"NCI-H748 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NCI-H748 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：３-４天換液１次。
懸浮細胞不容易轉染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉染，其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉染試劑，脂質(zhì)體轉染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因導入細胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉染方法，針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI-H748 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性：懸浮生長
常規(guī)的細胞實驗(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗，比如病毒包裝，對細胞代數(shù)，對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關酶的活性，來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細胞，添加多一些EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學問可以講，對于一些難消化細胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞，不需要配制如此溶液。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
KMBC細胞系相關產(chǎn)品：MKN-28細胞、TE 85 ClF-5細胞、Neukoplast細胞
HCT/Taxo1細胞系相關產(chǎn)品：NTERA2-D1細胞、RKN細胞、NW-MEL-38細胞
T-47D細胞系相關產(chǎn)品：149 PT細胞、HT115細胞、BCaP-37細胞
SHG-44細胞系相關產(chǎn)品：H4細胞、A253細胞、SF295細胞
LLC-WRC 256細胞系相關產(chǎn)品：HuNS1細胞、HEEpiC細胞、MHCC-LM3細胞
K 562細胞系相關產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC 256細胞、RPMI2650細胞、H-1568細胞
MES-23.5細胞系相關產(chǎn)品：P3J.HR1K細胞、TMD-8細胞、RT4細胞
TE4細胞系相關產(chǎn)品：RKO_AS45細胞、SNB-19細胞、BrCL18細胞
CCD-1095Sk細胞系相關產(chǎn)品：SCC 9細胞、hFOB 1.19細胞、HCO細胞
HPF細胞系相關產(chǎn)品：2B4-L細胞、SVHUC細胞、Hepatoma-22細胞
P3X63Ag8細胞系相關產(chǎn)品：HEK293A細胞、SCC-7細胞、SNU407細胞
NCI H716細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly10細胞、NW-38細胞、SW 1990細胞
Hs 636 T細胞系相關產(chǎn)品：SNG-M細胞、Hs.27細胞、A-101D細胞
DMS114細胞系相關產(chǎn)品：LL/2細胞、Nb 2細胞、HCC-9204細胞
ME-1 [Human leukemia]細胞系相關產(chǎn)品：Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、SUDHL10細胞、H1238細胞
NCI-SNU-668細胞系相關產(chǎn)品：B16-BL6細胞、NKT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞
143BTK-細胞系相關產(chǎn)品：H9細胞、NCIH1770細胞、HCEC細胞
SMA 560細胞系相關產(chǎn)品：HPAF-II細胞、H2444細胞、I90細胞
NCIH2286細胞系相關產(chǎn)品：IHH-4細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、HCT/Taxo1細胞
C2BBe1細胞系相關產(chǎn)品：PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞
C3H/10T1/2-clone8細胞系相關產(chǎn)品：MSF細胞、SW-962細胞、NSC-34細胞
C3H/10T1/2-clone8細胞系相關產(chǎn)品：MSF細胞、SW-962細胞、NSC-34細胞
SK-NEP-1細胞系相關產(chǎn)品：SCL II細胞、Dunn LM8細胞、COLO-829細胞
Huh-7細胞系相關產(chǎn)品：MCM細胞、EAhy926細胞、MDAMB435S細胞
TE 32細胞系相關產(chǎn)品：Pro-5 Lec1.3c細胞、T-ALL 1細胞、NCI-H23細胞
MADB-106細胞系相關產(chǎn)品：MNNG/HOS Clone F-5細胞、MUTZ-1細胞、Caov-3細胞
NCI-H748 Thawing人小細胞肺癌細胞系
ARPE-19細胞系相關產(chǎn)品：CoCL3細胞、TMK-1細胞、MDA 1386細胞
PANC-03-27細胞系相關產(chǎn)品：hTERT-HME-1細胞、G 401細胞、HEK.EBNA細胞
HuH7細胞系相關產(chǎn)品：CAL-120細胞、MeT 5A細胞、M 1細胞
Panc02-H0細胞系相關產(chǎn)品：PANC-08-13細胞、Y-1細胞、VA-ES-BJ細胞
Det. 562細胞系相關產(chǎn)品：H19-7細胞、SNU620細胞、MES 13細胞
LAN5細胞系相關產(chǎn)品：SW 1463細胞、293GP細胞、H295細胞
HNE2細胞系相關產(chǎn)品：SKN-AS細胞、Panc-05.04細胞、HPAEC細胞
FLC7細胞系相關產(chǎn)品：GM00346B細胞、OVCAR8細胞、Nb2細胞
74Int細胞系相關產(chǎn)品：RT-BM細胞、H-1581細胞、H6c7細胞
CCRF SB細胞系相關產(chǎn)品：H-1355細胞、KTCTL-140細胞、A101D細胞
MLA 144細胞系相關產(chǎn)品：ATDC-5細胞、CAL 51細胞、NCI-H1650細胞
EL-4細胞系相關產(chǎn)品：NHDF細胞、16HBE14o-細胞、MHCC-97細胞
LOUNH91細胞系相關產(chǎn)品：CCD-112 CoN細胞、HSC-T6細胞、Vx-2細胞
Medical Research Council cell strain-5細胞系相關產(chǎn)品：SupT1細胞、G 292 Clone A 141B1細胞、IR983F細胞
2PK3細胞系相關產(chǎn)品：NIH 3T6細胞、Lewis-Lung細胞、NTERA2D1細胞
NIH3T3細胞系相關產(chǎn)品：MGH-U1細胞、266 Bl細胞、TE-4細胞
UCLA SO M21細胞系相關產(chǎn)品：MAVER-1細胞、Mono Mac 6細胞、SF-295細胞
BA/F3細胞系相關產(chǎn)品：DSL-6A-C1細胞、HEP-3B2細胞、MDA-MB468細胞
CD-18細胞系相關產(chǎn)品：B16 melanoma F10細胞、NCIH1573細胞、RAEC細胞
Centre Antoine Lacassagne-33細胞系相關產(chǎn)品：Det. 562細胞、MV522細胞、MAC1細胞
D562細胞系相關產(chǎn)品：MIA-PaCa-2細胞、HFT8810細胞、SHSY5Y細胞
NS1細胞系相關產(chǎn)品：H-889細胞、OVCAR-5細胞、AN3細胞
WEHI164細胞系相關產(chǎn)品：RMS 13細胞、BL2141細胞、HCC0202細胞
SO-Rb 50細胞系相關產(chǎn)品：293/EBNA細胞、H-1385細胞、RASMC細胞
Pan02細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR.5細胞、JTC-28細胞、EHEB細胞
LC-2 ad細胞系相關產(chǎn)品：C17.2細胞、IMR-32細胞、SMA 560細胞
NCIH2030細胞系相關產(chǎn)品：DoHH-2細胞、RH-30細胞、GP2-293細胞
B16 F10細胞系相關產(chǎn)品：A-704細胞、253JBV細胞、LNCaP subline C4-2細胞
3T3-F442A細胞系相關產(chǎn)品：rRTEC細胞、SK-LU-1細胞、Panc 05.04細胞
NCI-HUT-69細胞系相關產(chǎn)品：SKUT1細胞、Karpas 299細胞、H596細胞
Suzhou Human Glioma-44細胞系相關產(chǎn)品：52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞
NCI-SNU-387細胞系相關產(chǎn)品：Scott and White No. 13細胞、SK-BR-3細胞、Y1細胞
L-363細胞系相關產(chǎn)品：H2342細胞、MCF-7細胞、SK ES 01細胞
NCI-H748 Thawing人小細胞肺癌細胞系
CORL23細胞系相關產(chǎn)品：DoTc2細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞、RF/6A細胞
HeLa-229細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293T/17細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、SP2/0 Ag-14細胞
AMC-HN8細胞系相關產(chǎn)品：Hs746T細胞、LTEP-a-2細胞、PC3M細胞
NTERA-2 cl.D1細胞系相關產(chǎn)品：GM02219細胞、HMC3細胞、B16/F1細胞
H-2330細胞系相關產(chǎn)品：Soleus clone 8細胞、RL-952細胞、HEK293FT細胞
OCIAML3細胞系相關產(chǎn)品：BetaTC6細胞、GM2132細胞、HS-5細胞
DMS-114細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞
WI 38細胞系相關產(chǎn)品：GM-346細胞、MOLT-4細胞、Okayama University Medical School-27細胞
H28細胞系相關產(chǎn)品：H1618細胞、HOK細胞、V79-GalK1細胞
FL 62891細胞系相關產(chǎn)品：HL60細胞、NCI-SNU-216細胞、KPL-1細胞
RBMEC細胞系相關產(chǎn)品：mRTEC細胞、Hs 729細胞、Ramos(RA1)細胞
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