"HCT 116 Thawing人結腸癌細胞系
細胞背景資料：結腸腺癌；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
HCT 116 Thawing人結腸癌細胞系
細胞生長：貼壁
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通常控制在１-２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當的完全培養(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯系實驗室。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
HCT 116 Thawing人結腸癌細胞系
細胞生長特性：貼壁
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
PK-136細胞系相關產品：NCI-H1876細胞、NCI-H295細胞、DHL-8細胞
Hs742T細胞系相關產品：Colo741細胞、CEM-C7細胞、SUM190PT細胞
Caco-2細胞系相關產品：M-1 myeloid leukemia細胞、HLF細胞、J774細胞
P388D1細胞系相關產品：MCF7ADR細胞、LTEP-sm細胞、HCC-70細胞
NFHIOSE-29細胞系相關產品：NCM356細胞、NCI-H2029細胞、NCIH1341細胞
H2087細胞系相關產品：MIN6細胞、HCC0827細胞、CCD-33Co細胞
OLN 93細胞系相關產品：Co320細胞、NCI-H2452細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞
1301細胞系相關產品：L cell line細胞、CoCL2細胞、PSN-1細胞
NCI-H157細胞系相關產品：Tu 212細胞、SUD4細胞、CAL 12T細胞
Hep G2細胞系相關產品：SKLU1細胞、NCI-H187細胞、C8166-CD4細胞
Hs27細胞系相關產品：K299細胞、OS-732細胞、HCC-44細胞
CA46細胞系相關產品：H-69細胞、C22 (Clara)細胞、Kasumi-6細胞
HCC1937細胞系相關產品：JROECL 21細胞、SHSY-5Y細胞、DMS53細胞
H446細胞系相關產品：SUIT 2細胞、OV-CA 432細胞、SF 767細胞
PAMC82細胞系相關產品：mousepodocyte細胞、HS-729細胞、HEK-EBNA細胞
NCIH128細胞系相關產品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、OCI/AML3細胞、IEC 18細胞
Rat Basophilic Leukemia-1細胞系相關產品：Sp2/O-Ag14細胞、PG-LH7細胞、CAL-27細胞
LL/2(LLc1)細胞系相關產品：CHL/IU細胞、MDA-MB-361細胞、SW 1463細胞
2V6.11細胞系相關產品：IPLB-Sf21AE細胞、NCIH1299細胞、WC00044細胞
38C13細胞系相關產品：YH細胞、P31-FUJ細胞、Tn5 B1-4細胞
M059J細胞系相關產品：Reuber-H-35 hepatoma細胞、RPE D407細胞、CFSC-8B細胞
M059J細胞系相關產品：Reuber-H-35 hepatoma細胞、RPE D407細胞、CFSC-8B細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞系相關產品：H-676B細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞、RIN-m 14B細胞
C-Lu65細胞系相關產品：MOLP-2細胞、RCC10細胞、NCIH2009細胞
HCC1599細胞系相關產品：ARO 81-1細胞、ChaGo-K-1細胞、HCC95細胞
CAL 51細胞系相關產品：Bac 1.2F5細胞、Hs27細胞、L540細胞
HCT 116 Thawing人結腸癌細胞系
Normal Rat Kidney-49F細胞系相關產品：A-172MG細胞、Tu177細胞、HCC-1419細胞
RBL-2H3細胞系相關產品：EFM192B細胞、KB細胞、C4-2 Bone metastatic細胞
HEK293F細胞系相關產品：SUDHL-2細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞、SupT1細胞
H2085細胞系相關產品：Epstein-Barr-1細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、H1618細胞
Panc_02_03細胞系相關產品：OCI-LY-19細胞、HCC1954-BL細胞、KU1919細胞
PK-13細胞系相關產品：PG-BE1細胞、NCI H747細胞、EBNA-293細胞
L-5178-Y-R細胞系相關產品：WPE-int細胞、SW260細胞、OUMS23細胞
P3 (Jiyoye)細胞系相關產品：hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞
M059K細胞系相關產品：NMCG1細胞、C-Lu65細胞、M07e細胞
U-118MG細胞系相關產品：PK-15細胞、293EBNA細胞、HPDEC細胞
C81-61細胞系相關產品：JB 6細胞、Hs 445細胞、Panc8.13細胞
HEK-293-FT細胞系相關產品：NP-69細胞、32D:cl3細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞
A9細胞系相關產品：NCIH1688細胞、H-1573細胞、A-10細胞
LM-TK-細胞系相關產品：RPTC細胞、ID8細胞、GC-2spd(ts)細胞
HCC-1187細胞系相關產品：High 5細胞、Wistar Institute-38細胞、OCI-Ly8細胞
CTX TNA2細胞系相關產品：JB-6 Cl 30細胞、USMC細胞、C-32細胞
CTX TNA2細胞系相關產品：JB-6 Cl 30細胞、USMC細胞、C-32細胞
Roswell Park Memorial Institute 1846細胞系相關產品：PLC PRF 5細胞、HuT-102細胞、GM02219細胞
SuDHL 10細胞系相關產品：Madin-Darby Canine Kidney細胞、CATHa細胞、SK-MEL 28細胞
H-146細胞系相關產品：HCC-1359細胞、H64細胞、KALS1細胞
Sp2/0-Ag14細胞系相關產品：SUDHL5細胞、OCI-Ly 8細胞、CEMO-1細胞
HCS2/8細胞系相關產品：SUSM-1細胞、CHP126細胞、H-2227細胞
RSC-96細胞系相關產品：SKRC-52細胞、769-P細胞、SUM 52PE細胞
RPMI 1788細胞系相關產品：Ca Ski細胞、BIU-87/Adr細胞、GM637A細胞
SUDHL-2細胞系相關產品：LP-1細胞、SK-N-BE-2細胞、8226細胞
N-2a細胞系相關產品：SUDHL16細胞、B16-BL6細胞、NCI.H226細胞
COLO320/DM細胞系相關產品：Pro-Lec1.3C細胞、Jurkat-FHCRC細胞、GOTO細胞
HCT-15細胞系相關產品：HEK293E細胞、J-82細胞、U373 MG細胞
CEMC7細胞系相關產品：HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞
102PT細胞系相關產品：KMH2細胞、COLO 16細胞、C2C12細胞
TCCSUP細胞系相關產品：DiFi細胞、FOX-NY細胞、KYSE-70細胞
KMB 17細胞系相關產品：MCF10A細胞、COV362細胞、SNU216細胞
HPBALL細胞系相關產品：HBL100細胞、FDCP1細胞、3T3-F442A細胞
HCT 116 Thawing人結腸癌細胞系
MGHU1細胞系相關產品：WM2664細胞、MDA-MB-415細胞、RC-K8細胞
TO 175.T細胞系相關產品：RAW264.7細胞、HCC70細胞、SCL2細胞
NCI-H2347細胞系相關產品：KATO III細胞、32D/cl3細胞、KAT-5細胞
OVCAR.5細胞系相關產品：NCI-H2052細胞、LCLC103H細胞、NS1-Ag4細胞
AML193細胞系相關產品：NCIH146細胞、MOLP2細胞、GM01232E細胞
FaDu細胞系相關產品：Farage細胞、D-407細胞、SK-MES-1細胞
SNU869細胞系相關產品：Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、MNNG/HOS細胞、A2780CP70細胞
ROS17/2.8細胞系相關產品：WERI細胞、HOS TE 85細胞、SKNAS細胞
OSC-19細胞系相關產品：BE2_C細胞、MDA 1386細胞、CL 1-0細胞
HNE1細胞系相關產品：RINm5F細胞、TE-14細胞、AX-Mel細胞
SK-N-BE2細胞系相關產品：SNT8細胞、NCI-H676B細胞、SUM159細胞
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