"C2C12 Thawing小鼠成肌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞株是YaffeD,SaxelO建立的小鼠成肌細(xì)胞系的亞株。該細(xì)胞分化較快,可形成能收縮的微管,產(chǎn)生特異的肌肉蛋白。在骨形態(tài)形成蛋白(BMP-2)的作用下,該細(xì)胞可由成肌細(xì)胞分化為成骨細(xì)胞。檢測發(fā)現(xiàn)該細(xì)胞鼠痘病毒陰性。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
C2C12 Thawing小鼠成肌細(xì)胞系
細(xì)胞生長:貼壁
解凍細(xì)胞常見實驗問題分析及推薦解決方法:在解凍凍存細(xì)胞時,發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長緩慢等問題,究竟是什么原因?qū)е?,我們該怎么進行解決?以下是國內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對解凍細(xì)胞實驗問題,總結(jié)的一些解決方案!出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下:1)解凍過程中細(xì)胞裂解,推薦的解決方案:可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡,因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高,考慮到這一損失。起始濃度為1*10(6)至1*10(7)細(xì)胞/毫升;2)解凍過程中的問題,推薦的解決方案:在-70℃至-80℃下保存冷凍的培養(yǎng)物,保存時間為1-5天,但這不是保存的方法。在37℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng);3)對冷凍液過敏,推薦的解決方案:A.完全或部分更換培養(yǎng)基,減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在24小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時細(xì)胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物,取決于冷凍時細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期;4)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡,推薦的解決方案:解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長,存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時間和方法。在冷凍時細(xì)胞應(yīng)處于對數(shù)期。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
預(yù)防細(xì)胞污染的注意事項:實驗進行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi);實驗用品用完應(yīng)移出超凈臺,以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細(xì)胞;即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細(xì)胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應(yīng)立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應(yīng)1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水(應(yīng)每周更換),待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細(xì)胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
C2C12 Thawing小鼠成肌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問題,見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié),這里說一些我個人的經(jīng)驗,因為一些比較特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過近300種細(xì)胞,常用于做實驗的,累積有百余種,可以說遇到過許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開始做我的篇專題,并不是因為細(xì)胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個話題,我就拋磚引玉,下面幾點拙見,可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入,僅供大家參考。許多同學(xué)對細(xì)胞消化做了許多研究,得出了很多有價值的經(jīng)驗,也見到很多人的困惑。其實細(xì)胞培養(yǎng),尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結(jié)經(jīng)驗,就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細(xì)節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識,如果不對之處,歡迎指正,總結(jié)下來,細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要),關(guān)鍵所在是細(xì)胞來源,血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問題,很多時候bottleneck沒有找到,雖然通過其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作,總覺得自己沒有經(jīng)驗,而忽視試劑,溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量,后者其實才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
細(xì)胞形態(tài)特性:成纖維細(xì)胞樣;梭形
Karpas 422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00059細(xì)胞、NS-1細(xì)胞、TC7細(xì)胞
HCT 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS42細(xì)胞、P-388D1細(xì)胞、WEHI 231細(xì)胞
CNE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT15細(xì)胞、RMC-1細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞
L 363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 3B細(xì)胞、MDCK.2細(xì)胞、LU451細(xì)胞
Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRCC細(xì)胞、TE-1細(xì)胞、S.B.細(xì)胞
H-1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo699細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SK-N-AS細(xì)胞
BTI-TN5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HASMC細(xì)胞、NTera 2/cl.D1細(xì)胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞
GM03570E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-2細(xì)胞、WM-239A細(xì)胞、Lu-165細(xì)胞
NCIH1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG-1細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞、NCIH1792細(xì)胞
BN-CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1271細(xì)胞、OCI/AML-4細(xì)胞、Calu-3細(xì)胞
Porcine Kidney-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801C細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞
HTR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH2細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞
PC-3/M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:184A1細(xì)胞、NCM356細(xì)胞、H1155細(xì)胞
Tu-177細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUG-Chor1細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞、WM2664細(xì)胞
HFT8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV 3細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞
LS-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO678細(xì)胞、Institute for Medical Research-90細(xì)胞、SiHa細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:95D細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞、UACC812細(xì)胞
HPB-ALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca 109細(xì)胞、H3396細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞
CHP 126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-23細(xì)胞、OVCAR.3細(xì)胞、Cates-1B細(xì)胞
Karpas-299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCM細(xì)胞、SHIN-3細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞
TFK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1A細(xì)胞、MES-SA-Dx5細(xì)胞、MDA PCa 2b細(xì)胞
TFK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1A細(xì)胞、MES-SA-Dx5細(xì)胞、MDA PCa 2b細(xì)胞
H510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-1細(xì)胞、BEL7404細(xì)胞、IMR-90細(xì)胞
Microbiological Associates-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR1K細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞、LN 382細(xì)胞
UMUC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388D1細(xì)胞、Psi-2 DAP細(xì)胞、MOLT 16細(xì)胞
C32r細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19細(xì)胞、HEI193細(xì)胞、SF763細(xì)胞
C2C12 Thawing小鼠成肌細(xì)胞系
NK-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPMY1細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞
Hs 578.Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2107細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞、HL-60細(xì)胞
U-CH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL33細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞、CT26WT細(xì)胞
H1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T47D:A細(xì)胞、TE354.T細(xì)胞、H-1666細(xì)胞
SK-MEL-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL 60細(xì)胞、EM-3細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞
SK-MES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:624-mel細(xì)胞、BBE細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞
ND7/23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BA/F3細(xì)胞、LN229細(xì)胞、P3X63 Ag8細(xì)胞
SCaBER細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7703細(xì)胞、RGC6細(xì)胞、L 428細(xì)胞
PTK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞、SKRC-42細(xì)胞、SHI-1細(xì)胞
NCI747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N87細(xì)胞、KYSE0520細(xì)胞、NCI-H735細(xì)胞
HuH28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH4細(xì)胞、LS 513細(xì)胞、PTK-2細(xì)胞
DMS 153細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs852T細(xì)胞、CHO細(xì)胞、T/G HA VSMC細(xì)胞
SUM-190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1355細(xì)胞、FL62891細(xì)胞、Oka-C1細(xì)胞
HEK 293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR 146細(xì)胞、Chang liver細(xì)胞、RPMI No. 1846細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞
NCIH1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H774細(xì)胞、BAR-T細(xì)胞、OVTOKO細(xì)胞
HGF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAN 02細(xì)胞、SNU-869細(xì)胞、JIMT-1細(xì)胞
Pt K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly18細(xì)胞、PZ-HPV-7細(xì)胞、H2452細(xì)胞
MBT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9/GR細(xì)胞、M-14細(xì)胞、MHCC97H細(xì)胞
OCI-Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T84細(xì)胞、K-1735細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞
ML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA細(xì)胞、H2452細(xì)胞、NCIH508細(xì)胞
ONS-76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3D4/21細(xì)胞、SC細(xì)胞、KRC Y細(xì)胞
NeHepLxHT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C2A細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞、SNU449細(xì)胞
SKNBE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKOV-433細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞、JS1細(xì)胞
PC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-69細(xì)胞、NCIH2591細(xì)胞、P3X63NS1細(xì)胞
NCIH889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS180細(xì)胞、SK-HEP-1細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞
CL34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuP-T4細(xì)胞、RCCJF細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞
Hs940.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 HEK細(xì)胞、UMNSAH-DF 1細(xì)胞、IGROV細(xì)胞
RMa-bm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26WT細(xì)胞、HEL-92.1.7細(xì)胞、HCC2218細(xì)胞
CEMC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDLF細(xì)胞、Jijoye細(xì)胞、H.Ep. #2細(xì)胞
EL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHDF細(xì)胞、16HBE14o-細(xì)胞、MHCC-97細(xì)胞
IEC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AdHek細(xì)胞、OCI-LY-7細(xì)胞、Hs 839.T細(xì)胞
MCF-7/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 62細(xì)胞、CRFK細(xì)胞、SCC9細(xì)胞
C2C12 Thawing小鼠成肌細(xì)胞系
RD-ES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC1細(xì)胞、H-810細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞
OCIAML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DF1細(xì)胞、Hk-2細(xì)胞、GM00637I細(xì)胞
HS 445T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA.MB.435細(xì)胞、PK15細(xì)胞、L-cells細(xì)胞
HT-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 70細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、Walker 256細(xì)胞
CCRF.CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML2細(xì)胞、SUDHL-16細(xì)胞、Hs 688(A).T細(xì)胞
LNCaP subline C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss3T3細(xì)胞、SK_HEP1細(xì)胞、CHO/dhFr-細(xì)胞
HuP-T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN-6細(xì)胞、OCI/AML-2細(xì)胞、EL4細(xì)胞
95C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT474細(xì)胞、Lu-99A細(xì)胞、UO.31細(xì)胞
RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL細(xì)胞、LTEP a2細(xì)胞、SK-MES細(xì)胞
NPC-TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-OV-3細(xì)胞、V79-4細(xì)胞、BLO11細(xì)胞
SUDHL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly19細(xì)胞、N1E115細(xì)胞、GM05887細(xì)胞
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