"NCI-H1975細胞：人肺腺癌細胞系
細胞背景資料：這株細胞于１９８８年七月建株。組織提供者是一位非吸煙人士。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結(jié)】支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細胞培養(yǎng)，無任何不良反應(yīng)。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話，可以增加細胞的種板密度，以提高細胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié)，這里說一些我個人的經(jīng)驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入，僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經(jīng)驗，而忽視試劑，溶液尤其是細胞的質(zhì)量，后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
MGHU3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT.4細胞、WM-115細胞、NCIH1963細胞
HB 611細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞
95C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT474細胞、Lu-99A細胞、UO.31細胞
C22 (Clara)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192C細胞、HCC1833細胞、NCI/ADRRES細胞
LWnt3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2195細胞、NCI-H2330細胞、SGC-7901細胞
NBLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEF細胞、RT-BM 1細胞、RK 13細胞
CEM T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL5細胞、Douglas Foster-1細胞、NPA 87細胞
HTori-3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7405細胞、TEC細胞、P3HR-1細胞
LWnt3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2195細胞、NCI-H2330細胞、SGC-7901細胞
TE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO_AS45細胞、SNB-19細胞、BrCL18細胞
HCE-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-8_13細胞、CBRH-7919細胞、HTh-74細胞
SKNEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuLEC-5a細胞、KM-12細胞、786-O細胞
Hep2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-660細胞、hFOB1.19細胞、LICR-LON-HN6-R細胞
Y3.AG.1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Fetal Lung-6細胞、MES-SA/Dx5細胞、TALL 1細胞
EFO-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-802細胞、NCIH1092細胞、PNT1A細胞
253J B-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS Cl #5細胞、HEC-1A細胞、H838細胞
253J B-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS Cl #5細胞、HEC-1A細胞、H838細胞
Buffalo Rat Liver-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRCLCD細胞、Hs940.T細胞、Verda reno細胞
Mel624細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH847細胞、CAL 148細胞、SK Mel 24細胞
HIT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52細胞、PLA801C細胞、MEL-526細胞
HEK 293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs870T細胞、KYSE510細胞、PLA801-95C細胞
HEP-3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-2Z細胞、OCLY8細胞、KMM-1細胞
Tb1Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-774細胞、SUM-52細胞、BE(2)C細胞
Hs 746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：APRE-19細胞、KHYG1細胞、EnCa1細胞
CoC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324細胞、L540細胞、74Int細胞
L-Wnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E細胞、A-172細胞、RPMI-1788細胞
PC-9/GR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞
BC-025細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos G6.C10細胞、Human Microglia Clone 3細胞、NCI-H748細胞
SEG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H929細胞、MDA-435細胞、Jurkat E6細胞
RCM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-82細胞、RMS 1598細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞
OVCA432_Bast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-A549細胞、130-T細胞、SW-1271細胞
U-87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341Med細胞、B16/BL6細胞、TT細胞
U2932細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL95細胞、Rat-1細胞、HUT-226細胞
P-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF/CD18細胞、184A1細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞
SCLC21H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM-1A細胞、Balb/c3T3細胞、MDA-MB-231 #4175細胞
rHSC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品：624細胞、Onda 11細胞、Panc327細胞
OUMS23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA795細胞、WEHI-164細胞、Panc 03.27細胞
3T3-442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-MeWo細胞、PANC 327細胞、RKO-AS45-1細胞
M2-10B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 64細胞、IOSE-Van細胞、H522細胞
Nthy-ori 3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL 1-5細胞、LLC-PK(1)細胞、IPEC1細胞
GCT0404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS766T細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、SL1細胞
Hs-611-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-202細胞、H-1618細胞、Sol8細胞
HCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD293細胞、AG 9細胞、WIL2-S細胞
MHCC97細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK N SH細胞、BPH1細胞、LN299細胞
MCF/Adr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)M-17細胞、BEL-7404細胞、CCC-ESF-1細胞
CCRF/CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-1細胞、PL 5細胞、DHBE細胞
NK92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞
KYSE0030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hOMF細胞、P31/Fujioka細胞、Human Epithelioma-2細胞
CA-46細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-95-8細胞、Daoy細胞、9L細胞
HSF2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF-7細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、NCI-H2196細胞
MMVECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE 280細胞、MOLT16細胞、JIMT1細胞
HPAF-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞
SNU-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1648細胞、H-460細胞、TE-3A細胞
L-Wnt3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hk-2細胞、Hs1.Tes細胞、MUGCHOR1細胞
XuanWei Lung Cancer-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM 2132細胞、MFE 280細胞、R D細胞
GM02132C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-8348細胞、GLC82細胞、MC57G細胞
H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT 2細胞、OV-CA 432細胞、SF 767細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞
293 EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu 3細胞、SUM159細胞、B 95-8細胞
COLO684細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP5d細胞、MDA134細胞、SNUC1細胞
NCI-SNU-1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-2細胞、NIE 115細胞、H-1417細胞
KM12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Farage Original Line細胞、NCI-H165細胞、SW-839細胞
P3 88 D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-14細胞、SF-539 BT細胞、MES13細胞
Hs 766.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH838細胞、HPMC細胞、HT 1376.T細胞
LY-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ1細胞、A498細胞、Colon-26細胞
Y1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaSki細胞、28SC細胞、LS-123細胞
G 292 Clone A 141B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-HEECs細胞、COV504細胞、X63-AG 8.653細胞
H-2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT116/L細胞、LoVo細胞、H1563細胞
L- cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR 106細胞、32D CL3細胞、SK MEL-28細胞
ETCC007細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP303細胞、Panc 08.13細胞、RCS細胞
TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-1155細胞、CAL120細胞、SK-N-BE2C細胞
HCC-1588細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2087細胞、Swiss-3T3細胞、KRCY細胞
95C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT474細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、CA-46細胞
A2780/CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-4B細胞、MILE SVEN1細胞、CEM C7細胞
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