"Hepa 1-6 Thawing小鼠肝癌細胞系
細胞背景資料：此細胞株源自C５７/L小鼠中引發(fā)的BW７７５６肝癌；表達AFP、α１抗胰蛋白酶、淀粉酶；鼠痘病毒陰性。此細胞可以在無血清的培養(yǎng)基中繁殖，培養(yǎng)基成分是：DMEM,７５%;Waymouth＇sMAB８７/３培養(yǎng)基，２５%。添加３x１０-８M。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
Hepa 1-6 Thawing小鼠肝癌細胞系
細胞生長：貼壁
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Hepa 1-6 Thawing小鼠肝癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰?，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
H-510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2 ad細胞、FHL124細胞、SK-BR3細胞
D10G41細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-102細胞、AR4IP細胞、bEnd3細胞
Huh7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H716細胞、MM96L細胞、LoMeT-ccRcc細胞
HMC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ML-2細胞、NCI-H711細胞、H35 Reuber細胞
H2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-449細胞、COLO679細胞、NCI H716細胞
HSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT125細胞、HEC251細胞、NKM-1細胞
CWR22-Rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、Hs822T細胞、Panc203細胞
H35 Reuber細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-1細胞、RN細胞、MMAc-SF細胞
CCRF/CEM-C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLMT-1細胞、COLO206細胞、SCCVII/St細胞
MKN 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCAEC細胞、COR-L279細胞、JEG-3細胞
MLOY4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞
H1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211細胞、NCIH1694細胞、H-676細胞
HEC251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1-0細胞、IHH4細胞、MDA453細胞
GA-10 clone 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388.D1細胞、Hs 636 T細胞、SNU-869細胞
SNT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD33Co細胞、DMS-153細胞、Metastatic Variant-522細胞
SKNBE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-433細胞、MDA-MB-231 #4175細胞、H1648細胞
HCT-GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 126細胞、H460細胞、NALM6細胞
VK2 (E6/E7)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320細胞、GM0637細胞、CNE1-LUC細胞
NCIH526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc8.13細胞、WERI Rb-1細胞、ATC241細胞
OCI-AML-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU398細胞、16HBE細胞、SK-N-BE(2C)細胞
B16-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C6661細胞、COLO 357細胞、HLEC-B3細胞
B16-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C6661細胞、COLO 357細胞、HLEC-B3細胞
TYK-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG-1細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、HTSMC細胞
PL9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-78細胞、CAKI1細胞、MDA-MB-231-GFP細胞
Ca761細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2170細胞、ST細胞、PTK 1細胞
HuO9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1990細胞、MDA-436細胞、BT.549細胞
Hepa 1-6 Thawing小鼠肝癌細胞系
NCIH1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK-49F細胞、Hs343T細胞、NS-1細胞
SK Mel 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Earle's L cells細胞、SNK-6細胞、Mono Mac 6細胞
WiDr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF細胞、TOV-112細胞、L cell細胞
H1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-209細胞、HuH1細胞、Ku812細胞
EAhy926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs.27細胞、C-33 A細胞、NCI-322細胞
LN 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBMVEC細胞、SUM 52PE細胞、COLO-679細胞
KU.812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-774A.1細胞、Hi-five細胞、HEK-293-H細胞
MCF.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNEP1細胞、HCEC細胞、AGS細胞
COLO-738細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、M3 Clone M-3細胞、GM05862細胞
CV-1.K細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVMANA細胞、Ku812F細胞、RH8994細胞
WISH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN 93細胞、OVCA433細胞、SW-1116細胞
BEL 7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H128細胞、D-341細胞、IOSE80UBC細胞
SNG-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL5細胞、OVCA432細胞、CCC-HIE-2細胞
KU-812-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEM細胞、Mevo細胞、OCIAML2細胞
Sf-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KAT5細胞、MiaPaca.2細胞、PC10細胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞
PC 61.5.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1 clone 6細胞、SK-MEL-MeWo細胞、U-251-MG細胞
Institute for Medical Research-32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-415細胞、HCC1187細胞、COLO357細胞
SK-MEL 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4細胞、OSC19細胞、IHC-ST1細胞
SNU886細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5細胞、SNU-719細胞、Hu-P-T3細胞
C4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE80UBC細胞、HeLa S 3細胞、COR-L88細胞
SUM 159細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8-D1A細胞、IALM細胞、NCI-H2066細胞
V 79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Liver-02細胞、LS 123細胞、Microbiological Associates-104細胞
PFSK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DC 2.4細胞、Hs-274-T細胞、TK 10細胞
NCI-HUT-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
SVOG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-1-P細胞、HCC94細胞、B10BR細胞
Sarcoma OSteogenic-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305C_1細胞、MZ-CRC-1細胞、MC116細胞
Panc 2.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-1細胞、SNU-368細胞、SKML-28細胞
H2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品：38C-13細胞、HIT T-15細胞、KB細胞
AQ-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149PT細胞、NCI522細胞、Jurkat E6.1細胞
NCI-H1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sol8細胞、Colo-678細胞、H-2135細胞
SW-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B35細胞、RH35細胞、MCF-7B細胞
ST486細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GalK1細胞、BNCL-2細胞、CHP100細胞
Hepa 1-6 Thawing小鼠肝癌細胞系
NCIH522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa16C細胞、CAL 120細胞、OVCAR433細胞
Spodoptera frugiperda clone 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21細胞、VP 267細胞、KBM5細胞
OVHM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-522細胞、NCIH1963細胞、H9c2(2-1)細胞
RMS1598細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1355細胞、T2細胞、Ramos 1細胞
COLO-699細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LI7細胞、CMT-64細胞、BSC-1細胞
LC-1-sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH35細胞、P30OHK細胞、Panc_03_27細胞
GM03190A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-253細胞、Fu97細胞、TEC細胞
MiaPaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW-039細胞、FET細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞
PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT 4細胞、Swiss-3T3細胞、H-2087細胞
MOLM-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI N87細胞、Sol8細胞、WEHI3B細胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4細胞、MESSA-DX5細胞、RCC4細胞
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