"PA317細胞：逆轉錄病毒包被的NIH3T3細胞系
細胞背景資料：胚胎；成纖維細胞；NIH Swiss
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁
造成實驗室細胞污染常見情況總結：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應調節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞傳代的一般方法：開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細胞(單層細胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細胞，挑選生長狀態(tài)良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細胞；先用PBS洗液沖洗細胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
Panc 1細胞系相關產(chǎn)品：PA317細胞、TE5細胞、OCI-Ly01細胞
H1355細胞系相關產(chǎn)品：NBL-3細胞、SN-12C細胞、NCI-H250細胞
MZCRC1細胞系相關產(chǎn)品：PNT-1A細胞、YD15細胞、HLF-a細胞
CCD841CoN細胞系相關產(chǎn)品：Molm 14細胞、Hep2細胞、Hs742T細胞
OCI-Ly 19細胞系相關產(chǎn)品：SK-HEP-1細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、J 82細胞
COLO 320 HSR細胞系相關產(chǎn)品：DR2R1610細胞、E0771細胞、H-498細胞
J111細胞系相關產(chǎn)品：NCIH650細胞、Hs819T細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞
A549-Taxol細胞系相關產(chǎn)品：MLM細胞、KYSE410細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞
OVMANA細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL-5細胞、LIXC-002細胞、PA317細胞
MDA453細胞系相關產(chǎn)品：EMT-6細胞、CEM clone 7細胞、P3/X63-Ag8細胞
NL20細胞系相關產(chǎn)品：RIN m5F細胞、MLFC細胞、LTEP-sm 1細胞
58F細胞系相關產(chǎn)品：BNL CL2細胞、H1395細胞、NCI-H2135細胞
KY70細胞系相關產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 4細胞、SNU398細胞、Malme-3M細胞
KG1細胞系相關產(chǎn)品：BE2M17細胞、U-87MG ATCC細胞、Hs 766T細胞
COLO 824細胞系相關產(chǎn)品：KY-270細胞、NP-69細胞、HEK293-EBNA細胞
Hs-600-T細胞系相關產(chǎn)品：H-1781細胞、TMK1細胞、FM88細胞
BE(2)M-17細胞系相關產(chǎn)品：P3X63 AG8-653細胞、GM00637B細胞、50.B1細胞
H3396細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1693細胞、KYSE 410細胞、WSU-DLCL(2)細胞
OVCAR432細胞系相關產(chǎn)品：LU-65M細胞、Malme-3M細胞、H-2030細胞
SNUC2B細胞系相關產(chǎn)品：PaTu 8988 S細胞、H-727細胞、C-28/I2細胞
LK2細胞系相關產(chǎn)品：H3396細胞、PaTu 8988 S細胞、PC-3M 2B4細胞
JM-1細胞系相關產(chǎn)品：RPMI No. 1846細胞、Clone Y-1細胞、H7721細胞
DiFi細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL10細胞、MLM細胞、8305C細胞
T-CAM2細胞系相關產(chǎn)品：SUM-52PE細胞、Clone Y1細胞、H1993細胞
HPF細胞系相關產(chǎn)品：2B4-L細胞、SVHUC細胞、Hepatoma-22細胞
SV-HUC細胞系相關產(chǎn)品：AD-293細胞、231-luc細胞、NCM356細胞
C33-A細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly03細胞、A-498細胞、NGP細胞
U-CH1細胞系相關產(chǎn)品：CAL33細胞、Rin-M-5F細胞、CT26WT細胞
SHZ-88細胞系相關產(chǎn)品：PF382細胞、NCIH1648細胞、Metastatic Variant 522細胞
Hs819.T細胞系相關產(chǎn)品：SKO-007細胞、H-524細胞、NCIH2073細胞
SN4741細胞系相關產(chǎn)品：Tb1.Lu細胞、Tn-5細胞、Fetal Human Lens-124細胞
HCC1833細胞系相關產(chǎn)品：HBL-100細胞、NGEC細胞、HUT-125細胞
Japanese Tissue Culture-39細胞系相關產(chǎn)品：HCT-8細胞、Human Embryo Lung-1細胞、LLC-PK(1)細胞
COLO 741細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H820細胞、hs 68細胞、LA-795細胞
COLO-824細胞系相關產(chǎn)品：Med 341細胞、Rat Skin 1細胞、M1細胞
WM 2664細胞系相關產(chǎn)品：TE-9細胞、SK-MEL24細胞、MV411細胞
J 82細胞系相關產(chǎn)品：RK-13細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、REC細胞
ES2細胞系相關產(chǎn)品：OCI AML5細胞、ChaGo-K1細胞、32D/cl3細胞
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞系相關產(chǎn)品：FU-97細胞、OCM-1細胞、WM-451Lu細胞
SK-N-BE(2)-M17細胞系相關產(chǎn)品：MAntle cell VERona-1細胞、Mono-Mac-1細胞、J111細胞
NCI-H1836細胞系相關產(chǎn)品：GRSL細胞、WM 266-4細胞、Jurkat 77細胞
Mouse podocyte細胞系相關產(chǎn)品：PANC 813細胞、MEC-1細胞、L5178Y-R細胞
RBL-1細胞系相關產(chǎn)品：RBVEC細胞、Hs 604.T細胞、GM00215細胞
SKNO1細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-175VII細胞、HCC-1937細胞、CT26細胞
Ly7細胞系相關產(chǎn)品：CBRH-7919細胞、H-748細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞
LNCaP-FGC細胞系相關產(chǎn)品：CORL26細胞、NCI-H250細胞、RA 1細胞
P3-NS1/1Ag 4.1細胞系相關產(chǎn)品：SIRC細胞、VERO C 1008細胞、H-2122細胞
HRA-19細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞
OVCAR-432細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE細胞、SKMEL24細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞
HOMEC細胞系相關產(chǎn)品：SK-MES細胞、KYSE-510細胞、BEL 7404細胞
SGC-7901/DDP細胞系相關產(chǎn)品：CCD-841CoTr細胞、DHL5細胞、LLCPK1細胞
A375mel細胞系相關產(chǎn)品：SKLMS-1細胞、SGC-7901細胞、JHH2細胞
PaTu 8988s細胞系相關產(chǎn)品：22Rv1細胞、HK2細胞、NCTC 929細胞
CL-34細胞系相關產(chǎn)品：MDA134細胞、IOSE-29細胞、Hep 3B細胞
KYSE520細胞系相關產(chǎn)品：TE-85細胞、Lewis lung carcinoma細胞、LC-2 ad細胞
L-5178-Y-R細胞系相關產(chǎn)品：WPE-int細胞、SW260細胞、OUMS23細胞
TFK-1細胞系相關產(chǎn)品：PNT1A細胞、MES-SA-Dx5細胞、MDA PCa 2b細胞
KYSE-150細胞系相關產(chǎn)品：BJA-B細胞、74Int細胞、Ly1細胞
Pa14C細胞系相關產(chǎn)品：DLD 1細胞、HL7702細胞、RPMI no. 8226細胞
3T3細胞系相關產(chǎn)品：Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞
KPNRTBM1細胞系相關產(chǎn)品：32D clone3細胞、H 9細胞、CP-70細胞
SIRC細胞系相關產(chǎn)品：YD-15細胞、RPE-hTERT細胞、NIH 3T3細胞
LL/2 (LLC1)細胞系相關產(chǎn)品：HeLa229細胞、ROS 17/2.8細胞、LAN6細胞
SF17細胞系相關產(chǎn)品：HCC2157細胞、OCI-Ly3細胞、SK-N-BE-2細胞
H1869細胞系相關產(chǎn)品：PA12細胞、SW900細胞、H283細胞
OCI-Ly 19細胞系相關產(chǎn)品：SK-HEP-1細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、J 82細胞
SCL1細胞系相關產(chǎn)品：NCTC clone 1469細胞、HTR-8細胞、RWPE1細胞
SK-ML2細胞系相關產(chǎn)品：COR L279細胞、Sp2/0-Ag14細胞、J 111細胞
KY70細胞系相關產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 4細胞、SNU398細胞、Malme-3M細胞
A-2058細胞系相關產(chǎn)品：U-2-OS細胞、MC-3T3細胞、PK15細胞
LNCaP-Clone-FGC細胞系相關產(chǎn)品：H1954細胞、NCIH522細胞、H9c2細胞
H1672細胞系相關產(chǎn)品：MIHA細胞、LS 123細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞
MZCRC1細胞系相關產(chǎn)品：PNT-1A細胞、PANC 1005細胞、U-251MG細胞
Bac1 2F5細胞系相關產(chǎn)品：SRA01/04 (HLE)細胞、H-2087細胞、H187細胞
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