9001-51-8
中文名稱
己糖激酶
英文名稱
HEXOKINASE
CAS
9001-51-8
分子式
N/A
更新日期
2026/06/05 17:18:06
基本信息
中文別名
已糖激酶己糖激酶
美國漢克森濾芯
己糖激酶(I級)
已糖激酶(酵母)
己糖激酶(微生物)
已糖激酶(東洋紡)
己糖激酶(-20℃)
漢克森濾芯E9-44
己糖激酶,從微生物所得
英文別名
HKHK III
C:C&B14
EC 2.7.1.1
HEXOKINASE
37340-58-2
EC: 2.7.1.1
IUB: 2.7.1.1
Hexokinase 1
Hexokinase D
所屬類別
生物化工：酶及輔酶類物理化學(xué)性質(zhì)
外觀性狀已糖激酶為細(xì)針狀結(jié)晶。商品有冷凍干燥粉、70%飽和硫酸銨結(jié)晶懸浮液和50%甘油溶液。12個月無降低活性現(xiàn)象，縣浮液應(yīng)防止凍結(jié)。
儲存條件2-8°C
形態(tài)powder
顏色White to off-white
PH值6
生物來源Saccharomyces cerevisiae
水溶解性易溶于水。
敏感性吸濕性
Specific Activity≥350units/mg protein
EPA化學(xué)物質(zhì)信息Kinase (phosphorylating), hexo- (9001-51-8)
安全數(shù)據(jù)
警示詞警告
危險性描述H315-H319-H335
防范說明P271-P261-P280
危險品標(biāo)志Xi
危險類別碼36/37/38
安全說明26-36-24/25
WGK Germany3
TSCAYes
海關(guān)編碼35079090
存儲類別12 - Non Combustible Liquids
應(yīng)用領(lǐng)域
用途1
用于生化研究，臨床上常用作診斷酶，用于葡萄糖的分析，制備尿糖和血糖試紙，制藥工業(yè)中用做維生素C及B12制劑的穩(wěn)定劑也可用于蛋白質(zhì)的脫糖、罐頭酒類的儲藏。用途2
常用診斷用酶。生物研究。檢定生物液體中葡萄糖水準(zhǔn)和ATP水準(zhǔn)及肌酸激酶的偶聯(lián)反應(yīng)。制備方法
方法1
以酵母為原料，磷酸鈉抽提后用硫酸銨分級，再經(jīng)透析、DEAE-Sephadex柱層析、DEAE-纖維素柱層析、P-I和P-II羥基磷灰石柱層析、硫酸銨重結(jié)晶得產(chǎn)品。常見問題列表
簡介
己糖激酶(Hexokinase)是生物體呼吸代謝過程中的關(guān)鍵酶之一，具有催化己糖磷酸化的作用。己糖激酶存在于所有細(xì)胞中，是細(xì)胞產(chǎn)生能量所需要的一種酶，共有 5 種亞型，其中 I 和 II 分布在線粒體外膜，與電壓依賴性陽離子通道蛋白結(jié)合;這種部位讓己糖激酶能直接獲得線粒體產(chǎn)生的 ATP，ATP是己糖激酶的底物之一。
生理功能
己糖激酶在固有免疫系統(tǒng)中發(fā)揮模式識別受體功能，類似免疫系統(tǒng)的守門人角色，具有重要的功能。這種機制不僅在動物細(xì)胞存在，在人體細(xì)胞內(nèi)同樣存在。因此，己糖激酶常被用作監(jiān)測人體健康狀況的指標(biāo)，目前己糖激酶已應(yīng)用于血糖檢測試劑盒中。操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的加樣：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL。 2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。 3. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑100μl，空白孔除外。 4. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。 5. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。 6. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。 7. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。 8. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。 9. 測定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值），測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。檢測原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定魚標(biāo)本中己糖激酶(HK)水平。用純化的己糖激酶(HK)捕獲抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被的微孔中依次加入己糖激酶(HK)，再與HRP標(biāo)記的檢測抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的己糖激酶(HK)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中己糖激酶(HK)含量。樣本
1、組織標(biāo)本 對于樣本要求保持鮮重，稱取樣本中的重量不小于50mg，一般以1g為基準(zhǔn),但不嚴(yán)格要求固定樣本每個重量必須達(dá)到相同的水平。勻漿的比例選取10%，相當(dāng)于1g組織加9ml的勻漿液來進行勻漿。勻漿液選取PBS（PH=7.2-7.4，濃度為0.01mol/L）。勻漿過程選用組織勻漿器，冰浴上勻漿。(或者進行液氮碾磨)，離心取上清，離心轉(zhuǎn)速選用5000轉(zhuǎn)每分，時間是15分鐘。取上清液待檢。 2-1、貼壁細(xì)胞用冷的PBS輕輕清洗，然后用胰蛋白酶消化，1000×g離心5分鐘后收集細(xì)胞；懸浮細(xì) 胞可直接離心收集。收集的細(xì)胞用冷的PBS 洗滌3次。每 1×106 個細(xì)胞中加入150-200μL PBS重懸并通過反 復(fù)凍融使細(xì)胞破碎(若含量很低可減少PBS的體積)。將提取液于1500×g離心10分鐘，取上清檢測。 2-2超聲波破碎條件：用20kHz頻率，150W的功率，在冰浴中進行超聲波破碎，每破碎2s，間隔3s，反復(fù)破碎三次。 2-3反復(fù)凍融：收集細(xì)胞懸液，4℃低溫離心（3000rpm，5min），棄上清，加入一定量PBS（200ul），輕輕吹打混勻，-20℃ 冷凍30 min，37℃解凍，如此反復(fù)3次，可形成細(xì)胞裂解液。 3、標(biāo)本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融. 4、不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。用途
本試劑盒用于測定魚血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中己糖激酶(HK)的含量。