"NCI-H647 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
NCI-H647 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
細胞生長:貼壁
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結】細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據(jù)感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質,37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質,鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內,再把水盤里也加上飽和量的酸銅。或者在培養(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內一個小時,使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細胞。孵箱應定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:3-1:6傳代;每周換液2次。
懸浮細胞不容易轉染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉染,其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑,脂質體轉染是基于電荷吸引原理,先形成脂質體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內吞作用,將目的基因導入細胞內,而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率,可以使用非脂質體的轉染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉染方法,針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI-H647 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
常規(guī)的細胞實驗(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗,比如病毒包裝,對細胞代數(shù),對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候,胰酶消化,就是潤洗,都會對細胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關酶的活性,來使得細胞脫離基質附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細胞,添加多一些EDTA,就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果10min還消化不徹底的話),而應該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學問可以講,對于一些難消化細胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞,不需要配制如此溶液。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
MIA Paca2細胞系相關產(chǎn)品:HUT-28細胞、rRTEC細胞、BL2141細胞
NCIH526細胞系相關產(chǎn)品:Panc8.13細胞、WERI Rb-1細胞、ATC241細胞
KTCTL140細胞系相關產(chǎn)品:H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞
H1793細胞系相關產(chǎn)品:TGW-nu-1細胞、SVEC 4-10細胞、SK Mel 1細胞
G-402細胞系相關產(chǎn)品:FU-MMT-1細胞、NCI-H2141細胞、MGH-U1 (EJ)細胞
NCI-SNU-C2A細胞系相關產(chǎn)品:SU 86.86細胞、TE4細胞、TE4細胞
WEHI 164 TC細胞系相關產(chǎn)品:Hs683T細胞、OVCA 432細胞、MARC 145細胞
NCI-HUT-125細胞系相關產(chǎn)品:Ramos.2G6.4C10細胞、Jurkat E6細胞、C33細胞
End1/E6E7細胞系相關產(chǎn)品:Vero E6細胞、HECCL-1細胞、H1869細胞
KLM1細胞系相關產(chǎn)品:EU-4細胞、ESC-410細胞、NCIH2110細胞
Kelly細胞系相關產(chǎn)品:OSC19細胞、CHL-IU細胞、CCD-1095Sk細胞
IGROV1細胞系相關產(chǎn)品:NCI.H226細胞、GH3細胞、SW982細胞
HO-8910細胞系相關產(chǎn)品:H2081細胞、LA-795細胞、SUM159PT細胞
VP229細胞系相關產(chǎn)品:SW-1222細胞、HUT 226細胞、OCM-1A細胞
X63Ag8-653細胞系相關產(chǎn)品:HCMEC(BL12-H)細胞、F-36P細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞
He La細胞系相關產(chǎn)品:C81-61細胞、H-226細胞、NS1-Ag 4/1細胞
HL-7702細胞系相關產(chǎn)品:Ly3細胞、H508細胞、BPH1細胞
H-2052細胞系相關產(chǎn)品:SUM149-PT細胞、SCL II細胞、Hs 863.T細胞
HCC38細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2171細胞、Hs 766.T細胞、MGC803細胞
H1238細胞系相關產(chǎn)品:Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、PC-3M-IE8細胞、A549-Taxol細胞
HS940細胞系相關產(chǎn)品:Panc_02_03細胞、Anip-973細胞、A-9細胞
HS940細胞系相關產(chǎn)品:Panc_02_03細胞、Anip-973細胞、A-9細胞
Hep3B細胞系相關產(chǎn)品:P3J-HR-1細胞、OCI-AML3細胞、IPI-2I細胞
WiDr-TC細胞系相關產(chǎn)品:Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、SUM-190PT細胞、WIL2 Secreting細胞
NCIH1915細胞系相關產(chǎn)品:SW260細胞、293細胞、MDA 435細胞
U-138 MG細胞系相關產(chǎn)品:NCIH196細胞、A549/DDP細胞、VMRCRCZ細胞
NCI-H647 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
NCI H69細胞系相關產(chǎn)品:SU.86.86細胞、CAL51細胞、SNU-387細胞
CA46細胞系相關產(chǎn)品:H-69細胞、C22 (Clara)細胞、Kasumi-6細胞
H1666_DA細胞系相關產(chǎn)品:RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞
Hs.27細胞系相關產(chǎn)品:H-526細胞、Hs 578Bst細胞、Nb 2細胞
HBVP細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞
NCI-H1238細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1668細胞、BAC1.2F5細胞、SKMEL-31細胞
FBHE細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1781細胞、A2780/CP細胞、MHCC97L細胞
H522細胞系相關產(chǎn)品:HUASMC細胞、JHH-2細胞、Daudi細胞
NCI-HUT-520細胞系相關產(chǎn)品:P3J HR-1細胞、RS(4;11)細胞、MF2059細胞
HBVSMC細胞系相關產(chǎn)品:CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞
SEM細胞系相關產(chǎn)品:LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞
MES-SA/Dx5細胞系相關產(chǎn)品:Glioma-261細胞、B16-F1細胞、HANK1細胞
NS20-Y細胞系相關產(chǎn)品:F442-A細胞、HeLa229細胞、FM-88細胞
SNU-878細胞系相關產(chǎn)品:HR8348細胞、OCI-Ly 1細胞、NCI-SNU-878細胞
OS-732細胞系相關產(chǎn)品:6T-CEM細胞、H-EMC-SS細胞、M-1細胞
LAD 2細胞系相關產(chǎn)品:GC-1細胞、SN4741細胞、Hs 746T細胞
BC-019細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR 8細胞、VMRC-RCZ細胞、Jurkat細胞
MC57細胞系相關產(chǎn)品:NB19-RIKEN細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、NPA細胞
NCI-H250細胞系相關產(chǎn)品:H-295細胞、H1341細胞、NCI-H226細胞
Ramos-RA1細胞系相關產(chǎn)品:H-740細胞、H2052_MM細胞、870細胞
PSN1細胞系相關產(chǎn)品:SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞
HCC-4006細胞系相關產(chǎn)品:SNU869細胞、H-841細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞
293F細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1876細胞、T_T_細胞、MV4;11細胞
SU4細胞系相關產(chǎn)品:NW38細胞、MCA-38細胞、CAL-39細胞
SW 837細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2122細胞、NCM-460細胞、Kasumi-1細胞
143BTK-細胞系相關產(chǎn)品:H9細胞、NCIH1770細胞、HCEC細胞
SF 767細胞系相關產(chǎn)品:TSUpr1細胞、ESC細胞、PE/CA-PJ-34細胞
SJCRH30細胞系相關產(chǎn)品:SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞
Pa17C細胞系相關產(chǎn)品:H-345細胞、2B4-L細胞、HT 1197.T細胞
CNE細胞系相關產(chǎn)品:JB6Cl30細胞、SP-2細胞、MC26細胞
HPAF II細胞系相關產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、Caki-1細胞、NUGC2細胞
Psi-2 DAP細胞系相關產(chǎn)品:HFT 8810細胞、SJRH 30細胞、HCC1954 BL細胞
AQ-Mel細胞系相關產(chǎn)品:SUM149PT細胞、NCI522細胞、Jurkat E6.1細胞
NCI-H647 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
H-1395細胞系相關產(chǎn)品:A549-Taxol細胞、NCI-322細胞、UO-31細胞
B-cell with DC Morphology細胞系相關產(chǎn)品:SCL2細胞、Caco-2/ATCC細胞、CA46細胞
Co 205細胞系相關產(chǎn)品:Hs1.Tes細胞、KNS81細胞、KYSE 270細胞
MFM223細胞系相關產(chǎn)品:TMD8細胞、Hepatoma 22細胞、P3J-HR-1細胞
MC116細胞系相關產(chǎn)品:Hs839.T細胞、SCaBER細胞、IHHA-1細胞
RBL 2H3細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2023細胞、UPCI-SCC-90細胞、C4-2細胞
6T-CEM細胞系相關產(chǎn)品:SNU-449細胞、MALME 3M細胞、Cattle chondrocytes細胞
NCTC-3960細胞系相關產(chǎn)品:JVM-2細胞、HuT102細胞、TPC-1細胞
LU451細胞系相關產(chǎn)品:J82 COT細胞、NCI-H1238細胞、MRC 5細胞
COLO-1細胞系相關產(chǎn)品:Hs 766T細胞、OACP4 C細胞、Hs-675-T細胞
Panc 4.03細胞系相關產(chǎn)品:WEHI-3細胞、RTE細胞、NCI-H2452細胞
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