"BT-B Thawing人膀胱癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
BT-B Thawing人膀胱癌細胞系
細胞生長:貼壁
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
BT-B Thawing人膀胱癌細胞系
細胞生長特性:貼壁
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
C22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 420細胞、Ca759細胞、NCIH1417細胞
GM-215細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2286細胞、KP-N-YN細胞、MonoMac 6細胞
OAW-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNDZ細胞、Granta519細胞、NCIH2085細胞
MOLT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H660細胞、P3 (Jiyoye)細胞、293 c18細胞
HEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSA細胞、MPP 89細胞、MDAMB175VII細胞
SNU407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL6細胞、SNU251細胞、OVCAR.4細胞
H-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞
Caki-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel 1細胞、B16-F10-BL6細胞、MPVECs細胞
Mel-RM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB436細胞、DR2R1610細胞、SCC 4細胞
KM12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage Original Line細胞、NCI-H165細胞、SW-839細胞
C3H/10T1/2-clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSF細胞、SW-962細胞、NSC-34細胞
U-251 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-EOL-1細胞、AMO1細胞、PC615.3細胞
NCM-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2227細胞、H-220細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞
TFK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1A細胞、MES-SA-Dx5細胞、MDA PCa 2b細胞
TE-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GOS-3細胞、3T3L1細胞、LN299細胞
ARH77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-9細胞、UO-31細胞、Kit225-K6細胞
S-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs578Bst細胞、Vero 76 clone E-6細胞、QGY 7701細胞
mIMCD3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-023細胞、CEM C7細胞、CNE-1細胞
Neuro2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DKMG細胞、IPAM-WT細胞、H-1651細胞
NCTC 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc02.03細胞、HPMEC細胞、S3 HeLa細胞
NCI-H1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1668細胞、BAC1.2F5細胞、SKMEL-31細胞
HOS TE 85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293AD細胞、LI7細胞、MOVAS-1細胞
MRMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOEC細胞、SNU-638細胞、CORL88細胞
H-1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM-1細胞、3T3NIH細胞、HBL-100細胞
NCI-H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA 104細胞、COLO 678細胞、A-375SM細胞
KYSE0520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caki-1細胞、RM-1細胞、S16細胞
BT-B Thawing人膀胱癌細胞系
ABE8.1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bovine ENDometrial cells細胞、RC-K8細胞、FL 62891細胞
Centre Antoine Lacassagne-12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 134VI細胞、HOS細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞
SN12CPM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40-HCEC細胞、COLO 320HSR細胞、Hs-274-T細胞
AN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373MG細胞、COLO 320細胞、HCM細胞
HuT 78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 174T細胞、SKMEL3細胞、ST細胞
Huh 7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM(TK-)細胞、SuDHL 2細胞、UM2細胞
Jurkat-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human fetal lung fibroblast 1細胞、CP-70細胞、686LN-M4e細胞
Lec1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo-K-1細胞、Caco-2/BBe 1細胞、EOMA細胞
H-1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2342細胞、COLO-680N細胞、OCI-AML-3細胞
CHO-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OPM-2細胞、NTera2 cl.D1細胞、KMB17細胞
OSRC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GL261細胞、Hep 3B2.1-7細胞、CA-OV-3細胞
H-2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anglne細胞、WM-239細胞、TCC Sup細胞
H-EMC-SS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC-40細胞、HS 683T細胞、U-373 MG細胞
HCC0366細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF/Adr細胞、RN-c細胞、NTC200細胞
Jurkat-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney-21細胞、WM-451Lu細胞、NIH 3T6細胞
H-125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U937細胞、MV4II細胞、P388細胞
TE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO_AS45細胞、SNB-19細胞、BrCL18細胞
CFSC-2G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2405細胞、CCD-18Co細胞、NK 10a細胞
H-1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Porcine Kidney-13細胞、IOSE 80細胞、U343MG細胞
HBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 52細胞、IHH細胞、H526細胞
ZYM-SVEC01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-1細胞、HOS-143B細胞、KTCTL-140細胞
SF 295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 453細胞、SW-1116細胞、HuP-T3細胞
NFS 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO細胞、NCI-SNU-761細胞、Malme3M細胞
NCI-SNU-182細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIC細胞、WEHI-231細胞、PNT1/A細胞
NCTC-3960細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM-2細胞、HuT102細胞、TPC-1細胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞
BHP 10-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:W133細胞、Jurkat clone A3細胞、RPMI 1788細胞
GTL 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FO [Mouse myeloma]細胞、UPCISCC154細胞、MDAMB436細胞
MRASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、EC9706細胞、CCD-18Co細胞
SW 1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239A細胞、PF382細胞、MCF-12A細胞
HOS TE 85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293AD細胞、LI7細胞、MOVAS-1細胞
EA.hy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAMSCs細胞、SKMel-5細胞、HEI-193細胞
TH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9(Hamprecht)細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞、SC1細胞
BT-B Thawing人膀胱癌細胞系
D-324MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 539細胞、A-875細胞、OE-33細胞
HA1800細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUSMC細胞、SUDHL-10細胞、K7M2-WT細胞
PAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-8/V細胞、293/EBNA-1細胞、2B4-L細胞
D-341Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT2細胞、hTERT-HPNE細胞、RPMI #8226細胞
COLO 320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞
SK-MEL-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBZY-1細胞、GM07404D細胞、Strain L-929細胞
Ramos-RA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-740細胞、H2052_MM細胞、870細胞
HCC0078細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144細胞、OVCAR-4細胞、HRCEC細胞
HLEC-SRA 01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs675細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、Hs940.T細胞
NCIH209細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-5細胞、Capan 1細胞、VE細胞
LC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAa細胞、EA. hy 926細胞、AN3 CA細胞
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