"NRK Thawing大鼠腎細胞系
細胞背景資料：腎；自發(fā)永生；Osborne-Mendel
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NRK Thawing大鼠腎細胞系
細胞生長：貼壁
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內形成單層，需要再次進行傳代。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NRK Thawing大鼠腎細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞傳代的一般方法：開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細胞(單層細胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細胞吹打管（２０ml）(以上用具需經１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細胞，挑選生長狀態(tài)良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細胞；先用PBS洗液沖洗細胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細胞瓶內加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
RBL.2H3細胞系相關產品：BT20細胞、HCC 70細胞、GM346細胞
H23細胞系相關產品：EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞
TGBC11TKB細胞系相關產品：NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞
McArdle RH-7777細胞系相關產品：WB F344細胞、786.O細胞、OVCAR-420細胞
UMC11細胞系相關產品：U-373-MG細胞、KRC/Y細胞、NTERA-2 cl.D1細胞
KM H-2細胞系相關產品：NCI-H1838細胞、Kit 225細胞、AZ521細胞
H-9細胞系相關產品：NCI-H1648細胞、NALM6細胞、H4IIE細胞
BNL 1ME A.7R.1細胞系相關產品：HCC2218細胞、SW 1573細胞、COLO 684細胞
PC-3M IE8細胞系相關產品：Vertebral Cancer of the Prostate細胞、MRC-V細胞、AML-12細胞
KTCTL-140細胞系相關產品：C518細胞、COLO 684細胞、H-1954細胞
PGBE1細胞系相關產品：Simpson細胞、Clone 15 HL-60細胞、C6661細胞
624 MEL細胞系相關產品：SNUC1細胞、CCD-841CoN細胞、COLO-684細胞
B16-F10細胞系相關產品：Sp2/mIL-6細胞、HEK293-A細胞、EU-4細胞
H1993細胞系相關產品：Calu-1細胞、U20-S細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞
DK-MG細胞系相關產品：CAL-12T細胞、BE(2)-M17細胞、GM637A細胞
TE-671細胞系相關產品：LM8細胞、TGW-I-nu細胞、BC-025細胞
H-1836細胞系相關產品：Colo699細胞、BJ [Human fibroblast]細胞、SK-N-AS細胞
SW1116細胞系相關產品：KYSE0520細胞、HT-1197細胞、NCI-H719細胞
UMUC1細胞系相關產品：HLE細胞、HFL-1細胞、H-2029細胞
HUCCT1細胞系相關產品：Hs-343-T細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞、Bx-PC3細胞
MFD-1細胞系相關產品：LAPC-4細胞、JHH-7細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞
GOS-3細胞系相關產品：SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞
GC-2spd(ts)細胞系相關產品：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、TMD8細胞、SKNBE-1細胞
Centre Antoine Lacassagne-62細胞系相關產品：MESSA細胞、IHC-ST1細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞
143B TK-細胞系相關產品：GM03571細胞、MH-22a細胞、SK RC 52細胞
MDA-157細胞系相關產品：SJ-RH30細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、NCIH820細胞
NRK Thawing大鼠腎細胞系
SF767細胞系相關產品：A2780CP70細胞、TE14細胞、KE 37細胞
CL1-5細胞系相關產品：HuH-1細胞、HEp-2細胞、SW 626細胞
RS(4;11)細胞系相關產品：Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞
AMJ2C8細胞系相關產品：Capan 2細胞、BE2C細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞
Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞系相關產品：GH3細胞、DrG細胞、Hs 819.T細胞
X63Ag8.653細胞系相關產品：HT144mel細胞、Leydig細胞、SW-962細胞
SK Mel 24細胞系相關產品：Earle's L cells細胞、SNK-6細胞、Mono Mac 6細胞
SK 1細胞系相關產品：Colo-206F細胞、SW 756細胞、Hep 3B2細胞
CAL-120細胞系相關產品：Ishikawa細胞、RAT2細胞、MBT-2細胞
C3H-10T1/2細胞系相關產品：MUTZ-3細胞、ATN1細胞、Hs 281.T細胞
SKMES-1細胞系相關產品：PCI-04B細胞、MDBK細胞、GES1細胞
JM-1細胞系相關產品：RPMI No. 1846細胞、Clone Y-1細胞、H7721細胞
CT 26細胞系相關產品：NCI/ADR-RES細胞、CMT 64細胞、GM-346細胞
DR2R1610細胞系相關產品：253J細胞、50.B1細胞、Tregs細胞
Colo-206F細胞系相關產品：Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、V-79細胞、NCI-H1930細胞
KMS11細胞系相關產品：B 95-8細胞、HCA-7細胞、RBMEC細胞
OVCA5細胞系相關產品：PANC-10-05細胞、ML2細胞、MDA-MB-134-VI細胞
S3 HeLa細胞系相關產品：MDA-MB 231細胞、MPVECs細胞、Melan-a細胞
HELF細胞系相關產品：BAR-T細胞、MBT-2細胞、CAL-120細胞
EB-2細胞系相關產品：Rainbow Trout Embryo細胞、U251n細胞、CHO-S細胞
MC38細胞系相關產品：QG56細胞、H-1238細胞、OCM1A細胞
HCC1395細胞系相關產品：COLO-829細胞、3T6細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞
Sp2/0-Ag-14細胞系相關產品：H1404細胞、SW 1463細胞、MCAEC細胞
U-138-MG細胞系相關產品：SK-GT-2細胞、HNSC細胞、RIN-m5F細胞
H-548細胞系相關產品：HHL-5細胞、BMSC/hBMSCs細胞、HR8348細胞
CAL78細胞系相關產品：MFE-296細胞、Hs 737.T細胞、OEC19細胞
NPA'87細胞系相關產品：Lewis-Lung細胞、HBZY1細胞、87 MG細胞
NEC細胞系相關產品：U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞
PC-9/GR細胞系相關產品：PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞
H64細胞系相關產品：EC109細胞、NCI H82細胞、PLC PRF 5細胞
HLEB-3細胞系相關產品：MM1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞、U266B1細胞
PA-1細胞系相關產品：Becker細胞、NUGC-2細胞、NCIH1819細胞
HCC70細胞系相關產品：NCIH1819細胞、KHYG-1細胞、MCF-10 Attached細胞
NRK Thawing大鼠腎細胞系
PBL細胞系相關產品：H35細胞、RAW 264.7細胞、MA-782細胞
OCM1細胞系相關產品：CTV-1細胞、hTERTHME1細胞、CL-11細胞
CCD 1112SK細胞系相關產品：OVCAR-432細胞、OV1-P細胞、H-1650細胞
293A細胞系相關產品：WC00044細胞、A-2058細胞、4175細胞
K-1735細胞系相關產品：786.O細胞、Calu 6細胞、HSAS3細胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞系相關產品：H-810細胞、KAT-5細胞、MB39細胞
NS1-1 Ag4.1細胞系相關產品：H-1238細胞、PANC1005細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞
H128細胞系相關產品：Caco2BBe細胞、MBVP細胞、MGH-U3 (RN)細胞
Institute for Medical Research-90細胞系相關產品：CACO2細胞、NCIH2009細胞、NCI-H322T細胞
Hs 683.T細胞系相關產品：TPC1細胞、RPTC細胞、HS5細胞
Ca9-22細胞系相關產品：C643細胞、MV-4-11細胞、NCIH128細胞
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