"CL-40 人結腸癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
CL-40 人結腸癌細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
貼壁細胞傳代實驗準備事項：將15mL離心管、T25細胞培養(yǎng)瓶、PBS緩沖液、移液管、電動移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒滅菌；細胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA從4℃冰箱中取出后，復溫至室溫，備用。貼壁細胞傳代實驗步驟：將準備好的培養(yǎng)基等物品用酒精消毒后放入安全柜中；從培養(yǎng)箱中取出待處理的細胞，在顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)；用酒精消毒培養(yǎng)瓶，放入安全柜中；輕輕吸去細胞上清；加入2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次，吸去上清；加入1mL(0.25%胰酶-0.02%EDTA)，輕輕晃勻、覆蓋所有細胞后，置于37℃培養(yǎng)箱靜置消化；消化1min左右，在顯微鏡下觀察細胞消化情況；消化完全后，加3ml完全培養(yǎng)基終止；按比例將細胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中；在顯微鏡下觀察傳代后的細胞密度及狀態(tài)；將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。注意事項：培養(yǎng)過程中需維持細胞處于對數(shù)生長期，80%左右即可傳代，傳代比例請參照說明書建議；消化時間不宜過長，大部分細胞回縮變圓并有少量細胞脫落即可中止消化，難消化的細胞可分次消化，每次時間不超過5min；培養(yǎng)過程中需要定期換液，一般細胞建議2~3天換液一次。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分 
CL-40 人結腸癌細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻模〖毎坏┟撀淙霊乙豪锬愫茈y再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
ST 486細胞系相關產品：HCEC-B4G12細胞、KLN 205細胞、BMF細胞 
PLB 985細胞系相關產品：SHI1細胞、OEC33細胞、FRH-0201細胞 
Hs895.T細胞系相關產品：BMU-S1細胞、D10細胞、H1395細胞 
Neuro2a細胞系相關產品：DKMG細胞、IPAM-WT細胞、H-1651細胞 
HUV-EC-C細胞系相關產品：B16/F0細胞、H1184細胞、H2444細胞 
Sp2/0-Ag14細胞系相關產品：SUDHL5細胞、OCI-Ly 8細胞、CEMO-1細胞 
NCI-H196細胞系相關產品：NIE-115細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、L615細胞 
Hs 940.T細胞系相關產品：CoC1細胞、TE10細胞、MEF (CF-1)細胞 
H-526細胞系相關產品：HMEC-1細胞、GM05384細胞、Mono-Mac-1細胞 
BAR-T細胞系相關產品：HEK-293F細胞、H22-H8D8細胞、CWR-22rv1細胞 
SJ-RH30細胞系相關產品：SCC-7細胞、ZR75-1細胞、HFB細胞 
H-2227細胞系相關產品：HT1197細胞、HUT 125細胞、J.E6-1細胞 
BCP1細胞系相關產品：M4e細胞、SK-CO-1細胞、IOSE29細胞 
MCA 38細胞系相關產品：MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞 
L 363細胞系相關產品：WEHI 3B細胞、MDCK.2細胞、LU451細胞 
McA-RH8994細胞系相關產品：LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞 
McA-RH8994細胞系相關產品：LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞 
H2030細胞系相關產品：Molm14細胞、CALU1細胞、L 1210細胞 
3-LL細胞系相關產品：CCD 966 SK細胞、SRS-82細胞、SW-954細胞 
Hmy.2 CIR細胞系相關產品：Balb/c3T3細胞、NE1細胞、KYSE 450細胞 
CL-40 人結腸癌細胞系
SUM 52PE細胞系相關產品：OKa-C-1細胞、HT 1376細胞、NCI-H2198細胞 
SW-1990細胞系相關產品：H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞 
P388D1細胞系相關產品：MCF7ADR細胞、LTEP-sm細胞、HCC-70細胞 
Kasumi-6細胞系相關產品：WEHI-3B細胞、HS578細胞、OVCA 420細胞 
3T3NIH細胞系相關產品：LX-2細胞、HCC1395細胞、OV1-P細胞 
MIA-PaCa-2細胞系相關產品：Dakiki細胞、HSC3細胞、HCPEpiC細胞 
Lec1細胞系相關產品：ChaGo-K-1細胞、Caco-2/BBe 1細胞、EOMA細胞 
NCIH740細胞系相關產品：95C細胞、NCI-H3255細胞、CCC-HHM-2細胞 
JM-1細胞系相關產品：RPMI No. 1846細胞、Clone Y-1細胞、H7721細胞 
Rin-M-5F細胞系相關產品：HuP-T3細胞、HCC-1806細胞、EOC-20細胞 
BEL-7404細胞系相關產品：CO115細胞、RPMI.8226細胞、High5細胞 
LNCaP-FGC細胞系相關產品：CORL26細胞、NCI-H250細胞、RA 1細胞 
SW-1990細胞系相關產品：H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞 
IAR20細胞系相關產品：SW 1222細胞、WIL2-S細胞、NCIH1573細胞 
HEC-251細胞系相關產品：GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞 
RWPE-2細胞系相關產品：C 643細胞、SF-539細胞、NT2D1細胞 
HOC-1細胞系相關產品：SCC 25細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、H-2023細胞 
SW1990細胞系相關產品：SNU1040細胞、CACO2細胞、C-4I細胞 
Madin-Darby Canine Kidney細胞系相關產品：U-251細胞、CCC-HEL-1細胞、RERF-LC-MS細胞 
P3X63Ag8.653細胞系相關產品：SW 48細胞、CMT-167細胞、Beta-TC-6細胞 
MLM細胞系相關產品：NCI-H1581細胞、NPA-87細胞、GM03320D細胞 
Swiss/3T3細胞系相關產品：Human Fetal Thymocyte-8810細胞、LL/2 (LLC1)細胞、NCI-H2085細胞 
Ramos(RA1)細胞系相關產品：IPEC-J2細胞、SK-Mel 2細胞、COLO320/DM細胞 
OCI AML2細胞系相關產品：MKN-45細胞、SUNE1細胞、GM00346B細胞 
OVCA-420細胞系相關產品：RIN-m5F細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞、Pa14C細胞 
WM 239A細胞系相關產品：WEHI 164 TC細胞、NCI-H1672細胞、JHH-2細胞 
MKN74細胞系相關產品：AtT20細胞、NCI-H838細胞、VeroC1008細胞 
OVCA432細胞系相關產品：KU 19-19細胞、REC-1細胞、H-838細胞 
Hs729細胞系相關產品：Panc 08.13細胞、HONE1細胞、MC3T3-E細胞 
SK-MEL-31細胞系相關產品：CHO cell clone K1細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞、PC 61.5.3細胞 
Jurkat77細胞系相關產品：HCEC細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞、H766T細胞 
Hs 604.T細胞系相關產品：H2073細胞、L(TK-)細胞、U266-B1細胞 
IOSE-80細胞系相關產品：mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、LO2細胞、H1781細胞 
HOPC細胞系相關產品：UACC-893細胞、Normal Rat Kidney細胞、H209細胞 
HT-1080細胞系相關產品：AMJ2C8細胞、Capan-2細胞、U266細胞 
CDC/EU.HMEC-1細胞系相關產品：NCIH2227細胞、SKN-SH細胞、NCI-H209細胞 
NS1細胞系相關產品：H-889細胞、OVCAR-5細胞、AN3細胞 
Panc327細胞系相關產品：KPL-1細胞、BEL-7402細胞、COLO-320HSR細胞 
G361-mel細胞系相關產品：KBM-5細胞、TK-1細胞、REC 1細胞 
MH-S細胞系相關產品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、PC12(高分化)細胞、KE39細胞 
NCI-H2073細胞系相關產品：Gerner 7666細胞、HS-68細胞、B35細胞 
CL-40 人結腸癌細胞系
NOZAWA細胞系相關產品：ME180細胞、NCI-SNU-878細胞、HepaRG細胞 
Karpas-299細胞系相關產品：HCM細胞、SHIN-3細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞 
H647細胞系相關產品：DMS-273細胞、FRhK4細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞 
Mono-Mac-1細胞系相關產品：ssMCF7細胞、ATC241細胞、Normal Rat Kidney細胞 
HSC-4細胞系相關產品：RPMC細胞、COLO 679細胞、SK-N-BE細胞 
TCC-PAN2細胞系相關產品：Suzhou Human Glioma-44細胞、LMH細胞、IOSE-Van細胞 
NCI-H661細胞系相關產品：MDA-MB-231細胞、NCI H295R細胞、RetroPack PT67細胞 
TK-1細胞系相關產品：TM3細胞、PC-3M細胞、GLC-15細胞 
SW900細胞系相關產品：NCI-H510細胞、HCA7細胞、BxPC-3細胞 
HOP-62細胞系相關產品：LK2細胞、SK MEL 28細胞、WM-266-4細胞 
ONS-76細胞系相關產品：3D4/21細胞、LS1034細胞、SW48細胞 
Hs888T細胞系相關產品：C4 I細胞、SBC-5細胞、OCI-AML4細胞 
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