"WiDr Cell|人結(jié)直腸癌細胞

細胞背景資料：結(jié)腸癌；女性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】１)掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

SW948細胞類似產(chǎn)品：：CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞

HT-3細胞類似產(chǎn)品：：TE353.SK細胞、BEL 7405細胞、SJRH-30細胞

Bat lung細胞類似產(chǎn)品：：LTEP-sm細胞、SW 1271細胞、rRMECs細胞

H1666細胞類似產(chǎn)品：：Hs 888.Lu細胞、D-341 Med細胞、MB157細胞

MCF-7ADR細胞類似產(chǎn)品：：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、RPMI #1846細胞、CoC1細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

WiDr Cell|人結(jié)直腸癌細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做HAO標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。

ATN-1細胞類似產(chǎn)品：：Kit 225細胞、EMT-6細胞、H1915細胞

149 PT細胞類似產(chǎn)品：：Hs 578T細胞、H-9細胞、SNU878細胞

IMR-90細胞類似產(chǎn)品：：LC1細胞、WILL2細胞、MIN6細胞

SV-HUC細胞類似產(chǎn)品：：AD-293細胞、231-luc細胞、NCM356細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

ATN-1細胞類似產(chǎn)品：：Kit 225細胞、EMT-6細胞、H1915細胞

149 PT細胞類似產(chǎn)品：：Hs 578T細胞、H-9細胞、SNU878細胞

IMR-90細胞類似產(chǎn)品：：LC1細胞、WILL2細胞、MIN6細胞

SV-HUC細胞類似產(chǎn)品：：AD-293細胞、231-luc細胞、NCM356細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞傳代比例：對于有限細胞系，傳代時以二、四、八或十六倍(傳代比率分別是2、4、8和16)降低細胞密度，計算群體倍增數(shù)更容易(即分別是傳代比率2對應(yīng)1次倍增，4對應(yīng)2次倍增，8對應(yīng)3次倍增，16對應(yīng)4次倍增)；例如，一傳八的培養(yǎng)物需要3次倍增才能達到原來相同的細胞密度。脆弱的或生長緩慢的細胞系通常一傳二，而有活力的，生長快速的細胞系可以一傳八，甚至一傳十六。有些連續(xù)細胞系可一傳五十或一傳100。一旦細胞系變?yōu)檫B續(xù)細胞系(通常經(jīng)過150次或200次倍增以上)，細胞濃度是主要參數(shù)，培養(yǎng)濃度應(yīng)降至10(4)/ml--10(5)/ml之間。可選擇傳代間隔合適的傳代比率或稀釋度，或許為1周或2周，同時要保證：細胞密度不可稀釋過低，使其延遲期合理(在24小時以內(nèi))，可重新進入生長周期；而且在下次傳代前不進人平臺期。

751-NA細胞類似產(chǎn)品：：EFO27細胞、HeLa.S3細胞、138MG細胞

OAW 42細胞類似產(chǎn)品：：RMG-I細胞、ME-180細胞、RPMI no 8226細胞

GL-261細胞類似產(chǎn)品：：Hs-746T細胞、NCI-H1623細胞、CCLP-1細胞

HCC44細胞類似產(chǎn)品：：NCIH358細胞、SF295細胞、ME1細胞

H250細胞類似產(chǎn)品：：VM-CUB1細胞、RERF-LC-MS細胞、NU-GC-2細胞

HCC-827細胞類似產(chǎn)品：：MCF-7B細胞、NCI-H1341細胞、SW 527細胞

TE-13細胞類似產(chǎn)品：：Jurkat clone A3細胞、HOS (TE85)細胞、NRK細胞

MNNG/HOS Cl #5細胞類似產(chǎn)品：：Chinese Hamster Lung細胞、CHP-212細胞、Hs 895 T細胞

NCI-H1522細胞類似產(chǎn)品：：H441細胞、GM03671細胞、SK-HEP-1細胞

CA922細胞類似產(chǎn)品：：MOLT4細胞、Mv.1.Lu細胞、SK-N-SH細胞

WiDr Cell|人結(jié)直腸癌細胞

NCI522細胞類似產(chǎn)品：：MDA-kb2細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、OCI-LY-19細胞

BC-020細胞類似產(chǎn)品：：C-8161細胞、Vero E6細胞、B-16細胞

TE-4細胞類似產(chǎn)品：：GOS-3細胞、Hs 675.T細胞、SNT-8細胞

H446細胞類似產(chǎn)品：：SUIT 2細胞、OV-CA 432細胞、SF 767細胞

A-1847細胞類似產(chǎn)品：：SL-29細胞、HuTu-80細胞、6-T CEM細胞

PL-9細胞類似產(chǎn)品：：IOSE-29細胞、NCIH508細胞、NPC-039細胞

PL-9細胞類似產(chǎn)品：：IOSE-29細胞、NCIH508細胞、NPC-039細胞

H4細胞類似產(chǎn)品：：M1細胞、RPMI-2650細胞、SNU761細胞

Spodoptera frugiperda clone 9細胞類似產(chǎn)品：：IPLB-Sf21細胞、VP 267細胞、KBM5細胞

brain-derived Endothelial cells.3細胞類似產(chǎn)品：：NH-6細胞、RPMI 7951細胞、OCI-Ly 3細胞

PE/CA-PJ-34細胞類似產(chǎn)品：：SK-OV-433細胞、SUM52細胞、S-16細胞

SF539細胞類似產(chǎn)品：：K562細胞、SJ-Rh 30細胞、3T3NIH細胞

BT325細胞類似產(chǎn)品：：QGY細胞、J82細胞、HuH7細胞

SACC-83細胞類似產(chǎn)品：：LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞

Human Kidney-2細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1975細胞、B16-F10細胞、H-1876細胞

HSKMC細胞類似產(chǎn)品：：C8166-CD4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、SIRC細胞

293GP細胞類似產(chǎn)品：：BT.549細胞、H-23細胞、R3/1細胞

RL95細胞類似產(chǎn)品：：MMVECs細胞、P30/0HK細胞、OCI/AML-2細胞

CCD-18Co細胞類似產(chǎn)品：：TW 01細胞、NCI-157細胞、A2780 CP70細胞

SUM149PT細胞類似產(chǎn)品：：HCC1954細胞、hTERT RPE1細胞、HEK293-F細胞

RFL-6細胞類似產(chǎn)品：：SNUC2B細胞、PG13細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞

MOLM-14細胞類似產(chǎn)品：：C-643細胞、OCI-Ly07細胞、PANC0203細胞

CCRF/CEM/0細胞類似產(chǎn)品：：H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞

LS123細胞類似產(chǎn)品：：HS-68細胞、A-172 MG細胞、HSMC細胞

MNNG細胞類似產(chǎn)品：：I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞

NCI-H524細胞類似產(chǎn)品：：DHL8細胞、IMR32細胞、UPCI-SCC090細胞

CaSki細胞類似產(chǎn)品：：HSF2細胞、EL 4細胞、KMS26細胞

HSC2細胞類似產(chǎn)品：：HUT125細胞、HEC251細胞、NKM-1細胞

CT26細胞類似產(chǎn)品：：H-EMC-SS細胞、GM03569B細胞、H-526細胞

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B16-F10-BL6細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR.4細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NP69細胞

HuPT4細胞類似產(chǎn)品：：MC-38細胞、Loucy細胞、SJSA1細胞

NEC8細胞類似產(chǎn)品：：EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Rca-B細胞、KYSE410細胞

E.G7-OVA細胞類似產(chǎn)品：：EOC20細胞、CAKI 1細胞、AD-293細胞

LM-TK-細胞類似產(chǎn)品：：RPTC細胞、ID8細胞、GC-2spd(ts)細胞

SKMEL2細胞類似產(chǎn)品：：Tca-83細胞、SW1353細胞、GM04679細胞

HSC-1細胞類似產(chǎn)品：：293 H細胞、HOP 62細胞、WI-38細胞

8305C_1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2087細胞、P-815細胞、H345細胞

8305C_1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2087細胞、P-815細胞、H345細胞

HCC-1419細胞類似產(chǎn)品：：Adeno 293細胞、MCFs細胞、INS-1E細胞

SUDHL4細胞類似產(chǎn)品：：3T3-Swiss albino細胞、MPC-11細胞、GM0637細胞

EBC-1/original細胞類似產(chǎn)品：：Caki-2細胞、ACC-3細胞、AN-3細胞

Granta 519細胞類似產(chǎn)品：：HET-1A細胞、J 774A.1細胞、Central Adrenergic TH-expressing a細胞

CORL51細胞類似產(chǎn)品：：H1299細胞、CF Pac1細胞、Hs746-T細胞

HEK293T/17細胞類似產(chǎn)品：：SKNSH細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞、SUM149PT細胞

NMC-G1細胞類似產(chǎn)品：：MB157細胞、HLCL9B10細胞、PanC1細胞

U-138-MG細胞類似產(chǎn)品：：SK-GT-2細胞、HNSC細胞、RIN-m5F細胞

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