"WM266-4 cell line人黑素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良好，當補液時，需避免反復(fù)吹打。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
WM266-4 cell line人黑素瘤細胞系
細胞傳代注意事項：①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材；②每天觀察細胞形態(tài)，掌握好細胞是否健康的標準：健康細胞的形態(tài)飽滿，折光性好，生長致密時即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細胞有污染跡象，應(yīng)立即采取措施，一般應(yīng)棄置污染的細胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持：細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現(xiàn)。對每一個細胞系來說都有其自身的特點，要做好建系的維持必須記錄好細胞檔案,換液傳代和做好細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
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細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
U-CH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL33細胞、Rin-M-5F細胞、CT26WT細胞
A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞
MESSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M109細胞、KYSE-70細胞、L1210細胞
H-EMC-SS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-40細胞、HS 683T細胞、U-373 MG細胞
U251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AO細胞、Cattle chondrocytes細胞、MCF10A細胞
COLO678細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30 OHK細胞、PANC403細胞、H9細胞
Tb 1 Lu (NBL-12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM-5A細胞、SU-DHL-2細胞、RASMCs細胞
H-1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-64細胞、L02細胞、PA-TU S細胞
CNE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT15細胞、RMC-1細胞、MDA-330細胞
MNNG-HOS (Cl#5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31-FUJ細胞、HCGC細胞、Hi-5細胞
NPC-TW-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB231細胞、OV433細胞、LWnt3A細胞
CAL 85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、HIBEpiC細胞、SCC-7細胞
Ramos 2G6.4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSI/1-Ag4-1細胞、Hx147細胞、no.11細胞
WM266-4 cell line人黑素瘤細胞系
HC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM6細胞、HEC-251細胞、NUGC4細胞
K299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL34細胞、H-2347細胞、NK-92細胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs600T細胞、NCI-SNU-182細胞、NRK clone 52E細胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs600T細胞、NCI-SNU-182細胞、NRK clone 52E細胞
NCIH2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞
Hs-852-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343MG細胞、H-295R細胞、ACC2細胞
HEK 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266細胞、PaTu8988s細胞、LN382細胞
RPMI-6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG3A細胞、MC-116細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞
NCIH196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YES 2細胞、AZ521細胞、ZR75-1細胞
HEK 293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ESC-410細胞、LC-1/sq細胞、RGC5細胞
SW 48細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCe-8693細胞、MFHL-2細胞、Detroit-562細胞
H341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MTEC1細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、MDAMB435細胞
H1666_DA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞
SU.86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D6P2T細胞、U031細胞、IMR90細胞
C166細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、NCI-SNU-601細胞、NCI-H847細胞
NCIH1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H774細胞、BAR-T細胞、OVTOKO細胞
IM-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-204細胞、AMJ2-C8細胞、JB6 Cl 30-7b細胞
OE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3.1細胞、CTLA4Ig-24細胞、JM-1細胞
Ra No. 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 852.T細胞、Li-7細胞、TCC-SUP細胞
PC-3M-1E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-4細胞、ARH 77細胞、QBI-293A細胞
M210B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-20細胞、NCIH358細胞、H-920細胞
C3H/10T1/2-clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSF細胞、SW-962細胞、NSC-34細胞
RAW264細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TYK-nu細胞、CD18細胞、HIEC6細胞
FDC-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞
HCC2157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR-32細胞、Panc10.05細胞、OV433細胞
OSRC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GL261細胞、Hep 3B2.1-7細胞、CA-OV-3細胞
GalK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、HEB細胞、WiDr細胞
C8166-CD4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRCY細胞、CAL 27細胞、SMMC 7721細胞
Hs 27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-13細胞、A101D細胞、HEP-3B2細胞
Hs 683細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RDES細胞、Hs606細胞、HuH-6細胞
SN12CPM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40-HCEC細胞、COLO 320HSR細胞、Hs-274-T細胞
BEL-7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CO115細胞、RPMI.8226細胞、High5細胞
OCI/AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hRMECs細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、PC.3細胞
AZ521細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6 Swiss Albino細胞、X63Ag8-653細胞、Uhth-74細胞
CHO-ori細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL 62891細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞、HCASMC細胞
HIT-T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞
CCD 966 SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780 CP70細胞、149PT細胞、BE2-C細胞
PL-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-29細胞、NCIH508細胞、NPC-039細胞
OCIAML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leukemia 1210細胞、HS-294細胞、HEL-92-1-7細胞
U-87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAC細胞、L-6TG細胞、ST 486細胞
MDA-MB-435S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs_578t細胞、EoL-1 cell細胞、G402細胞
786O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞
HANK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJAB-1細胞、HCT/FU細胞、SUP-B1細胞
WM266-4 cell line人黑素瘤細胞系
PT-K75細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM5細胞、NCIH548細胞、HMVEC細胞
NCIH2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-865細胞、SHG 44細胞、143TK-細胞
CT 26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI/ADR-RES細胞、CMT 64細胞、GM-346細胞
H-209細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J-BV細胞、UCLA RO-81A-1細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞
ME-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL-6細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、HCC-4006細胞
UO-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Kidney-2細胞、GM637A細胞、LM8細胞
MESSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M109細胞、4-1st細胞、HL-60 Clone 15細胞
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