貼壁
【細(xì)胞培養(yǎng)中細(xì)菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細(xì)菌:細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,根據(jù)感染細(xì)菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁變黃,對(duì)細(xì)胞生長影響明顯。仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時(shí)放氣時(shí)間足夠,壓力足夠!尤其是和儲(chǔ)存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲(chǔ)存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細(xì)胞仍可生長,但時(shí)間長之后,細(xì)胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),再把水盤里也加上飽和量的酸銅?;蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細(xì)胞暫時(shí)轉(zhuǎn)移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個(gè)小時(shí),使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細(xì)胞。孵箱應(yīng)定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預(yù)防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細(xì)胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補(bǔ),建議舍棄該污染細(xì)胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細(xì)胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個(gè)別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:3-1:8傳代;2-3天換液1次。
細(xì)胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗(yàn)詳解:1)收到細(xì)胞,首先要鏡檢:觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常,對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很好,觀察細(xì)胞密度,有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化,很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣,主要是貼壁牢固問題。比如293T,平時(shí)貼壁就不是很牢,在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,會(huì)發(fā)生大片的脫落,細(xì)胞聚集在一起,但是細(xì)胞生長還是正常的,通過離心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長。2)當(dāng)通過上一步的觀察,細(xì)胞初步?jīng)]有問題時(shí),進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí),則處理如下:棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基;或更換新鮮的培養(yǎng)基,置于培養(yǎng)箱中,隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長溫度情況下,會(huì)調(diào)整為靜止期,或者慢速生長期,恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右,才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長期的狀態(tài),在對(duì)數(shù)生長期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率,和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過90%,并且細(xì)胞狀態(tài)很好時(shí),則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長比較快,狀態(tài)穩(wěn)定,不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶;對(duì)于生長較慢,細(xì)胞比較薄,狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類型,一次少傳些,每瓶細(xì)胞密度大些,便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細(xì)胞,次處理也可以依照第二種情況。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H292 Thawing人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
我??吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法,這個(gè)挺有意思,我也是次聽說,應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法,很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近300株細(xì)胞里面,還沒遇到這么怪異的。比如Caco2其實(shí)是很好消化的細(xì)胞,不需要胰酶孵育即可,只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好,這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細(xì)胞的特性,是因?yàn)橘N壁過程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來越不好;比較難消化的細(xì)胞(潤洗方法5min還不能消化),就以colon cancer為例,比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過5min,即可見細(xì)胞成片移動(dòng),就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候,比如tsDC細(xì)胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ketr-3細(xì)胞、HAPI細(xì)胞、C-6細(xì)胞
hFOB1.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Helacyton gartleri細(xì)胞、IPLB-SF 21細(xì)胞、Ramos細(xì)胞
NCI-H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞、H820細(xì)胞、RA細(xì)胞
EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Okayama University Medical School-27細(xì)胞、H929細(xì)胞、SW480E細(xì)胞
HIMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-157細(xì)胞、2V6.11細(xì)胞、SCL-2細(xì)胞
SK MES 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.3細(xì)胞、D-283MED細(xì)胞、LNCaP C4-2細(xì)胞
H-2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WILL-2細(xì)胞、Y-79細(xì)胞、RN-c細(xì)胞
MH-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、PC12(高分化)細(xì)胞、KE39細(xì)胞
H650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K1細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞
SW-403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF-1a細(xì)胞、HSC5細(xì)胞、Lewis-Lung細(xì)胞
OCUM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-157細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞、HEK (AD293)細(xì)胞
LS-513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1792細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞
JVM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-L1 ad細(xì)胞、Caco-2 BBe細(xì)胞、SaOS-2細(xì)胞
AtT20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138MG細(xì)胞、HS-766T細(xì)胞、PA12細(xì)胞
Mel-RM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB436細(xì)胞、HN6細(xì)胞、A-204細(xì)胞
Namalva細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nakata-1細(xì)胞、MDA231-LM2細(xì)胞、HCC1419細(xì)胞
BC-3H-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H766T細(xì)胞、BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、MCA 205細(xì)胞
H-125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U937細(xì)胞、MV4II細(xì)胞、P388細(xì)胞
SCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Plaepi 34細(xì)胞、VM-CUB1細(xì)胞、BHT101細(xì)胞
Tn-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97H細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞、16-HBE細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFB細(xì)胞、PL-5細(xì)胞、MCF 7B細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFB細(xì)胞、PL-5細(xì)胞、MCF 7B細(xì)胞
PC10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIMVEC細(xì)胞、BNCL2細(xì)胞、NCI-H2106細(xì)胞
NRK49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN4741細(xì)胞、GM04678細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞
SK-N-BE(2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP8細(xì)胞、INS1E細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞
RPMI2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H747細(xì)胞、HEC-1-A細(xì)胞、HS688AT細(xì)胞
NCI-H292 Thawing人肺腺癌細(xì)胞系
MLM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1581細(xì)胞、NPA-87細(xì)胞、GM03320D細(xì)胞
P3JHR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMC7細(xì)胞、ECC-10細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞
LA-795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR 8383細(xì)胞、HTori 3細(xì)胞、DHL6細(xì)胞
SW 839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL 4細(xì)胞、TT細(xì)胞、FU-97細(xì)胞
FHL-124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL3細(xì)胞、SkChA-1細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞
CHO-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OPM-2細(xì)胞、NTera2 cl.D1細(xì)胞、KMB17細(xì)胞
WI 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-346細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞
SKG3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE29細(xì)胞、B-3細(xì)胞、SW-48細(xì)胞
H4-IIE-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 27細(xì)胞、Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞、Walker-Ca.256細(xì)胞
NCI-HUT-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2291細(xì)胞、H322T細(xì)胞、SUDHL4細(xì)胞
NG10815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30-OHK細(xì)胞、B78細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞
3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Me-Wo細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞、Line 207細(xì)胞
RAW264.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL 5細(xì)胞、U-266細(xì)胞、Panc02-H0細(xì)胞
T/GHA-VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-7901細(xì)胞、NCIH441細(xì)胞、KOSC2細(xì)胞
P560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT-78細(xì)胞、H889細(xì)胞、OVCAR-10細(xì)胞
VAESBJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ELD-1細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞
ML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HARA-B細(xì)胞、H-526細(xì)胞、SGC996細(xì)胞
PASMCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:138MG細(xì)胞、P3 88 D1細(xì)胞、DLD1細(xì)胞
HSF2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ssMCF-7細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞
EJ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL2細(xì)胞、OVCA 433細(xì)胞、SW-1463細(xì)胞
Sp2/O-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUVEC細(xì)胞、SJ-RH30細(xì)胞、H-87細(xì)胞
HVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML5細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞
CCD-19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh74細(xì)胞、Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、H358細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO-81細(xì)胞、A2058細(xì)胞、AdHek細(xì)胞
CAMA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-7702細(xì)胞、MX-1細(xì)胞、2V6.11細(xì)胞
MBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、alphaTC1 Clone 6細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞
Ca761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2170細(xì)胞、ST細(xì)胞、PTK 1細(xì)胞
NBL-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 812F細(xì)胞、M14細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞
SF-539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCCVII細(xì)胞、HCC4006細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞
L-M(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GB-1細(xì)胞、BALB/3T3細(xì)胞、KMM1細(xì)胞
NCIH28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJRH 30細(xì)胞、Tu 177細(xì)胞、3 LL細(xì)胞
H2.35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNT-229細(xì)胞、CCD1112Sk細(xì)胞、Karpas 299細(xì)胞
SNU-719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HcerEpic細(xì)胞、P36細(xì)胞、Sp2/0-Ag14細(xì)胞
NCI-H292 Thawing人肺腺癌細(xì)胞系
HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N1S1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞
HFLS-RA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Evsa-T細(xì)胞、J774 A.1細(xì)胞、RAW 264.7細(xì)胞
NCIH2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-382細(xì)胞、OVTOKO細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞
293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-34細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞、RBL-2H3細(xì)胞
MDA PCa 2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO357細(xì)胞、NCI-H78細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞
SSP-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH 3T3細(xì)胞、MDCK細(xì)胞、MCF10-A細(xì)胞
HO-8910 PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-40細(xì)胞、H-2227細(xì)胞、NCI-H345細(xì)胞
NCI-H1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 85.T細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞、RAG細(xì)胞
H1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HM細(xì)胞、C32 [Human melanoma]細(xì)胞、NCIH526細(xì)胞
COLO 679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAOV4細(xì)胞、BHK 21細(xì)胞、NCIH2066細(xì)胞
SK-N-BE(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ-521細(xì)胞、NOR-10細(xì)胞、RAMOS2G64C10細(xì)胞
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