"GP5d Thawing人結(jié)腸腺癌細胞系
細胞背景資料:結(jié)腸癌;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
GP5d Thawing人結(jié)腸腺癌細胞系
細胞生長:貼壁
如何進行細胞復蘇:1)從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時搖動令其盡快融化;2)從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;3)離心,1000rpm,5min;4)棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞,計數(shù),調(diào)整細胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);5)次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。【溫馨提醒】1)從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存,但為對數(shù)生長期細胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液;2)將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護工作(戴棉手套),以免凍傷;3)凍存和復蘇用新配制的培養(yǎng)液。細胞復蘇的時候,有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后,放在室溫下,經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸,該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎?其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的?一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口,再稍擰松蓋子,再放37度水浴鍋中搖溶,在將細胞轉(zhuǎn)移到裝有37度預熱過的培養(yǎng)基的試管中,迅速離心,再用培養(yǎng)基洗一遍。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項:1.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈,消毒半小時以上。2.進入凈化室前先關(guān)閉紫外燈,打開超凈臺風機,等待30min以上,以排盡臭氧。3.穿好隔離衣,戴好口罩,帽子。4.風淋2分鐘。5.0.1%水泡手,擦干。6.點燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應避免放入過多的物品;使用的吸管,滴管,試管,培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。7.打開各類瓶蓋前先過火,以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰,鑷子使用前應經(jīng)火焰燒灼。8.水平式風機的超凈臺,應使瓶口斜置,應盡量避免瓶口敞開直立。9.同一根吸管或滴管不應連續(xù)用于幾個不同的細胞系;吸取培養(yǎng)基的吸管應離開培養(yǎng)瓶或試管口0.5cm,避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口;以防止細胞系的互相混雜污染。10.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體,立即用酒精棉球擦凈。11.操作完畢后恢復工作臺面。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
GP5d Thawing人結(jié)腸腺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁
細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
HFF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL 1ME A.7R.1細胞、MB39細胞、H295R-S1細胞
B-CPAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MuM-2C細胞、SW 527細胞、KYSE 30細胞
H-889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞
HEEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、BE(2)-C細胞、JCA1細胞
MCF 10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly01細胞、HBdSMC細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞
OCI AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF細胞、H-1770細胞、T-HEECs細胞
JKT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi-5細胞、PC3M-1E8細胞、CAL 120細胞
MSB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIPF178C細胞、HGC-27細胞、KPL1細胞
751-NA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO27細胞、HeLa.S3細胞、138MG細胞
CCRF/CEM/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞
GM02131細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-3960細胞、Rat Fetal Lung-6細胞、LICR-HN6細胞
H1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品:beta TC6細胞、TE671細胞、CCRF/CEM/0細胞
C-8161細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLB-985細胞、BS-C-1細胞、SNU-423細胞
PSN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞
A10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL2細胞、526-mel細胞、GFP-Olig2細胞
NCIH358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOMO-1細胞、MLE 12細胞、UACC812細胞
CaSki細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSF2細胞、EL 4細胞、KMS26細胞
NB19-RIKEN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MODE-K細胞、NCI-H2342細胞、IPEC-J2細胞
L-6TG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞
SCC 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VeroC1008細胞、NCI-H522細胞、MV4-11細胞
293 HEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAO-1細胞、Huh 7.5細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞
293 HEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAO-1細胞、Huh 7.5細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞
SU-DHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs695細胞、HEC1B細胞、Mono-Mac-6細胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs822T細胞、SNU-449細胞、U266 B1細胞
alpha TC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Namalva細胞、H-1688細胞、NCIH2228細胞
SKLU01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239細胞、MM-1S細胞、ATDC-5細胞
GP5d Thawing人結(jié)腸腺癌細胞系
NBL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-039細胞、Farage Original Line細胞、EFM192B細胞
TE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEF細胞、Hs 274.T細胞、DLM8細胞
EFM-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES細胞、RD-ES細胞、HT-115細胞
HLEC-SRA 01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs675細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、Hs940.T細胞
VAESBJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ELD-1細胞、NCI-H322T細胞、MyLa2059細胞
SK-MEL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H28細胞、Mel624細胞、NCI-SNU-C1細胞
IR983F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92細胞、32D clone 3細胞、EL-4細胞
MBT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEY-A8細胞、HT-1376細胞、EC109細胞
NCIH548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
Oka-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-719細胞、NCI-H322細胞、HHFK細胞
K1735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H 10T1/2細胞、Hs 742.T細胞、LI7細胞
LuCL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD 18細胞、BC-025細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞
Hs 604.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2073細胞、L(TK-)細胞、U266-B1細胞
SK-RC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34細胞、BT.549細胞、COR-L51細胞
Human Embryonic Kidney 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:My-La 2059細胞、NKL細胞、NKL細胞
NCI-HUT-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
Chang liver細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-7細胞、IB-RS2細胞、L-6TG細胞
TMD8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH/DF-1細胞、H-1915細胞、SNU387細胞
MDA-MB-435-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225-K6細胞、NTERA2D1細胞、Hs 737.T細胞
B16F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:870細胞、IPLB-Sf21細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞
NPC-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 7B細胞、PE/CA-PJ-34細胞、Sp2/O-Ag14細胞
Tca-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-33細胞、NCI-H1648細胞、NCI-H1355細胞
CCD 966 SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780 CP70細胞、149PT細胞、BE2-C細胞
Mel-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞
MT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、SKNO-1細胞、RPTEC TERT1細胞
KYSE 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S3細胞、HM1900細胞、Huh7.5.1細胞
TYK-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEG-1細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、HTSMC細胞
NCIH596細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu-212細胞、NCIH2066細胞、CL1細胞
FBHE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1781細胞、A2780/CP細胞、MHCC97L細胞
Lu-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LO2細胞、NCIH661細胞、MDAMB175細胞
NCIH1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS TE85細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞、HCC1833細胞
HeLa-229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293T/17細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、SP2/0 Ag-14細胞
Fortner's melanotic melanoma #3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4I細胞、AR4-IP細胞、NCI-H2347細胞
GP5d Thawing人結(jié)腸腺癌細胞系
AG06814-J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞
D-283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KALS1細胞、HCC1954 BL細胞、RA-FLSs細胞
D-283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KALS1細胞、HCC1954 BL細胞、RA-FLSs細胞
DHBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW900細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞、Hep 3B2_1-7細胞
HSAS4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 2058細胞、C8166細胞、MDA-MB-134VI細胞
NCI-SNU-668細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-BL6細胞、PATU-S細胞、L2細胞
HIEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04679細胞、SW1573細胞、RPMI2650細胞
WSU-HN13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8402細胞、H2073細胞、DAN-G細胞
HSC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞
Panc05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCPEpiC細胞、SW.620細胞、AtT20細胞
RL-952細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16細胞、BEND細胞、TE3A細胞
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