"MDA-PCa-2b Thawing人前列腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
MDA-PCa-2b Thawing人前列腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后,需要進(jìn)行分離培養(yǎng),否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大,營(yíng)養(yǎng)障礙,影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株),可以進(jìn)行細(xì)胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料,便于實(shí)驗(yàn)?!静僮鞑襟E】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進(jìn)行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔,以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞;6)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng);7)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般2~3d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?!咀⒁馐马?xiàng)】1)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間,消化時(shí)間過(guò)短時(shí),細(xì)胞不宜從瓶壁脫落,過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷;2)掌握好消化濃度,當(dāng)消化液濃度過(guò)高時(shí),消化時(shí)間應(yīng)縮短,過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:4傳代,2-3天換液1次。
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng),如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細(xì)胞周圍,然后通過(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的,電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷,選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到最低,懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染,選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
MDA-PCa-2b Thawing人前列腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤(rùn)洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實(shí)驗(yàn),比如病毒包裝,對(duì)細(xì)胞代數(shù),對(duì)細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個(gè)時(shí)候,胰酶消化,就是潤(rùn)洗,都會(huì)對(duì)細(xì)胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細(xì)胞包裝能力就會(huì)逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個(gè)時(shí)候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過(guò)影響ECM相關(guān)酶的活性,來(lái)使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白,而EDTA通過(guò)螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對(duì)付特別難消化的細(xì)胞,添加多一些EDTA,就是這個(gè)道理。一般不要試圖延長(zhǎng)消化時(shí)間(如果10min還消化不徹底的話),而應(yīng)該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見(jiàn)的操作,因?yàn)镾erum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問(wèn)可以講,對(duì)于一些難消化細(xì)胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因?yàn)檫@些離子也會(huì)抑制trypsin的活性。但對(duì)于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤(rùn)洗即可消化的細(xì)胞,不需要配制如此溶液。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞
L 540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JKT1細(xì)胞、RWPE-2細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞
SHP77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-683細(xì)胞、PFSK細(xì)胞、TE-10細(xì)胞
H-740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC 812細(xì)胞、H-1436細(xì)胞、HNE-2細(xì)胞
BALL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞、LCLC-103H細(xì)胞
HOP-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-WRN細(xì)胞、SCC25細(xì)胞、LA-N-6細(xì)胞
MFE296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL1細(xì)胞、CCD-841CoTr細(xì)胞、HBL1細(xì)胞
Sp2/O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-AG 8.653細(xì)胞、OUMS-23細(xì)胞、SCC4細(xì)胞
SKO007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L1210細(xì)胞、BL-6細(xì)胞、HNE-3細(xì)胞
GES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCET細(xì)胞、PC-14細(xì)胞、GI-1細(xì)胞
ATDC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L23/P細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞
RS(4;11)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、MUTZ1細(xì)胞、THLE2細(xì)胞
LS513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly1細(xì)胞、A-10細(xì)胞、NCI-H102細(xì)胞
ssMCF7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mc Coy細(xì)胞、NCI-H2106細(xì)胞、BEL/FU細(xì)胞
HOP92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF.7細(xì)胞、OCI-Ly03細(xì)胞、KYSE-270細(xì)胞
PCI-04B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 39細(xì)胞、BC-028細(xì)胞、SW756細(xì)胞
WISH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN 93細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞、HNE3細(xì)胞
LS513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly1細(xì)胞、A-10細(xì)胞、NCI-H102細(xì)胞
BSC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta-519細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞、H69/P細(xì)胞
RetroPack PT67細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAD109細(xì)胞、CAL78細(xì)胞、T84細(xì)胞
COLO-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS27細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞、SW900細(xì)胞
RGE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 683.T細(xì)胞、L615細(xì)胞、NOZC-1細(xì)胞
COLO 320 HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DR2R1610細(xì)胞、E0771細(xì)胞、H-498細(xì)胞
H-211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 190細(xì)胞、HT1197細(xì)胞、CEM C7細(xì)胞
P3X63 Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞
GM03320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.OV.3細(xì)胞、675T細(xì)胞、L-02細(xì)胞
Bx-PC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs832T細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞、L78細(xì)胞
MDA-PCa-2b Thawing人前列腺癌細(xì)胞系
LK 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MZ-CRC-1細(xì)胞、LADMAC細(xì)胞、J774 A1細(xì)胞
HFT-8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1155細(xì)胞、TJ905細(xì)胞、Capan2細(xì)胞
OV1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-30細(xì)胞、Colon38細(xì)胞、KMS-18細(xì)胞
SKN-SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs606細(xì)胞、GOS-3細(xì)胞、B16-F0細(xì)胞
TE11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lung cancer-1/squamous細(xì)胞、OUMS-27細(xì)胞、U2OS細(xì)胞
LS411N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-510細(xì)胞、GM2219C細(xì)胞、MC-CAR細(xì)胞
Karpas 422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00059細(xì)胞、NS-1細(xì)胞、TC7細(xì)胞
GM02219細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMY1022細(xì)胞、KP-2細(xì)胞、MDA 231-LM2-4175細(xì)胞
HCC1419細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞、LC-1Sq細(xì)胞、SK-RC 52細(xì)胞
Clone 166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-33Co細(xì)胞、COLO 320F細(xì)胞、SV40 MES 13細(xì)胞
KM-H2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC-1細(xì)胞、CaSki細(xì)胞、KP-2細(xì)胞
HTR-8/SVneo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV-90細(xì)胞、hCMEC/D3細(xì)胞、PC-12細(xì)胞
HT-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMC-1細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞、Line 522細(xì)胞
WM115F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2S細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞
Tsup-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCFSTTG1細(xì)胞、58F細(xì)胞、HCC-1954BL細(xì)胞
RT-BM 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B95.8細(xì)胞、SK MEL-28細(xì)胞、CemT4細(xì)胞
NCI-H711細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63/Ag8細(xì)胞、BEL-7405細(xì)胞、EoL-1-cell細(xì)胞
526-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMAc-Serum Free細(xì)胞、LLC-MK2細(xì)胞、JROECL 19細(xì)胞
DMS273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF PAC-1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞、P-815細(xì)胞
HCC0078細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144細(xì)胞、OVCAR-4細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞
KMS-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARH-77細(xì)胞、H-2110細(xì)胞、HME1細(xì)胞
A375mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLMS-1細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞、JHH2細(xì)胞
HCO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU368細(xì)胞、Wien 133細(xì)胞、SJSA-1細(xì)胞
NB-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LYR細(xì)胞、HEM細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞
PLC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs739T細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞
SNU886細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh 7.5細(xì)胞、SNU-719細(xì)胞、Hu-P-T3細(xì)胞
KYSE 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR1細(xì)胞、EA.Hy926細(xì)胞、PCI-04B細(xì)胞
T47D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR-42J細(xì)胞、Hs895T細(xì)胞、Hs888T細(xì)胞
SW1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1040細(xì)胞、CACO2細(xì)胞、C-4I細(xì)胞
HN 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2細(xì)胞、EFM-192A細(xì)胞、NCI-H1915細(xì)胞
NTC-200細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-05.04細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞
QGY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-1112sk細(xì)胞、IPLB-SF-21細(xì)胞、HCC-4006細(xì)胞
SUDHL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LP-1細(xì)胞、SK-N-BE-2細(xì)胞、8226細(xì)胞
MDA-PCa-2b Thawing人前列腺癌細(xì)胞系
HMC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1Sq細(xì)胞、CG-4細(xì)胞、HConEpic細(xì)胞
HUTU80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-LMS-1細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞
HMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H226細(xì)胞、MCF12A細(xì)胞、H4細(xì)胞
EB-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、U251n細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞
NCI-H-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-8細(xì)胞、HCT116細(xì)胞、Fao細(xì)胞
HL-7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly3細(xì)胞、H508細(xì)胞、BPH1細(xì)胞
Hs-746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZAWA細(xì)胞、CCRF/CEM-C7細(xì)胞、EAhy926細(xì)胞
CAKI.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ChA1細(xì)胞、NKM1細(xì)胞、HGMC細(xì)胞
RMS 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1793細(xì)胞、EBC1細(xì)胞、LC-1Sq細(xì)胞
C57/B6-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs611T細(xì)胞、CCD-112CoN細(xì)胞、P3 88 D1細(xì)胞
OVCAR.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero C1008細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞、Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞
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