"MG-63 Thawing人成骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞源自１４歲患有骨肉瘤的白人男性；聚次黃嘌呤核苷-聚胞嘧啶核苷酸、和D可以誘導(dǎo)產(chǎn)生高水平的干擾素。該細(xì)胞表達(dá)TGF-β受體Ⅰ和Ⅱ。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
MG-63 Thawing人成骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細(xì)胞懸液接種】１)無(wú)菌選取生長(zhǎng)良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長(zhǎng)期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長(zhǎng)的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的時(shí)間。【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí)，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；２)消毒動(dòng)物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號(hào)針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：４-１：８?jìng)鞔?；每周換液２-３次。
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到最低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
MG-63 Thawing人成骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，這里說一些我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)，因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細(xì)胞，常用于做實(shí)驗(yàn)的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開始做我的篇專題，并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個(gè)話題，我就拋磚引玉，下面幾點(diǎn)拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對(duì)細(xì)胞消化做了許多研究，得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn)，也見到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng)，尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細(xì)節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識(shí)，如果不對(duì)之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細(xì)胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問題，很多時(shí)候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮?，總覺得自己沒有經(jīng)驗(yàn)，而忽視試劑，溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量，后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見的問題。
細(xì)胞形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞
GM04680細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL11細(xì)胞、KYSE270細(xì)胞、WSU-HN13細(xì)胞
SK UT 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU216細(xì)胞、HD11細(xì)胞、MN60細(xì)胞
CAL 12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-TE85細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞
HT 144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE1-LUC細(xì)胞、UMC-11細(xì)胞、PC-9細(xì)胞
MV(4;11)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC12(高分化)細(xì)胞、WISH細(xì)胞、451-LU細(xì)胞
MuM-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG細(xì)胞、KYSE 70細(xì)胞、CL34細(xì)胞
CAL-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mRMEC細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞、HS766T細(xì)胞
SupB15WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1944細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞、ME 180細(xì)胞
DMS 79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y Parental細(xì)胞、Cates-1B細(xì)胞、HN6細(xì)胞
PA-TU-8988S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2286細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞、MDA1386細(xì)胞
HEK-AD 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H184A1細(xì)胞、M059K細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞
MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：451-LU細(xì)胞、JEG-3細(xì)胞、Panc 08.13細(xì)胞
U138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ-1細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞
rRMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC-8細(xì)胞、751-NA細(xì)胞、U 937細(xì)胞
NCI-H-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-8細(xì)胞、NCI-H295細(xì)胞、H1993細(xì)胞
NIE 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10-BL6細(xì)胞、H-2444細(xì)胞、HPAF細(xì)胞
hTERT RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8226細(xì)胞、MHCC97-H細(xì)胞、H-2108細(xì)胞
Hs840T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTI-Tn5B14細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞、HT-55細(xì)胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1088細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞、HAEC細(xì)胞
PA-TU-8988S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2286細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞、MDA1386細(xì)胞
NCIH2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KS-SLK細(xì)胞、Mouse Colon 38細(xì)胞、Meat Animal Research Center-145細(xì)胞
NCIH2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KS-SLK細(xì)胞、Mouse Colon 38細(xì)胞、Meat Animal Research Center-145細(xì)胞
201T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞、KALS-1細(xì)胞、MDBK (NBL-1)細(xì)胞
WEHI231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-HN6細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞、VMRC-RCZ細(xì)胞
Calu 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN6細(xì)胞、H220細(xì)胞、K299細(xì)胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEH2細(xì)胞、CA46細(xì)胞、B95-8細(xì)胞
MG-63 Thawing人成骨肉瘤細(xì)胞系
MCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-36細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞、MFE280細(xì)胞
HBE 135-E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SaOS細(xì)胞、HPAEpiC細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞
4T1.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG-44細(xì)胞、143 B細(xì)胞、Colon26細(xì)胞
CATH.a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC 12細(xì)胞、NCIADRRES細(xì)胞、SUP-M2細(xì)胞
MES-SA/Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Glioma-261細(xì)胞、B16-F1細(xì)胞、HANK1細(xì)胞
H1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2171細(xì)胞、PLB-985細(xì)胞、HCCLM6細(xì)胞
ZR-75-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC-1/original細(xì)胞、SiHa細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞
PE/CA-PJ-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-OV-433細(xì)胞、SUM52細(xì)胞、S-16細(xì)胞
LS 174 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WILL2細(xì)胞、HepG2-luc細(xì)胞、MPP89細(xì)胞
HN4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA4細(xì)胞、MDA361細(xì)胞、H-1618細(xì)胞
MDBK (NBL-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H378細(xì)胞、RIN-m細(xì)胞、COR-L23/P細(xì)胞
H735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 934.T細(xì)胞、IPLB-Sf21AE細(xì)胞、CAL 12細(xì)胞
MX-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFE-145細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞、N-2a細(xì)胞
SW48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2452細(xì)胞、LAN5細(xì)胞、RS4:11細(xì)胞
Liver-02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-4細(xì)胞、GM00637F細(xì)胞、Ca-Ski細(xì)胞
MES13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FTC-133細(xì)胞、COLO201細(xì)胞、A-2780細(xì)胞
RMS 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1793細(xì)胞、EBC1細(xì)胞、LC-1Sq細(xì)胞
293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞、H-2066細(xì)胞、LADMAC細(xì)胞
NCIH1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 1034細(xì)胞、IEC18細(xì)胞、Opossum Kidney細(xì)胞
HFE-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VSMC細(xì)胞、H1876細(xì)胞、T 84細(xì)胞
Tb1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CPA47細(xì)胞、H-1869細(xì)胞、L363細(xì)胞
184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2_1-7細(xì)胞、BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞、RK13細(xì)胞
MiaPaca.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGHU1細(xì)胞、L-428細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞
MPP-89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adeno-293細(xì)胞、COLO 738細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞
OCI-LY-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/2.8細(xì)胞、MCA38細(xì)胞、HCC-9724細(xì)胞
MC-116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC3細(xì)胞、NPA87-1細(xì)胞、H-510細(xì)胞
OAW 42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMG-I細(xì)胞、ME-180細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞
SCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNCL-2細(xì)胞、LNCaP subline C4-2細(xì)胞、PIG3細(xì)胞
Hs-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2細(xì)胞、NTERA2-D1細(xì)胞、SNU5細(xì)胞
MDA-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS(TE85)細(xì)胞、MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞、OC 316細(xì)胞
ACHN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV 29細(xì)胞、BrCL18細(xì)胞、MDA-MB-468細(xì)胞
4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR433細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞
TGBC-11-TKB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI7951細(xì)胞、J82 COT細(xì)胞、LC-1 sq細(xì)胞
MG-63 Thawing人成骨肉瘤細(xì)胞系
NCI-H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-5細(xì)胞、NCI-H2009細(xì)胞、KPL4細(xì)胞
H-EMC-SS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-40細(xì)胞、HS 683T細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFHIOSE-29細(xì)胞、A 2058細(xì)胞、H-2347細(xì)胞
CORL105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-29細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞、MDA-MB 361細(xì)胞
95-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 870 Emory University-4細(xì)胞、SHP77細(xì)胞、SCI1細(xì)胞
SKOV-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1703細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞、MC-26細(xì)胞
H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo16細(xì)胞、BRL 3A細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞
Anip[973]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL6細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞
Wien-133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-322細(xì)胞、NL20細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞
SW-527細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293E細(xì)胞、Capan-1細(xì)胞、PASMCS細(xì)胞
C26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS123細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞、H9c2細(xì)胞
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