"A-375 Cells(贈送Str鑒定報告)|人惡性黑色素瘤細胞
細胞背景資料:A375源自一位54歲女性,是Giard DJ等人建立的一系列細胞株中的一株。該細胞可在免疫抑制小鼠上成瘤,在瓊脂上形成克隆。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
養(yǎng)了幾年細胞,說一點自己培養(yǎng)細胞方面的看法:1)培養(yǎng)細胞前,可以看看細胞點說明書,包括細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等;2)不同細胞生長周期不同,有的生長很快,比如說MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經足夠了,有的又是別慢,等的人心焦,BT474就是,傳代是一分二,復蘇起始的時候兩周多才能長滿,所以就要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索了;3)對于嬌弱的細胞,就得細心呵護了,胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉速和時間,每天都要去看一下細胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況;4)凍存細胞復蘇后第二天ZuiHAO更換一次培養(yǎng)基;5)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次;6)養(yǎng)細胞Zui大的教訓:不能偷懶!細胞虐我千百遍,我待細胞如初戀。1)不管買的細胞、惠贈的細胞,剛拿到手趕緊做兩件事:檢測是否有支原體污染; 迅速擴增凍存;2)發(fā)現有污染迅速處理掉,別是當你養(yǎng)了很多種細胞時; 細菌污染,真菌污染很容易發(fā)現,支原體污染的話,細胞會長的慢,買個支原體檢測的kit定期檢測一下;3)傳代細胞日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸;4)細胞的傳代一定要規(guī)律,保持相同的confluency和傳代時間間隔,不要隨心所欲或者拖延;5)注意個人衛(wèi)生。
細胞生長:貼壁
H8細胞類似產品::SNU-354細胞、HCC-78細胞、Jurkat Clone E6-1細胞
LC-2 ad細胞類似產品::C17.2細胞、IMR-32細胞、SMA 560細胞
HEL9217細胞類似產品::Kato-III細胞、H1836細胞、TE 85.T細胞
H-157細胞類似產品::U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞
SuDHL 10細胞類似產品::Madin-Darby Canine Kidney細胞、CATHa細胞、SK-MEL 28細胞
A-375 Cells(贈送Str鑒定報告)|人惡性黑色素瘤細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)過程中,總是會出現各種意想不到的問題,一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍,我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法,希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助:1)觀察細胞狀態(tài):貼壁細胞密度達到85-90%,即可以細胞凍存形式進行保藏,拍照,記錄細胞狀態(tài);2)細胞清洗:培養(yǎng)皿表面消毒后,轉移至生物安全柜中,去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液,加入12mlPBS,輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞,隨后吸除PBS清洗液;3)細胞消化:將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中,完全覆蓋細胞,置于顯微鏡下觀察(期間禁止搖晃培養(yǎng)皿),當細胞剛開始脫落時,立即轉移至生物安全柜中,除去大部分胰酶,剩余約0.5ml胰酶,轉移至培養(yǎng)箱內繼續(xù)消化,每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài),至細胞成流沙狀完全脫落,轉移至生物安全柜中,加入12ml完全培養(yǎng)基,終止消化;4)細胞離心:將終止消化后的細胞懸液吹打均勻,吸取至15ml離心管中,1000r/min(110g),離心3min;5)細胞凍存:離心后去除細胞上清液,按照凍存細胞量5*10^5/ml,吸取凍存液重懸細胞沉淀,吹打均勻后分裝至相應的凍存管中,進行凍存;6)細胞保藏:凍存管做HAO標記,放至程序降溫盒中,于4℃冰箱放置30min,轉移至-80℃超低溫冰箱過夜,將過夜后的凍存細胞轉移至液氮中保藏。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
NCI-H740細胞類似產品::LA-N-6細胞、AM細胞、Panc_08_13細胞
CF-PAC1細胞類似產品::NCIH2452細胞、P30/Ohkubo細胞、NCC-IT細胞
P3/NS1/1-Ag4.1細胞類似產品::H2444細胞、IR 983F細胞、LC1細胞
SNU-869細胞類似產品::P 3 HR 1細胞、Uhth-74細胞、T-98細胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞類似產品::SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
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細胞生長特性:貼壁
UCW 100細胞類似產品::RPTEC/TERT 1細胞、SW839細胞、TCam 2細胞
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SKRC-42細胞類似產品::H-1618細胞、Ra No. 1細胞、NK-92MI細胞
SK-ES1細胞類似產品::HS-5細胞、PSN1細胞、PFSK1細胞
CCD-112 CoN細胞類似產品::266 Bl細胞、H211細胞、Panc-02細胞
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數生長期的細胞,在凍存前一天ZuiHAO換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記HAO細胞名稱和凍存日期,同時作HAO登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數);4)將裝HAO細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐)ZuiHAO;或者可以在4℃,2h;然后轉到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,ZuiHAO取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項:1.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈,消毒半小時以上。2.進入凈化室前先關閉紫外燈,打開超凈臺風機,等待30min以上,以排盡臭氧。3.穿HAO隔離衣,戴HAO口罩,帽子。4.風淋2分鐘。5.0.1%水泡手,擦干。6.點燃酒精燈;超凈臺內應避免放入過多的物品;使用的吸管,滴管,試管,培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。7.打開各類瓶蓋前先過火,以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰,鑷子使用前應經火焰燒灼。8.水平式風機的超凈臺,應使瓶口斜置,應盡量避免瓶口敞開直立。9.同一根吸管或滴管不應連續(xù)用于幾個不同的細胞系;吸取培養(yǎng)基的吸管應離開培養(yǎng)瓶或試管口0.5cm,避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口;以防止細胞系的互相混雜污染。10.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體,立即用酒精棉球擦凈。11.操作完畢后恢復工作臺面。
MDA-MB 361細胞類似產品::Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、HUASMC細胞、SF-126細胞
2008細胞類似產品::T241細胞、1301細胞、SK-Col-1細胞
IAR-20細胞類似產品::LM1細胞、VA-ES-BJ細胞、BE(2)-M17細胞
CWR22R細胞類似產品::EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞
SK-Col-1細胞類似產品::H-1838細胞、NIE-115細胞、TYK-nu細胞
CL 1-5細胞類似產品::PANC-1細胞、H-1563細胞、IBMF-7細胞
D-341Med細胞類似產品::MT2細胞、hTERT-HPNE細胞、RPMI #8226細胞
SUP T1細胞類似產品::BT-325細胞、MT-2細胞、SKNF1細胞
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Tu-686細胞類似產品::HEK-AD 293細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、ROS 17/2.8細胞
Kit 225細胞類似產品::NCC-IT細胞、MC3T3-L1細胞、NFHIOSE-29細胞
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A 253細胞類似產品::P31 FUJ細胞、HFLS-RA細胞、FOXNY細胞
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CTLL(2)細胞類似產品::KU-19-19細胞、SLMT-1細胞、MC9細胞
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CTLL-2細胞類似產品::M14細胞、CemT4細胞、KLM-1細胞
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NIH 3T3細胞類似產品::AR42J細胞、KYSE-150細胞、RPMI-2650細胞
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SKM-1細胞類似產品::HGMC細胞、GM00637H細胞、L cells細胞
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Caki2細胞類似產品::BE2C細胞、OKT 3細胞、CAL-78細胞
MCF12A細胞類似產品::EST50細胞、NCI-SNU-C2B細胞、GC-2細胞
WM-239A細胞類似產品::KYSE 410細胞、BRL-3A細胞、Mel-624細胞
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Gejiu Lung Carcinoma-82細胞類似產品::NCI-H1395細胞、87 MG細胞、OCILY-3細胞
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RN細胞類似產品::SCC-4細胞、4T1細胞、NCI-H1963細胞
A-375 Cells(贈送Str鑒定報告)|人惡性黑色素瘤細胞
Malme3M細胞類似產品::NCIH1993細胞、MDCK2細胞、HEP3B2細胞
PL-11細胞類似產品::PA1細胞、RINm-5F細胞、B 95.8細胞
CLL-CII細胞類似產品::SW13細胞、H-441細胞、D341Med細胞
HEK AD293細胞類似產品::P3-X63.Ag8.653細胞、C918細胞、SF-767細胞
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C22細胞類似產品::OVCAR 420細胞、Ca759細胞、NCIH1417細胞
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上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。