"NCI-H1563 Thawing人胚肺細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NCI-H1563 Thawing人胚肺細胞系
細胞生長：貼壁
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結果。１)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風機不能過大，風機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３-１：４傳代；每周換液２次。
細胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細胞生物學實驗，細胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細胞懸液，沿孔壁（稍離開一點孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強或次數(shù)太多會導致細胞集中成堆，將板順時針旋轉（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板好掌握，效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細胞以后(比如傳代好/分好細胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復延X軸Y軸分別水平搖動3次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI-H1563 Thawing人胚肺細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗總結，這里說一些我個人的經(jīng)驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結的一些經(jīng)驗有點出入，僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結經(jīng)驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結下來，細胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關鍵所在(雖然很重要)，關鍵所在是細胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經(jīng)驗，而忽視試劑，溶液尤其是細胞的質(zhì)量，后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
Caki-2細胞系相關產(chǎn)品：SK-Mel 1細胞、B16-F10-BL6細胞、MPVECs細胞
NCI-H2342細胞系相關產(chǎn)品：174xCEM.T2細胞、NCIH889細胞、hEEC細胞
MFE-280細胞系相關產(chǎn)品：HSAS3細胞、JB6Cl30細胞、L- cell細胞
SK-ML2細胞系相關產(chǎn)品：COR L279細胞、Sp2/0-Ag14細胞、J 111細胞
A2780/CP細胞系相關產(chǎn)品：HGC-27細胞、Hs-746T細胞、SNU-601細胞
KP-N-NS細胞系相關產(chǎn)品：CV 1細胞、NTERA-2cl.D1細胞、OVCAR420細胞
MCA205細胞系相關產(chǎn)品：JB-6細胞、COLO 320DM細胞、293c18細胞
D341Med細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2405細胞、U20S細胞、MDA-MB-157細胞
CD-18細胞系相關產(chǎn)品：B16 melanoma F10細胞、NCIH1573細胞、RAEC細胞
BI-Mel細胞系相關產(chǎn)品：KHYG-1細胞、SkChA1細胞、SW.620細胞
hTERT-HME1細胞系相關產(chǎn)品：A-673細胞、COLO 320 HSR細胞、NL-20細胞
DLD 1細胞系相關產(chǎn)品：PC-3細胞、MCF-12A細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞
639 V細胞系相關產(chǎn)品：CD18細胞、V-79-4細胞、FCCH1024細胞
NL-20細胞系相關產(chǎn)品：RERF-LC-MS細胞、9L細胞、Hs832.Tc細胞
Human Microglia Clone 3細胞系相關產(chǎn)品：HCC2108細胞、MM1-S細胞、C4-I細胞
S-16細胞系相關產(chǎn)品：Hs578Bst細胞、BC3H1細胞、H929細胞
Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關產(chǎn)品：HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞
SW1463細胞系相關產(chǎn)品：H69細胞、SF539細胞、TE1細胞
HONE-1細胞系相關產(chǎn)品：PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞
RPMI 1846細胞系相關產(chǎn)品：AMC-HN8細胞、CMT64細胞、TE85細胞
QBC-939細胞系相關產(chǎn)品：RC13細胞、TSUpr1細胞、P31/Fujioka細胞
QBC-939細胞系相關產(chǎn)品：RC13細胞、TSUpr1細胞、P31/Fujioka細胞
MDA-MB-175-VII細胞系相關產(chǎn)品：SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞
Wien133細胞系相關產(chǎn)品：CHL-CL-11細胞、BALL1細胞、LTEP-a2細胞
EHEB細胞系相關產(chǎn)品：KYSE-270細胞、SK-N-DZ細胞、Rh30細胞
CL 1-5細胞系相關產(chǎn)品：PANC-1細胞、H-1563細胞、IBMF-7細胞
NCI-H1563 Thawing人胚肺細胞系
RC-2細胞系相關產(chǎn)品：HR-1細胞、HPDE細胞、OKT3細胞
AM細胞系相關產(chǎn)品：HFLS-RA細胞、GLC-15細胞、HO1N1細胞
MMQ細胞系相關產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 2細胞、PANC0504細胞、EBTr (NBL-4)細胞
SKCO-1細胞系相關產(chǎn)品：FAT細胞、EU-3細胞、293GP細胞
IPEC1細胞系相關產(chǎn)品：SKNBE2C細胞、hFOB細胞、Mel526細胞
RAW-264.7細胞系相關產(chǎn)品：HCC1937細胞、G361細胞、NCIH2029細胞
MLA 144細胞系相關產(chǎn)品：ATDC-5細胞、CAL 51細胞、NCI-H1650細胞
293-GP細胞系相關產(chǎn)品：SHG 44細胞、SKES1細胞、Panc2.03細胞
293FT細胞系相關產(chǎn)品：Panc327細胞、BC3 H1細胞、C4-2 B細胞
NOMO-1細胞系相關產(chǎn)品：786-O細胞、CII細胞、HEK293T/17細胞
IOSE-29細胞系相關產(chǎn)品：LTEP-a-2細胞、SNU-C2B細胞、MAntle cell VERona-1細胞
SKLU01細胞系相關產(chǎn)品：WM 239細胞、MM-1S細胞、ATDC-5細胞
DMS 53細胞系相關產(chǎn)品：CCRF-CEM C7細胞、VB細胞、Eca 109細胞
Human Hepatocyte Line 5細胞系相關產(chǎn)品：COLO206F細胞、NB.4細胞、Huh7.5細胞
BIC-1細胞系相關產(chǎn)品：BALB/c 3T3 clone A31細胞、SW-756細胞、ONS76細胞
MCA205細胞系相關產(chǎn)品：JB-6細胞、COLO 320DM細胞、293c18細胞
CAMA-1細胞系相關產(chǎn)品：Human Microglia Clone 3細胞、PC3M-IE8細胞、WERI細胞
LAPC4細胞系相關產(chǎn)品：EVSAT細胞、SNU886細胞、Bovine ENDometrial cells細胞
LN 382細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-FI細胞、T98G細胞、HuNS1細胞
CCC-HSF-1細胞系相關產(chǎn)品：McArdle RH-7777細胞、UMNSAH-DF-1細胞、2780細胞
Y3M細胞系相關產(chǎn)品：HCCLM3細胞、DiFi細胞、DHL8細胞
SK-N-FI細胞系相關產(chǎn)品：Tb 1 Lu細胞、P3/X63/Ag8細胞、MCF 10A細胞
CO115細胞系相關產(chǎn)品：SK.MEL.5細胞、PECAPJ34細胞、MADB-106細胞
CCD18Co細胞系相關產(chǎn)品：HLE B-3細胞、NCI-H1385細胞、HBL 100細胞
IPEC1細胞系相關產(chǎn)品：SKNBE2C細胞、hFOB細胞、Mel526細胞
NCI-H740細胞系相關產(chǎn)品：LA-N-6細胞、AM細胞、Panc_08_13細胞
CCD 966 SK細胞系相關產(chǎn)品：A2780 CP70細胞、149PT細胞、BE2-C細胞
Panc 02細胞系相關產(chǎn)品：T47-D細胞、Hs675T細胞、Pan02細胞
AG06814-J細胞系相關產(chǎn)品：BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞
138 MG細胞系相關產(chǎn)品：HCC-9724細胞、A-204細胞、C2BBe1細胞
MCF-12A細胞系相關產(chǎn)品：LSC-1細胞、SKHEP-1細胞、EB-2細胞
B16-F10細胞系相關產(chǎn)品：Sp2/mIL-6細胞、HEK293-A細胞、EU-4細胞
HRMC細胞系相關產(chǎn)品：Institute for Medical Research-90細胞、3T3-Swiss細胞、Hs852T細胞
NCI-H1563 Thawing人胚肺細胞系
CEK細胞系相關產(chǎn)品：BEAS 2B細胞、HS 445T細胞、Calu-1細胞
PC-9/GR細胞系相關產(chǎn)品：PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞
G402細胞系相關產(chǎn)品：MOLP2細胞、TE353.SK細胞、PANC403細胞
RC-2細胞系相關產(chǎn)品：HR-1細胞、HPDE細胞、OKT3細胞
PC-9/S1細胞系相關產(chǎn)品：SU86-86細胞、H-498細胞、D407細胞
NCI-H2122細胞系相關產(chǎn)品：R1610細胞、U-CH1細胞、HFL1細胞
MDA435細胞系相關產(chǎn)品：NUGC-3細胞、MFE280細胞、JEG3細胞
LS 123細胞系相關產(chǎn)品：LS1034細胞、GRSL細胞、YTMLC-90細胞
Bac 1.2F5細胞系相關產(chǎn)品：130-T細胞、K422細胞、NTERA-2cl.D1細胞
HLE-SRA-01/04細胞系相關產(chǎn)品：Panc2.03細胞、CEMC7細胞、NTera 2細胞
RIN-m 14B細胞系相關產(chǎn)品：SW-1783細胞、SHG44細胞、SupB15W細胞
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