"NCI-H2081 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NCI-H2081 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：隨細胞的密度而增加
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H2081 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性：懸浮生長
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié)，這里說一些我個人的經(jīng)驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對細胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經(jīng)驗，而忽視試劑，溶液尤其是細胞的質(zhì)量，后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
細胞形態(tài)特性：聚團懸浮
NCI-SNU-620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-441細胞、MKN 28細胞、MHCC97-L細胞
Clone 166細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞
RK 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2405細胞、HNE3細胞、SNU601細胞
UMNSAH/DF#1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 149細胞、HELF細胞、IEC-18細胞
ST486細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GalK1細胞、BNCL-2細胞、CHP100細胞
COLO-394細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H810細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞、NBL-12細胞
McCoy細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1373細胞、HAVSMC細胞、CA-46細胞
MILE SVEN 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3 CA細胞、Ha Fe細胞、GM04154細胞
KMS26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kuramochi細胞、NCI-441細胞、3T3 Swiss Albino細胞
MDAMB134VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R2C細胞、HCC0015細胞、RPMI 1846細胞
NCIH647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞
B104 [Rat neuroblastoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57/B6-L細胞、HHL5細胞、C166細胞
SN12PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO679細胞、HeLa細胞、KYSE180細胞
A2780/Taxol細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT112細胞、OVMANA細胞、HSC/mHSC細胞
SNU484細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs819T細胞、MAD109細胞、CCD-841-CoN細胞
HCC2279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuCC-T1細胞、EOC-20細胞、MUTZ-1細胞
NCIH661細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YTMLC-90細胞、H1618細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞
NCI.H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE450細胞、751細胞、AG06814-J細胞
T. T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Experimental Mammary Tumour-6細胞、FDC-P1細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞
32D:cl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Farage OL細胞、LS174細胞、HepG2/C3A細胞
Human ErythroLeukemia細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC-1細胞、LAN6細胞、GM3570細胞
SNU1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE14o-細胞、PLA-801D細胞、RSC 96細胞
PANC0403細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-540細胞、RGE細胞、A704細胞
HEP3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hos TE-85細胞、H647細胞、HMSC細胞
UO-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Kidney-2細胞、PC2細胞、MC-3T3細胞
Reh細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA922細胞、BT-474細胞、FHs74 Int細胞
NCI-H2081 Thawing人小細胞肺癌細胞系
OCI-Ly 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-HEP-1細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、J 82細胞
H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-23.5細胞、NCI-H676細胞、Mel-MeWo細胞
DMS 53細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM C7細胞、VB細胞、Eca 109細胞
L cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C38細胞、CHO-K1細胞、Hep-G2細胞
MSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2227細胞、U87-MG細胞、Panc 10.05細胞
3T3-F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRTEC細胞、SK-LU-1細胞、Panc 05.04細胞
Immortal Pig Intestinal-2I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO Lec1細胞、LM TK negative細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞
SR786細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOR-10細胞、NCIH1944細胞、639-V細胞
KMB-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354T細胞、IOSE-80細胞、Med 283細胞
NCI H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86.86細胞、CAL51細胞、SNU-387細胞
RBL-2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192B細胞、KB細胞、C4-2 Bone metastatic細胞
J82COT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MES 1細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞、SJCRH30細胞
WM 239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164 TC細胞、NCI-H1672細胞、JHH-2細胞
YES-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H889細胞、OCI-LY-18細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞
P3J HR1-K細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-101D細胞、HCC1008細胞、NCIH1563細胞
NFHIOSE-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、RBL2H3細胞、COLO394細胞
SW620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Granta 519細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、Vero-76細胞
NPA 87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6TG細胞、32Dcl3細胞、Swiss 3T3細胞
OCIAML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG10815細胞、A2780/Taxol細胞、3T3 clone A31細胞
CMK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-411細胞、CV-1細胞、NCI-H128細胞
Rat-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00215A細胞、MDA231細胞、KU-812-F細胞
SUM 149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3-LL細胞、SHEE細胞、PE CA PJ34細胞
SF295細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2081細胞、Lu-165細胞、PK136細胞
HuT102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-801D細胞、RPMI-8226細胞、NCl-H157細胞
Tsup-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCFSTTG1細胞、58F細胞、HCC-1954BL細胞
RERF-LCMS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1882細胞、MAntle cell VERona-1細胞、BLO-11細胞
GM00637H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A101D細胞、SUDHL16細胞、IM-95細胞
IOSE 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-EBNA1細胞、F442A細胞、Hx147細胞
H838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.G7-OVA細胞、Hs 600.T細胞、AML-2細胞
D-283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS1細胞、HCC1954 BL細胞、RA-FLSs細胞
NEC8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Rca-B細胞、KYSE410細胞
Opossum Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 52細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、NHA細胞
PC-3M-IE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231-GFP細胞、M059J細胞、CCK-81細胞
NCI-H2081 Thawing人小細胞肺癌細胞系
BNCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 2細胞、QGY-7701細胞、A72細胞
MDA-MB-231 #4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC 1細胞、EBNA293細胞、ROS17/28細胞
QGY-7703細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLC7細胞、PFSK1細胞、MDCK2細胞
CA46細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-69細胞、C22 (Clara)細胞、Kasumi-6細胞
TE354.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S.B.細胞、HCC44細胞、RS1細胞
H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB1細胞、RERF-LC-MS細胞、NU-GC-2細胞
TEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL.CL2細胞、SK Mel 2細胞、LM3細胞
MeSoTheliOma-211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIU-87細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、SU-DHL-1細胞
SKNO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-151細胞、IEC-18細胞、C32 [Human melanoma]細胞
KE 37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-4細胞、NCI-H747細胞、KP-N-RT細胞
Lewis lung carcinoma line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA157細胞、IPEC-1細胞、SNU119細胞
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