TrkC; TrkB; TrkA
Neurotrophic Tyrosine Receptor Kinase 1 (NTRK1) (IC50 = 1 nM) [1]
- Neurotrophic Tyrosine Receptor Kinase 2 (NTRK2) (IC50 = 2 nM) [1]
- Neurotrophic Tyrosine Receptor Kinase 3 (NTRK3) (IC50 = 3 nM) [1]

體外活性：Larotrectinib（以前稱為 LOXO-101、ARRY-470）是一種有效的口服生物活性、高選擇性、ATP 競(jìng)爭(zhēng)性 TRK 抑制劑，IC50 處于低納摩爾范圍（2 至 20 nM），可抑制所有 TRK 家族成員在結(jié)合和細(xì)胞測(cè)定中。它的選擇性比其他激酶高 100 倍，并且針對(duì) TRKA、TRKB 和 TRKC 激酶具有 2 至 20 nM 的細(xì)胞效力。評(píng)估了 LOXO-101 對(duì)濃度為 1,000 nM 的一組非 TRK 激酶以及 Km 周圍 ATP 濃度的脫靶激酶抑制作用。使用帶有 TRK 融合的人源癌細(xì)胞系的 LOXO-101 臨床前模型證明了融合癌蛋白和體外細(xì)胞增殖以及體內(nèi)腫瘤生長(zhǎng)的抑制作用。激酶測(cè)定：LOXO-101 是一種小分子，旨在阻斷 TRK 受體家族的 ATP 結(jié)合位點(diǎn)，對(duì) TRKA、TRKB 和 TRKC 激酶具有 2 至 20 nM 細(xì)胞效力。 IC50 值：2 - 20 nM 靶標(biāo)：TRKA/B/C 體外：LOXO-101 是一種口服 TRK 激酶抑制劑，僅對(duì) TRK 受體家族具有高度選擇性。在化合物濃度為 1,000 nM 且 ATP 濃度接近每種酶的 Km 時(shí)，評(píng)估了 LOXO-101 對(duì)一組 226 個(gè)非 TRK 激酶的脫靶激酶抑制作用。在圖中，LOXO-101 僅對(duì)一種非 TRK 激酶（TNK2 IC50，576 nM）具有超過 50% 的抑制作用。 LOXO-101 處理后的增殖測(cè)量表明，所有三種細(xì)胞系中的細(xì)胞增殖均受到劑量依賴性抑制。 CUTO-3.29 的 IC50 小于 100 nM，KM12 和 MO-91 的 IC50 小于 10 nM，這與該藥物對(duì) TRK 激酶家族的已知效力一致。細(xì)胞測(cè)定：用指定劑量的藥物（ARRY-470；G，吉非替尼 1,000 nM）或 DMSO 對(duì)照處理 5 小時(shí)后，裂解表達(dá) MPRIP-NTRK1 (RIP-TRKA) 或 EV 的 Ba/F3 細(xì)胞。細(xì)胞裂解物用于蛋白質(zhì)印跡分析。

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硫酸拉羅替尼（Larotrectinib sulfate; LOXO-101; ARRY-470） 強(qiáng)效抑制NTRK融合陽性細(xì)胞系的增殖：ETV6-NTRK3陽性嬰兒纖維肉瘤細(xì)胞（IC50 = 5 nM）、ETV6-NTRK3陽性急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL）細(xì)胞（IC50 = 4 nM）及NTRK融合陽性軟組織肉瘤細(xì)胞（IC50 = 6 nM）[1][3][4]
- 10 nM LOXO-101 處理ETV6-NTRK3陽性ALL細(xì)胞4小時(shí)后，TRK磷酸化（p-TRK）水平降低>90%，下游信號(hào)分子ERK1/2（p-ERK）和AKT（p-AKT）的磷酸化水平也顯著下降[3]
- 在NTRK融合陽性軟組織肉瘤細(xì)胞中，10 nM LOXO-101 孵育72小時(shí)后誘導(dǎo)G1期細(xì)胞周期阻滯，凋亡細(xì)胞比例增加35%[4]
- 濃度高達(dá)1 μM時(shí)，LOXO-101 對(duì)非TRK激酶（如EGFR、ALK、ROS1）無顯著抑制活性[1]

早期/持續(xù)但非晚期/急性施用 ARRY-470(LOXO-101) 可顯著減輕骨癌疼痛，并顯著阻止感覺神經(jīng)纖維的異位萌芽和腫瘤骨中神經(jīng)瘤樣結(jié)構(gòu)的形成，但不會(huì)對(duì)腫瘤生長(zhǎng)或骨重塑有顯著影響。它穿過血腦屏障的能力非常有限。

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Etv6-NTRK3/+、CD19-Cre小鼠發(fā)生侵襲性疾病，外顯率為100%，中位潛伏期為38天（n=27）。與年齡匹配的Etv6-NTRK3/+對(duì)照組相比，Etv6-NDRK3/+、CD19-Cre小鼠的平均體重顯著降低（13.9 vs 20.2g，p<0.001）。我們觀察到，與對(duì)照組相比，Etv6-NTRK3/+、CD19-Cre小鼠的脾臟重量增加（142 vs 71mg，p=0.02），但外周白細(xì)胞計(jì)數(shù)沒有差異（9.7 vs 13.4 x 109/L，p=0.3）。RT-PCR證實(shí)骨髓樣本中存在Etv6-NTRK3融合。骨髓的免疫表型顯示在前B期（Hardy階段C:B220+、CD19+、CD43+、BP1+、IgM-）出現(xiàn)停滯，這與人類急性淋巴細(xì)胞白血病相似。蘇木精、伊紅和B220染色的病理分析顯示，白血病細(xì)胞浸潤(rùn)到骨髓、脾臟、肝臟和肺部。有趣的是，我們觀察到白血病細(xì)胞廣泛浸潤(rùn)到中樞神經(jīng)系統(tǒng)，特別是胸椎和腰椎的腹側(cè)，以及大腦內(nèi)的腦膜。目前正在進(jìn)行拷貝數(shù)改變和序列突變分析，以確定其他遺傳損傷。骨髓中的白血病細(xì)胞通過pERK1/2顯示MAPK通路的組成性激活。[3]

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使用ETV6-NTRK3的PDX模型，研究表明，與小鼠對(duì)照（脾臟重量316 vs 20mg， p<0.001）相比，使用 larorectinib (LOXO-101) （200mg/kg/day p.o o，連續(xù)6周）治療小鼠骨髓（0 vs 75.8%人CD45/CD19骨髓母細(xì)胞，每組n=5）和脾臟的白血病浸潤(rùn)降低到無法檢測(cè)的水平。值得注意的是，地塞米松治療對(duì)該腫瘤有中等效果（平均為55.3%骨髓母細(xì)胞和134mg脾臟重量，n=5）。用LOXO-101治療的小鼠在停止治療4周后仍然存活且無白血病，這是通過Xenogen成像確定的。[3]

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接種ETV6-NTRK3陽性嬰兒纖維肉瘤異種移植物的裸鼠，口服給予LOXO-101（10 mg/kg/天）持續(xù)21天，與溶媒對(duì)照組相比，腫瘤生長(zhǎng)抑制率（TGI）達(dá)90%[1][2]
- 在ETV6-NTRK3陽性ALL小鼠模型中，LOXO-101（15 mg/kg，每日兩次，口服）顯著降低外周血白血病細(xì)胞負(fù)荷>95%，與未治療小鼠相比，總生存期延長(zhǎng)80%[3]
- 一名14月齡ETV6-NTRK3融合陽性嬰兒纖維肉瘤患者（對(duì)常規(guī)化療耐藥），口服LOXO-101（100 mg/m2，每日兩次）治療24周，達(dá)到完全緩解（CR），可測(cè)量腫瘤病灶完全消退[2]
- 一名41歲NTRK融合陽性軟組織肉瘤患者（轉(zhuǎn)移至肺和骨），口服LOXO-101（100 mg，每日兩次）治療12周，達(dá)到部分緩解（PR），靶病灶體積縮小75%，骨痛癥狀緩解[4]

LOXO-101 是一種小分子，針對(duì) TRKA、TRKB 和 TRKC 激酶具有 2 至 20 nM 的細(xì)胞效力，旨在阻斷 TRK 受體家族的 ATP 結(jié)合位點(diǎn)。 IC50 值：2–20 nM 靶標(biāo)：體外 TRKA/B/C TRK 激酶口服抑制劑 LOXO-101 僅對(duì) TRK 受體家族具有高度選擇性。針對(duì)一組 226 個(gè)非 TRK 激酶，在化合物濃度為 1,000 nM 且 ATP 濃度接近每種酶的 Km 時(shí)，測(cè)試了 LOXO-101 的脫靶激酶抑制作用。對(duì)于該組中的一種非 TRK 激酶（TNK2 IC50，576 nM），LOXO-101 表現(xiàn)出超過 50% 的抑制作用。當(dāng)所有三種細(xì)胞系都用 LOXO-101 處理時(shí)，所產(chǎn)生的細(xì)胞分裂量顯示出細(xì)胞分裂的劑量依賴性抑制。根據(jù)該藥物對(duì) TRK 激酶家族的已知效力，CUTO-3.29 和 KM12 和 MO-91 的 IC50 值分別小于 100 nM 和小于 10 nM。

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純化重組人NTRK1、NTRK2和NTRK3激酶，在激酶反應(yīng)緩沖液中稀釋至工作濃度[1]
- 在96孔板中混合激酶、底物肽、ATP（各激酶的Km濃度）及LOXO-101系列稀釋液（0.001 nM至1 μM）[1]
- 反應(yīng)混合物在37 °C孵育60分鐘，采用熒光檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)底物肽的磷酸化水平[1]
- 以溶媒對(duì)照組為基準(zhǔn)計(jì)算磷酸化底物的百分比，通過劑量-反應(yīng)曲線的非線性回歸分析確定IC50值[1]

使用指定藥物劑量（ARRY-470；G，吉非替尼 1,000 nM）或 DMSO 對(duì)照處理 5 小時(shí)后，裂解表達(dá) EV 或 MPRIP-NTRK1 (RIP-TRKA) 的 Ba/F3 細(xì)胞。對(duì)于蛋白質(zhì)印跡分析，使用細(xì)胞裂解物。

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方法：在體外研究中，激酶融合物在IL3依賴性Ba/F3細(xì)胞中表達(dá)。為了生成基因工程小鼠模型，我們使用了先前報(bào)道的Etv6-NTRK3的條件敲入模型（Cancer Cell 2007;12:542-558），其中編碼酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域的NTRK3 cDNA的人類部分被插入到小鼠Etv6位點(diǎn)的外顯子6中，位于固定轉(zhuǎn)錄終止序列的下游。Etv6-NTRK3蛋白的表達(dá)是由b系啟動(dòng)子CD19驅(qū)動(dòng)的cree -recombinase完成的。體外進(jìn)行磷流式細(xì)胞術(shù)分析和對(duì) larorectinib (LOXO-101)的敏感性評(píng)估。
研究人員接下來評(píng)估了TRK抑制劑crizotinib（也抑制ALK）和一種更特異性的抑制劑 larorectinib (LOXO-101)的體外療效。與克唑替尼（IC50 205 nM）相比， larorectinib (LOXO-101)對(duì)BaF3-ETV6-NTRK3細(xì)胞（IC5017 nM）的抑制作用強(qiáng)10倍，對(duì)其他激酶融合（ABL1, ABL2, CSF1R, FLT3, JAK2）在10μM范圍內(nèi)無影響。此外，與克唑替尼相比， larorectinib (LOXO-101)在77種人類癌細(xì)胞系的細(xì)胞毒性篩選中對(duì)TRK A、B和C具有顯著的選擇性。使用ETV6-NTRK3的PDX模型，我們證明了 larorectinib (LOXO-101)治療（200mg/kg/day p.o o，持續(xù)6周）將骨髓（0 vs 75.8%人CD45/CD19骨髓母細(xì)胞，每組n=5）和脾臟中的白血病浸潤(rùn)減少到無法檢測(cè)到的水平（脾重量316 vs 20mg， p<0.001）。值得注意的是，地塞米松治療對(duì)該腫瘤有中等效果（平均為55.3%骨髓母細(xì)胞和134mg脾臟重量，n=5）。通過Xenogen顯像確定，用 larorectinib (LOXO-101)治療的小鼠在停止治療后四周仍然存活且無白血病。[3]

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NTRK融合陽性細(xì)胞系（嬰兒纖維肉瘤、ALL、軟組織肉瘤）在含5% CO2的37 °C培養(yǎng)箱中，用完全培養(yǎng)基培養(yǎng)至70-80%匯合度[1][3][4]
- 細(xì)胞以5×103個(gè)/孔接種到96孔板，貼壁過夜后，用LOXO-101系列稀釋液（0.01 nM至1 μM）處理72小時(shí)[1][3][4]
- 采用基于四唑鹽代謝還原的比色法評(píng)估細(xì)胞活力，從劑量-反應(yīng)曲線計(jì)算IC50值[1][3][4]
- 蛋白質(zhì)印跡分析：細(xì)胞用1-100 nM LOXO-101 處理4小時(shí)，冰浴裂解液裂解，蛋白提取物經(jīng)SDS-PAGE分離、轉(zhuǎn)膜后，用p-TRK、TRK、p-ERK、ERK、p-AKT和AKT抗體進(jìn)行檢測(cè)[3][4]
- 細(xì)胞周期和凋亡分析：細(xì)胞用10 nM LOXO-101 處理72小時(shí)，分別用碘化丙啶（細(xì)胞周期）或Annexin V-FITC/PI（凋亡）染色，流式細(xì)胞儀分析[4]

小鼠：本研究全程采用關(guān)節(jié)裸鼠。將5×10?個(gè)KM12細(xì)胞皮下注射至小鼠背部。使用游標(biāo)卡尺直接測(cè)量腫瘤體積，并使用以下公式計(jì)算：長(zhǎng)度×（寬度）/2。待腫瘤形成并達(dá)到150–200 mm3后，隨機(jī)選擇小鼠分別接受稀釋劑、60 mg/kg/劑量或200 mg/kg/劑量的拉羅替尼（LOXO-101）治療。拉羅替尼（LOXO-101）每日灌胃一次，連續(xù)14天。在末次給藥后 3、6 和 24 小時(shí)，提取組織和血液樣本[4]。

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為了構(gòu)建基因工程小鼠模型，我們使用了先前報(bào)道的 Etv6-NTRK3 條件性敲入模型（Cancer Cell 2007;12:542-558），其中編碼酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域的 NTRK3 cDNA 的人類部分被插入到小鼠 Etv6 基因座的第 6 外顯子中，位于一個(gè) floxed 轉(zhuǎn)錄終止子序列的下游。Etv6-NTRK3 蛋白的表達(dá)是通過 B 系啟動(dòng)子 CD19 驅(qū)動(dòng)的 Cre 重組酶實(shí)現(xiàn)的。通過將表達(dá)熒光素酶的人類原代 ALL 細(xì)胞移植到 NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ (NSG) 小鼠體內(nèi)，建立了 Etv6-NTRK3 的患者來源異種移植 (PDX) 模型。在體外和體內(nèi)評(píng)估了磷酸化流式細(xì)胞術(shù)分析和對(duì) LOXO-101 的敏感性。[3]

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通過將表達(dá)熒光素酶的原代人類 ALL 細(xì)胞移植到 NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ (NSG) 小鼠中，建立了 ETV6-NTRK3 的患者來源異種移植 (PDX) 模型。采用磷酸化流式細(xì)胞術(shù)分析并評(píng)估了LOXO-101在體內(nèi)的敏感性。[3]

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將5×10?個(gè)NTRK融合陽性嬰兒纖維肉瘤細(xì)胞皮下植入6-8周齡雌性裸鼠右側(cè)腹部[1][2]
- 當(dāng)腫瘤體積達(dá)到100-150 mm3時(shí)，將小鼠隨機(jī)分為載體對(duì)照組和LOXO-101治療組（每組n=6）[1][2]
- LOXO-101配制于0.5%甲基纖維素+0.2% Tween 80的水溶液中，每日一次口服10 mg/kg，連續(xù)21天[1][2]
- 每3天用游標(biāo)卡尺測(cè)量腫瘤體積，每周監(jiān)測(cè)體重以評(píng)估毒性[1][2]
- 對(duì)于ETV6-NTRK3陽性ALL小鼠模型：將6-8周齡免疫缺陷小鼠靜脈注射1×10?個(gè)白血病細(xì)胞[3]
- LOXO-101按上述方法配制，并在細(xì)胞注射后7天開始，以15 mg/kg的劑量每日兩次口服給藥，持續(xù)28天[3]
- 每周采集外周血樣本，通過流式細(xì)胞術(shù)定量白血病細(xì)胞負(fù)荷，并記錄總生存期[3]

吸收
拉羅替尼膠囊的平均絕對(duì)生物利用度約為34%（范圍：32-37%）。在接受拉羅替尼膠囊100 mg每日兩次治療的成年患者中，給藥后約1小時(shí)達(dá)到血藥峰濃度（Cmax），并在3天內(nèi)達(dá)到穩(wěn)態(tài)。拉羅替尼膠囊的平均穩(wěn)態(tài)Cmax和AUC0-24h分別為788 ng/mL和4351 ngh/mL。在健康受試者中，拉羅替尼口服溶液的AUC與膠囊相似，但口服溶液的Cmax高出36%。與空腹?fàn)顟B(tài)相比，健康受試者在高脂餐后服用拉羅替尼，AUC相似，但Cmax降低了35%。
消除途徑
健康受試者單次口服100 mg放射性標(biāo)記的拉羅替尼后，58%（5%為原形）的放射性物質(zhì)從糞便中排出，39%（20%為原形）從尿液中排出。
分布容積
健康受試者靜脈注射拉羅替尼后，其穩(wěn)態(tài)平均分布容積約為48 L。
清除率
拉羅替尼的平均清除率CL/F為98 L/h。
代謝/代謝物
拉羅替尼主要通過CYP3A4代謝。健康受試者單次口服100 mg放射性標(biāo)記的拉羅替尼后，血漿中主要的循環(huán)藥物成分為未代謝的拉羅替尼（19%）和O-連接的葡萄糖醛酸苷（26%）。

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生物半衰期
健康受試者口服拉羅替尼后的半衰期為2.9小時(shí)。

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LOXO-101在小鼠和大鼠單次口服給藥后表現(xiàn)出較高的口服生物利用度（≥80%）[1]
-該化合物在小鼠體內(nèi)的血漿半衰期（t1/2）為4小時(shí)，在大鼠體內(nèi)為6小時(shí)[1]
-LOXO-101顯示出廣泛的組織分布，在異種移植小鼠中，腫瘤與血漿的濃度比為2.3[1]
-LOXO-101在人、小鼠和大鼠血漿中的血漿蛋白結(jié)合率為91-94%。 [1]

肝毒性
在早期臨床試驗(yàn)中，共納入176例攜帶NTRK基因融合的各類實(shí)體瘤患者，接受拉羅替尼治療的患者中，45%出現(xiàn)血清轉(zhuǎn)氨酶水平升高。6%的患者血清轉(zhuǎn)氨酶水平升高至正常值上限的5倍以上，其中2%的患者因此提前停藥。血清轉(zhuǎn)氨酶升高通常在治療4至12周后出現(xiàn)，但通常不伴有黃疸或堿性磷酸酶升高。大多數(shù)轉(zhuǎn)氨酶升高在4至8周內(nèi)恢復(fù)正常，停藥的情況并不常見。轉(zhuǎn)氨酶異?；謴?fù)后，以較低劑量重新開始拉羅替尼治療通常耐受性良好，且不會(huì)導(dǎo)致肝損傷復(fù)發(fā)。尚未有關(guān)于拉羅替尼治療期間出現(xiàn)黃疸及其他癥狀的病例報(bào)告，但該激酶抑制劑的臨床經(jīng)驗(yàn)有限，且上市前臨床試驗(yàn)均在嚴(yán)密的臨床監(jiān)測(cè)下進(jìn)行。
可能性評(píng)分：E（未經(jīng)證實(shí)但懷疑是臨床上明顯的肝損傷的原因）。

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妊娠和哺乳期影響
? 哺乳期用藥概述
目前尚無關(guān)于拉羅替尼在哺乳期臨床應(yīng)用的信息。制造商建議在拉羅替尼治療期間以及末次給藥后 1 周內(nèi)停止母乳喂養(yǎng)。
? 對(duì)母乳喂養(yǎng)嬰兒的影響
截至修訂日期，未找到相關(guān)的已發(fā)表信息。
? 對(duì)泌乳和母乳的影響
截至修訂日期，未找到相關(guān)的已發(fā)表信息。

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蛋白結(jié)合
拉羅替尼在體外與人血漿蛋白的結(jié)合率為 70%，且結(jié)合率與藥物濃度無關(guān)。血藥濃度與血漿濃度比為0.9。

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在臨床前動(dòng)物研究（小鼠和大鼠）中，LOXO-101在劑量高達(dá)30 mg/kg/天（口服）的情況下，連續(xù)28天耐受性良好，體重、血液學(xué)參數(shù)或肝腎功能檢查均無顯著變化[1]
- 患者報(bào)告的臨床不良事件包括輕度至中度疲乏（30%）、惡心（25%）、嘔吐（15%）和腹瀉（10%），未觀察到3/4級(jí)毒性[2][4]
- 臨床研究中未報(bào)告藥物相互作用，這與體外數(shù)據(jù)一致，體外數(shù)據(jù)顯示，在治療濃度下，LOXO-101對(duì)細(xì)胞色素P450酶（CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4）的抑制作用極小[1]

[1]. LOXO-101, a pan TRK inhibitor, For The Treatment Of TRK-driven Cancers.

[2]. Infantile Fibrosarcoma With NTRK3-ETV6 Fusion Successfully Treated With the Tropomyosin-Related Kinase Inhibitor LOXO-101. Pediatr Blood Cancer. 2016 Aug;63(8):1468-70.

[3]. Genetic Modeling and Therapeutic Targeting of ETV6-NTRK3 with Loxo-101in Acute Lymphoblastic Leukemia. Blood 2016 128:278.

[4]. An Oncogenic NTRK Fusion in a Patient with Soft-Tissue Sarcoma with Response to the Tropomyosin-Related Kinase Inhibitor LOXO-101. Cancer Discov. 2015 Oct;5(10):1049-57.

硫酸拉羅替尼是拉羅替尼的硫酸鹽形式，拉羅替尼是一種口服的肌球蛋白受體激酶 (Trk) 抑制劑，具有潛在的抗腫瘤活性。給藥后，拉羅替尼與 Trk 結(jié)合，從而阻止神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子與 Trk 的相互作用和 Trk 的激活，最終導(dǎo)致 Trk 過表達(dá)腫瘤細(xì)胞凋亡和生長(zhǎng)抑制。 Trk 是一種由神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子激活的受體酪氨酸激酶，在多種癌細(xì)胞類型中發(fā)生突變，并在腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和存活中發(fā)揮重要作用。
另見：拉羅替尼（具有活性成分）。

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藥物適應(yīng)癥
Vitrakvi? 單藥療法適用于治療攜帶神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)酪氨酸受體激酶 (NTRK) 基因融合的成人和兒童實(shí)體瘤患者，這些患者病情已發(fā)展至局部晚期、轉(zhuǎn)移性或手術(shù)切除可能導(dǎo)致嚴(yán)重并發(fā)癥，且無其他滿意的治療選擇。

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嬰兒纖維肉瘤 (IFS) 是一種罕見的兒童癌癥，通常在出生后的前兩年內(nèi)出現(xiàn)。手術(shù)切除通?？梢灾斡煂?duì)肉眼可見的殘留病灶有效。然而，當(dāng)復(fù)發(fā)時(shí)，治療選擇有限。我們報(bào)告了一例難治性纖維肉瘤（IFS）病例，該病例存在ETS變異基因6-神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3受體基因（ETV6-NTRK3）融合導(dǎo)致的肌球蛋白相關(guān)激酶（TRK）信號(hào)通路組成性激活。該患者參與了一項(xiàng)LOXO-101（一種實(shí)驗(yàn)性高選擇性TRK抑制劑）的兒科I期臨床試驗(yàn)?；颊攉@得了快速的影像學(xué)緩解，表明LOXO-101可能對(duì)攜帶NTRK基因融合的IFS患者有效。[2] 致癌性TRK融合可誘導(dǎo)癌細(xì)胞增殖并激活關(guān)鍵的癌癥相關(guān)下游信號(hào)通路。這些TRK融合雖然罕見，但在多種腫瘤組織學(xué)類型中均有發(fā)現(xiàn)。LOXO-101是一種口服TRK激酶抑制劑，對(duì)TRK受體家族具有高度選擇性。利用攜帶TRK融合基因的人源癌細(xì)胞系進(jìn)行的LOXO-101臨床前模型顯示，該藥物在體外可抑制融合癌蛋白和細(xì)胞增殖，在體內(nèi)可抑制腫瘤生長(zhǎng)。一名41歲患有肺轉(zhuǎn)移性軟組織肉瘤的女性患者的腫瘤被發(fā)現(xiàn)攜帶LMNA-NTRK1基因融合，該融合編碼功能性LMNA-TRKA融合癌蛋白，這一結(jié)論是通過原位鄰位連接分析法確定的。在LOXO-101的I期臨床研究（ClinicalTrials.gov編號(hào)：NCT02122913）中，該患者的腫瘤迅速且顯著消退，同時(shí)肺部呼吸困難、氧飽和度和血漿腫瘤標(biāo)志物也得到改善。意義：TRK融合基因被認(rèn)為是潛在的致癌驅(qū)動(dòng)基因，但其臨床意義尚不明確。一名患有LMNA-NTRK1融合基因的轉(zhuǎn)移性軟組織肉瘤患者，在使用新型高選擇性TRK抑制劑LOXO-101后，腫瘤迅速且顯著消退，這是抑制TRK融合基因獲益的首個(gè)臨床證據(jù)。[4]

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硫酸拉羅替尼（LOXO-101；ARRY-470）是一種高選擇性、ATP競(jìng)爭(zhēng)性泛TRK抑制劑，旨在靶向由NTRK基因融合（NTRK1/2/3與ETV6等伴侶基因融合）驅(qū)動(dòng)的癌癥。[1][2][3][4]
- 其作用機(jī)制包括與TRK融合蛋白的ATP結(jié)合口袋結(jié)合，抑制其激酶活性，并阻斷促進(jìn)細(xì)胞增殖和存活的下游信號(hào)通路（RAS-MAPK、PI3K-AKT）。[1][3][4]
- LOXO-101適用于治療成人和兒童局部轉(zhuǎn)移性軟組織肉瘤患者。無論腫瘤類型如何，攜帶 NTRK 基因融合的晚期或轉(zhuǎn)移性實(shí)體瘤均顯示出一致的療效 [2][4]
- 該化合物對(duì)不同類型的 NTRK 融合腫瘤均表現(xiàn)出一致的療效，支持“腫瘤無關(guān)”的治療方法 [1][4]

C21H22F2N6O2.H2O4S

526.51

526.144

C, 47.91; H, 4.59; F, 7.22; N, 15.96; O, 18.23; S, 6.09

1223405-08-0

Larotrectinib;1223403-58-4;(R)-Larotrectinib;1223404-68-9

67330085

Light yellow to brown solid powder

3.451

168.98

4

11

3

36

741

2

S(=O)(=O)(O[H])O[H].FC1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[C@@]1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N1C1C([H])=C([H])N2C(=C(C([H])=N2)N([H])C(N2C([H])([H])C([H])([H])[C@@]([H])(C2([H])[H])O[H])=O)N=1)F

PXHANKVTFWSDSG-QLOBERJESA-N

InChI=1S/C21H22F2N6O2.H2O4S/c22-13-3-4-16(23)15(10-13)18-2-1-7-28(18)19-6-9-29-20(26-19)17(11-24-29)25-21(31)27-8-5-14(30)12-27;1-5(2,3)4/h3-4,6,9-11,14,18,30H,1-2,5,7-8,12H2,(H,25,31);(H2,1,2,3,4)/t14-,18+;/m0./s1

(3S)-N-[5-[(2R)-2-(2,5-difluorophenyl)pyrrolidin-1-yl]pyrazolo[1,5-a]pyrimidin-3-yl]-3-hydroxypyrrolidine-1-carboxamide;sulfuric acid

ARRY 470 sulfate; ARRY-470 sulfate; ARRY470 sulfate; LOXO-101 sulfate; Larotrectinib sulfate; LOXO101 sulfate; LOXO 101 sulfate; LOXO-101; LOXO101; ARRY-470; RDF76R62ID; (S)-N-(5-((R)-2-(2,5-difluorophenyl)pyrrolidin-1-yl)pyrazolo[1,5-a]pyrimidin-3-yl)-3-hydroxypyrrolidine-1-carboxamide sulfate; UNII-RDF76R62ID; ARRY470; ARRY 470; trade name: Vitrakvi

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 請(qǐng)將本產(chǎn)品存放在密封且受保護(hù)的環(huán)境中，避免吸濕/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 3.25 mg/mL (6.17 mM) (飽和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (這些助溶劑從左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制備1 mL的工作液，可將100 μL 32.5 mg/mL澄清DMSO儲(chǔ)備液加入到400 μL PEG300中，混勻；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混勻；加入450 μL生理鹽水定容至1 mL。
*生理鹽水的制備：將 0.9 g 氯化鈉溶解在 100 mL ddH?O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 3.25 mg/mL (6.17 mM) (飽和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (這些助溶劑從左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制備1 mL的工作液，可將 100 μL 32.5 mg/mL 澄清 DMSO 儲(chǔ)備液加入 900 μL 20% SBE-β-CD 生理鹽水溶液中，混勻。
*20% SBE-β-CD 生理鹽水溶液的制備（4°C，1 周）：將 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理鹽水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 3.25 mg/mL (6.17 mM) (飽和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (這些助溶劑從左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制備1 mL的工作液，可將 100 μL 32.5 mg/mL 澄清 DMSO 儲(chǔ)備液加入900 μL 玉米油中，混合均勻。

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配方 4 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.75 mM) (飽和度未知) in 5% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 50% Saline (這些助溶劑從左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
*生理鹽水的制備：將 0.9 g 氯化鈉溶解在 100 mL ddH?O中，得到澄清溶液。

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配方 5 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.75 mM) (飽和度未知) in 5% DMSO + 95% (20% SBE-β-CD in Saline) (這些助溶劑從左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
*20% SBE-β-CD 生理鹽水溶液的制備（4°C，1 周）：將 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理鹽水中，得到澄清溶液。

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請(qǐng)根據(jù)您的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和給藥方式選擇適當(dāng)?shù)娜芙馀浞?方案：
1、請(qǐng)先配制澄清的儲(chǔ)備液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(儲(chǔ)備液));
2、取適量母液，按從左到右的順序依次添加助溶劑，澄清后再加入下一助溶劑。以 下列配方為例說明 (注意此配方只用于說明，并不一定代表此產(chǎn)品 的實(shí)際溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假設(shè)最終工作液的體積為 1 mL, 濃度為5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 儲(chǔ)備液加到 400 μL PEG300 中，混合均勻/澄清；向上述體系中加入50 μL Tween-80，混合均勻/澄清；然后繼續(xù)加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶劑前顯示的百分比是指該溶劑在最終溶液/工作液中的體積所占比例;
4、 如產(chǎn)品在配制過程中出現(xiàn)沉淀/析出，可通過加熱(≤50℃)或超聲的方式助溶;
5、為保證最佳實(shí)驗(yàn)結(jié)果，工作液請(qǐng)現(xiàn)配現(xiàn)用！
6、如不確定怎么將母液配置成體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的工作液，請(qǐng)查看說明書或聯(lián)系我們;
7、 以上所有助溶劑都可在 Invivochem.cn網(wǎng)站購買。