"NCI-H157 Thawing人非小細胞肺腺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
NCI-H157 Thawing人非小細胞肺腺癌細胞系
細胞生長:貼壁
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H157 Thawing人非小細胞肺腺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)取10ml培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
NCI.H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE450細胞、751細胞、AG06814-J細胞
UCLA NPA871細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADB106細胞、A2780 CP70細胞、MDAMB361細胞
Hx-147細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLB 985細胞、MES-23.5細胞、PG-4細胞
SuperTube細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1930細胞、TGW-I-nu細胞、LM6細胞
Normal fibroblast-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:58F細胞、PNT1A細胞、JVM-2細胞
Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9c2 (2-1)細胞、R1800[RA]細胞、M059K細胞
Calu6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ra #1細胞、RPMI8402細胞、HEK-A細胞
H510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-1細胞、BEL7404細胞、IMR-90細胞
TOV112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKHEP-1細胞、DU145細胞、Hs683細胞
SUM 159細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8-D1A細胞、IALM細胞、NCI-H2066細胞
L23/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ETCC007細胞、Mink細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞
BE(2)M-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 AG8-653細胞、GM00637B細胞、50.B1細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-676B細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞、RIN-m 14B細胞
LIM1215細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC44細胞、HL60細胞、MDAMB468細胞
GBC-SD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alexander細胞、Colon 26細胞、HCC-2935細胞
KYSE-50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs604T細胞、SUM159PT細胞、B16-F10-BL6細胞
HuO9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1990細胞、MDA-436細胞、BT.549細胞
LO2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE 29細胞、NR 8383細胞、Hs 695T細胞
U-118-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP4細胞、Hs611T細胞、NB-9細胞
Panc04.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92細胞、NF639細胞、Rabbit Kidney 13細胞
SK-Hep1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepatoma 22細胞、YH細胞、Mink Lung細胞
CTSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF細胞、Nb2-11細胞、SU-DHL-5細胞
OCI AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 839細胞、MOLP-8細胞、OVISE細胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-212細胞、Caco2BBe細胞、MDA330細胞
Clone 166細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞
D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞
NCI-H157 Thawing人非小細胞肺腺癌細胞系
SP2/0 Ag-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman S91 melanoma細胞、KTA7細胞、Psi-2-DAP細胞
YD38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-J細胞、OVCAR-8/ADR細胞、143B細胞
MEG-01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H165細胞、CAL 33細胞、LOU-NH91細胞
KYSE 520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2122細胞、RC-4B/C細胞、NCIH889細胞
HARA-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUCCT1細胞、MARC145細胞、DR2R1610細胞
NCI-H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82COT細胞、SKMEL28細胞、HT144-mel細胞
C-Lu-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-167細胞、AU565細胞、RH7777細胞
MB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-1細胞、18G3.cl 1細胞、SK-ChA-1細胞
Human Foreskin Fibroblast細胞系相關(guān)產(chǎn)品:STC-1細胞、LoMeT-ccRcc細胞、H-1882細胞
SK Mel 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2細胞、H.Ep. No. 2細胞、GH3細胞
HCT 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS42細胞、P-388D1細胞、WEHI 231細胞
RL95-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone 166細胞、GM03570細胞、Molm 13細胞
COR-L105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC1細胞、NCIH1435細胞、Tca-8113細胞
EoL-1 cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs746-T細胞、NGP細胞、143BTK-細胞
SSP-25細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH 3T3細胞、MDCK細胞、MCF10-A細胞
L-6TG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞
J-774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-CCRF細胞、OCI-Ly 19細胞、PC12(高分化)細胞
CLL-CII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW13細胞、H-441細胞、D341Med細胞
SUDHL16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92-MI細胞、ARO81-1細胞、NCIH146細胞
EOMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NSI/1-AG4-1細胞、OB2細胞、H-548細胞
Molm 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2-cloneD1細胞、PNT1/A細胞、SK-NSH細胞
SW 837細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2122細胞、NCM-460細胞、Kasumi-1細胞
H2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、N87細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞
VMRC-RCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞
TGBC-11-TKB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI7951細胞、J82 COT細胞、LC-1 sq細胞
ARIP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞
L 132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、MES-13細胞、H1694細胞
H1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS細胞、AD293細胞、SCC 25細胞
PL9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-78細胞、CAKI1細胞、MDA-MB-231-GFP細胞
RS4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1688細胞、H-292細胞、C-643細胞
NCI-H196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIE-115細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、L615細胞
KYSE 70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC細胞、Pt-K1細胞、Kit225-K6細胞
U-251 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-EOL-1細胞、AMO1細胞、PC615.3細胞
NCI-H157 Thawing人非小細胞肺腺癌細胞系
University of Arizona Cell Culture-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 231細胞、HCC-1143細胞、NCIH460細胞
COR L279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN-1細胞、BLO 11細胞、MDA-157細胞
T_T_細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BN-CL2細胞、NCIH82細胞、LP1細胞
HPDE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC2細胞、CTSC-3細胞、P3X63 AG 8.653細胞
Nittby-Salford 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAK+/+細胞、H-1522細胞、Dx5細胞
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H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM0637細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞
5637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2T細胞、H292細胞、SUP T1細胞
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LS-174T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-II-EC3細胞、NCIH1869細胞、SKCol1細胞
NCI522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-kb2細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、OCI-LY-19細胞
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