包裝規(guī)格:
1g in glass bottle
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
Retapamulin(SB-275833)是局部抗生素,能結(jié)合金黃色葡萄球菌和大腸桿菌核糖體,Kd為3 nM。
儲(chǔ)備液保存:
-80°C, 6 months; -20°C, 1 month
體內(nèi)實(shí)驗(yàn):
1、請(qǐng)依序添加每種溶劑:?10% DMSO→40%?PEG300→5%?Tween-80→45% saline
Solubility: ≥ 2.75 mg/mL (5.31 mM); Clear solution
此方案可獲得 ≥ 2.75 mg/mL (5.31 mM,飽和度未知) 的澄清溶液。
以 1 mL 工作液為例,取 100 μL 27.5 mg/mL 的澄清 DMSO 儲(chǔ)備液加到 400 μL PEG300 中,混合均勻;向上述體系中加入50 μL Tween-80,混合均勻;然后繼續(xù)加入 450 μL生理鹽水定容至 1 mL。
2、請(qǐng)依序添加每種溶劑:?10% DMSO→90% (20%?SBE-β-CD?in saline)
Solubility: ≥ 2.75 mg/mL (5.31 mM); Clear solution
此方案可獲得 ≥ 2.75 mg/mL (5.31 mM,飽和度未知) 的澄清溶液。
以 1 mL 工作液為例,取 100 μL 27.5 mg/mL 的澄清 DMSO 儲(chǔ)備液加到 900 μL?20% 的 SBE-β-CD 生理鹽水水溶液中,混合均勻。
3、請(qǐng)依序添加每種溶劑:?10% DMSO→90%?corn oil
Solubility: ≥ 2.75 mg/mL (5.31 mM); Clear solution
此方案可獲得 ≥ 2.75 mg/mL (5.31 mM,飽和度未知) 的澄清溶液,此方案不適用于實(shí)驗(yàn)周期在半個(gè)月以上的實(shí)驗(yàn)。以 1 mL 工作液為例,取 100 μL 27.5 mg/mL 的澄清 DMSO 儲(chǔ)備液加到 900 μL玉米油中,混合均勻。
<1mg/ml表示微溶或不溶。
普西唐提供的所有化合物濃度為內(nèi)部測(cè)試所得,實(shí)際溶液度可能與公布值有所偏差,屬于正常的批間細(xì)微差異現(xiàn)象。
請(qǐng)根據(jù)產(chǎn)品在不同溶劑中的溶解度選擇合適的溶劑配制儲(chǔ)備液;?旦配成溶液,請(qǐng)分裝保存,避免反復(fù)凍融造成的產(chǎn)品失效。
體外研究:
Retapamulin是一種蛋白質(zhì)合成的有效抑制劑,對(duì)紅霉素敏感的大腸桿菌細(xì)胞制備的裂解物,IC50為0.33 μM。家兔網(wǎng)織紅細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)成分對(duì)哺乳動(dòng)物的蛋白質(zhì)合成是必要的,用其裂解物體系進(jìn)行測(cè)試,Retapamulin (100 μM)對(duì)抑制真核細(xì)胞的翻譯過程無(wú)效。Retapamulin與Erys核糖體結(jié)合,并完全取代標(biāo)記的配體基,IC50為26.1 nM。Retapamulin部分抑制帶電的,N-阻斷的tRNA與大腸桿菌核糖體P位點(diǎn)的結(jié)合能力,IC50為17.4 nM (最大抑制為80%)。Retapamulin抑制金黃色葡萄球菌和化膿性鏈球菌,MIC90分別為0.12 微克/毫升和≤0.03 微克/毫升。Retapamulin抑制金黃色葡萄球菌亞群,MIC50/90值為0.06/0.12 微克/毫升。Retapamulin對(duì)這些菌株顯示出良好的抑制活性,所需的MIC為0.06 微克/毫升。?Retapamulin能夠有效抗化膿性鏈球菌株,測(cè)試的MIC90為0.016 微克/毫升,基于MIC90s,它比莫匹羅星與夫西地酸分別有效32倍和>1,024-倍。Retapamulin以其新穎的作用方式與細(xì)菌核糖體的特定位點(diǎn)結(jié)合。?Retapamulin (<2 毫克/升)抑制37/52 (71%) 脆弱類桿菌菌株和85/87 (98%)其它革蘭氏陰桿菌。Retapamulin對(duì)痤瘡丙酸桿菌和厭氧革蘭氏陽(yáng)性球菌的作用比克林霉素,甲硝唑和頭孢曲松更有效。?Retapamulin抑制總的活細(xì)胞(TVC),蛋白質(zhì)合成和50S亞基合成,在野生型(wt)金黃色葡萄球菌菌株RN1786中,IC50 分別為12 納克/毫升,5納克/毫升和27納克/毫升。
激酶實(shí)驗(yàn):
Retapamulin與大腸桿菌和金黃色葡萄球菌核糖體結(jié)合的KD測(cè)定。
細(xì)菌核糖體在37℃下培育15分鐘后,在結(jié)合緩沖液(20 mM HEPES,pH 7.5,50 mM NH4Cl,10 mM MgCl2,0.05% Tween 20;對(duì)金黃色葡萄球菌核糖體,該緩沖液包含25 mM MgCl2)中稀釋。Retapamulin與大腸桿菌和金黃色葡萄球菌核糖體的結(jié)合速率和解離速率在放射性標(biāo)記的pleuromutilin ([3H]SB-258781)96孔板中研究。在這些實(shí)驗(yàn)(n = 3)中,20 nM Retapamulin與核糖體(5 nM到15 nM)和[3H]SB-258781 (15到19 nM)混合,終體積為100微升。在室溫下經(jīng)過一段時(shí)間,[3H]SB-258781與retapamulin競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合核糖體(大腸桿菌核糖體為2小時(shí),金黃色葡萄球菌核糖體為5小時(shí))。游離和結(jié)合的配體隨后使用細(xì)胞收集器通過濾板進(jìn)行分離。平板在50℃下干燥30分鐘。加入50微升MicroScint-20到板中后,板中的放射性通過TopCoun測(cè)量。非特異性結(jié)合通過用10 μM SB-268091取代[3H]SB-258781測(cè)定。
注意事項(xiàng):
1、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2、以上信息僅做參考交流之用。