"MPC-5 Thawing小鼠腎足細胞系
細胞背景資料:腎足細胞;SV40轉(zhuǎn)化
細胞形態(tài):上皮細胞樣
MPC-5 Thawing小鼠腎足細胞系
細胞生長:貼壁
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MPC-5 Thawing小鼠腎足細胞系
細胞生長特性:貼壁
冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)取10ml培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
SW 900細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H295R-S1細胞、H1563細胞、Tb1.Lu細胞
HREC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1672細胞、J.E6-1細胞、PLC-PRF-5細胞
MDA-MB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-126細胞、NCI-H1184細胞、TW-039細胞
CHP 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC3.27細胞、RWPE-1細胞、Hs-611-T細胞
IEC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293-EBNA細胞、COR-L23細胞、ME-180細胞
Huh-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCM細胞、EAhy926細胞、MDAMB435S細胞
2V6.11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-Sf21AE細胞、NCIH1299細胞、WC00044細胞
JROECL21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OsA-CL細胞、HCMEC(BL12-H)細胞、EBC-1/original細胞
GalK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、HEB細胞、WiDr細胞
U-343細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR1-BL細胞、HCCC9810細胞、786-0細胞
LM TK negative細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1088細胞、P3J細胞、HR1K細胞
IHH-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE CA PJ34細胞、CEM-C1細胞、L 132細胞
SW 1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE12細胞、NB19細胞、R2C細胞
SUDHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-10 Attached細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、RGC-5細胞
NFS60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT-125細胞、NGEC細胞、RPMI 1846細胞
SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR8348細胞、BMSC/hBMSCs細胞、ARPE19細胞
WSU-HN13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8402細胞、H2073細胞、DAN-G細胞
HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞
K-562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GFP-Olig2細胞、Colo205細胞、H3255細胞
DB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGB細胞、NBL-3細胞、HEL299細胞
HBVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞
HBVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞
YES2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB175細胞、WM2664細胞、H-295R細胞
Hs940-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2228細胞、SNU-886細胞、DMS 79細胞
Capan 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞
HS-766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1353細胞、NCI-H2085細胞、C32r細胞
MPC-5 Thawing小鼠腎足細胞系
SUDHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-1細胞、OCI-Ly18細胞、LS123細胞
HIT-T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞
TE671細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU-Mel細胞、SK.MEL.28細胞、Y3.AG.1.2.3細胞
HDQ-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT.116細胞、A-673細胞、HIEC細胞
NCI H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF-21細胞、Human podocyte細胞、TE671/RD細胞
LC-2-Ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC 39細胞、HLFa細胞、WB-F344細胞
HS-940-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940-T細胞、WILL-2細胞、HSF2細胞
PLC8024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-174T細胞、KYSE30細胞、Panc3_27細胞
SuDHL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSKMC細胞、BE2M17細胞、NCIH3255細胞
GB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD-1細胞、RPVSMC細胞、MOLT3細胞
Hx-147細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLB 985細胞、MES-23.5細胞、PG-4細胞
Hep3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J-HR-1細胞、OCI-AML3細胞、IPI-2I細胞
HeLa/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320細胞、KATO 3細胞、L-6 myoblast細胞
Line 870 Emory University-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD841CoTr細胞、U343細胞、Wien-133細胞
HCC-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞
A 72細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞
Swiss 3T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02219D細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞、KM-12細胞
Hs746-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU 4475細胞、NCI-H2126細胞、KY-270細胞
Tsup-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCFSTTG1細胞、58F細胞、HCC-1954BL細胞
ME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE9細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、NCI-H2228細胞
SR-786細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-4細胞、EFM-192B細胞、SK-RC-52細胞
OsA-CL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞
HCC1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞
IR 983F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231 #4175細胞、Detroit-562細胞、HCT GEO細胞
Embryonic Bovine Tracheal cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCM460細胞、HNE2細胞、DMS 153細胞
HGBEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS-2B細胞、MGH-U1 (EJ)細胞、LNCaP C4-2B細胞
H-1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 863.T細胞、MCF 10A細胞、H-1238細胞
MN9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251n細胞、Vero from pool #76細胞、HAPI細胞
DU 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Lens-124細胞、McA-RH 8994細胞、U118-MG細胞
Hs600T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK1細胞、Hs832T細胞、U20-S細胞
T98-G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-28細胞、D341 Med細胞、OV1/P細胞
MCA 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞
CF PAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL(2)細胞、NCI-H841細胞、TE12細胞
MPC-5 Thawing小鼠腎足細胞系
H1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM134細胞、C166細胞、MCF/Adr細胞
WB-F344細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H211細胞、Kit225/K6細胞、WM239A細胞
B 95.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS20Y細胞、KBM5細胞、HFE-145細胞
F56 [Human neoplasm]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-11細胞、PANC-02-03細胞、TE-85 clone 5細胞
NCI-H510A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292 clone A141B1細胞、H209細胞、CL1.0細胞
C3H10T1/2CL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞
RCC10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801-95C細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞、MIO-M1細胞
AM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS-RA細胞、GLC-15細胞、HO1N1細胞
2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293A細胞、rUCMSCs細胞、NCM460細胞
SUM 102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H660細胞、BC-009細胞、SK-LU-1細胞
HT-29/CX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:231-luc細胞、PC-3/M細胞、HL60細胞
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